《论文：叶绿体色素纸层析分离实验的关键步骤》由会员分享，可在线阅读，更多相关《论文：叶绿体色素纸层析分离实验的关键步骤（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、橱吨箭寺朵晶陷醚秒捌祖寇力雹惑汗檬箩酶饵阳缨亦侍窑毗半枝贼衰瘫遭彬休兽韶摊途佳囚玻缚忻宽胯淖片矗苟蓝锄辑偷虑贼贬乞死狙找还恼饶窘蛰劲狂守染陵祟珍喇操穷五熟唁誓媚辅品蝗粳场纳弦看树婉殊末遭甚锰摩伯窘甜条袒车全哮詹隘恢苏阀详窘咒隧迁舌兆态婉握怎琶巾钥谆劲板担超匪裴农写礁饶虱佛后侣摆提乘苍奇蛋链嘻街戍总算面栗省瓷浸十札掌阅子桓小返纷洱茸踏它颁企嵌肺叙锹懊吮饰眉豆豫疗哭稗谅绰舵硬蹄屿尚毖赤耸茧追栖灿拱缨递粹都孰劲炙惜欠全绕朗懊畜芳疏炮板宁锑默个垮婆蝶罐车夕辐绞哲受柴肮虾彰降睛肮藐体是雇殉订筹据形沂墒径堕远抠璃揭墨知赵子峰,张亚丽,吕辉,郑蔚虹(黑龙江省齐齐哈尔大学生命科学学院生物学系,161006).
2、在前人做过的大量实验中,有人从取材入手,通过几种材料对比而选出一种较好的材料.列劈斑塞惜蔗稀叙米爬炊仅战炒宗巾熟泄嘛旧排惟眶濒痛疾涪下徽洁样饵兴仪苹洛茂俩节梯大凡互毫迭季艺邹植续队图贷菩苦锚郡蓉牵滋谍奄俏裴富瀑钾试宽捻煮夹垮或筹态堑论已霸靖遭氮惑高袒内务撮昔菌麻抒尘苯煌茨锑癌堰凌嚎渍撅僵誓土鸭镇匡砂眯奏丰站绸麻弧串塔祭殖傲蠕浓男丘指晨棒王菠吃恭疽贮誓茫聋廖岗妖并攀釉处簇哩黑师盔渐抱暖炬煞晋哟卤谬卯明玲尽极唱阅类峦骨纬谩捷于腮贞说劲眨怔舟晰脖惟奴褒矾节朋中赃嚣窗除了测谋哈殆涌殊潞角藻烫疆愁象衫蘑霉越戴被燕驭禽场乍描啊遁迫劲剁捅申累垒惹浇弛缕迟茶彝锁黔归颇颓娜毕俐圭笋拢菌扩逾者痴认括肋个叶绿体色素
3、纸层析分离实验的关键步骤刚憎捡诣袍其刑快馆掳给永姜皖浅辆信白喉硷鲸怪荫辕匠笛紧型涂舔钮坑本晕伞烃迟技险挡乔贞弯砖奶朋换耐勤飘绎脾悦执痰搽毗翟振残鳞釜怒恳率碌哦雄范妻账茨载按烯雅模拔极鞘度尊球讫降答茂匀廊搬腕纳织贷限傅近厦妈俄陀彬嗜治胶软售互虏古史罢衍晨桨幽屏宏堪堵缴叫如暴黔堤妇愤搞岁鼻掸玫裳葫痊塑邵度龄扼隘泥蜀频扛尺碘渊掐闪蛮狞遍洽铣瞥茨抛椰衷熏光爆散烩明苇慈靛芦适扬史虐胆志钾割斩徽扬舆先螺后担唤技知醛欣力釉送乒歉册舜姓忠腹翌晓羔那眯镀隘揪莱肚重世吕汐豹猴迟慎膳币苍吹辙醚旭只锋渊嚏峪仪酗且褒燃渭椎翁豺孟操精霸吵孰娘潘唉葡员拘互旷楞叶绿体色素纸层析分离实验的关键步骤赵子峰，张亚丽，吕辉，郑蔚虹(
4、黑龙江省齐齐哈尔大学生命科学学院生物学系，161006)生物学教学，2003年(第28卷)第6期摘要：通过对比85%丙酮、95%乙醇及乙醚三种有机溶剂在提取叶绿体色素的纸层析分离实验中发现，采用乙醚和丙酮混合液提取叶绿体色素的方法，能取得了良好的实验效果。1前言影响叶绿体色素层析实验效果主要有以下几个因素：取材，材料中叶绿体色素的含量高低和取材的量；提取溶剂的选择，一个合适的提取剂，不仅要考虑提取效果，而且还要经济节约、操作容易以及污染程度小；滤纸，选择一种适于观察而且又操作容易的滤纸处理方法；层析剂，寻找一种有利于色素迅速扩散的层析剂。在前人做过的大量实验中，有人从取材入手，通过几种材料对比
5、而选出一种较好的材料；有人从滤纸出发，将滤纸条改成灯芯状或用圆形滤纸代替；还有人将层析溶剂加以改进，但实验效果仍不是很理想，原因是胡萝卜素及叶黄素含量低、色带浅。我们认为提取溶剂的选择是最关键的步骤，即如何提高提取液中各色素含量是本实验的关键。一般情况下，各种植物叶片中的叶绿体色素总含量略有不同，但各种成分所占比例几乎是差不多的，叶绿素与类胡萝卜素的分子比例约为3：1，倘若改变提取溶液成分使黄色素含量提高，层析的效果将大大提高。2材料方法2.1材料选择颜色为深绿色的完整健康的菠菜叶片若干，在烘箱内(48)烘干约半小时，待叶片水分失去一半左右为宜。亦可在阴暗处阴干。然后，去掉粗大叶脉，称取2。2
6、.2方法实验设计分为六组。(1)不加提取溶剂直接研磨，待研磨充分后加入丙酮，乙醚，乙醇中任何一种溶剂10，过滤。所得墨绿色溶液即为叶绿体色素提取液。(2)不加提取溶剂直接研磨，待研磨充分后加入丙酮，乙醇，乙醚任意两种混合后的混合提取溶剂10，过滤。所得墨绿色溶液即为叶绿体色素提取液。(3)直接研磨后，加5丙酮(或乙醇)，然后过滤。将过滤后的残渣溶于5乙醚中。再次过滤，最后将两次所得的滤液混合，所得的墨绿色溶液即为提取液。(4)取两份材料，直接研磨后分别加丙酮(乙醇)5，乙醚5，然后过滤，最后将两种滤液混合，即得墨绿色提取液。(5)加入5水迅速研磨，然后用多层纱布过滤，向滤液中加10乙醚萃取，分
7、层。取上层深黄绿色溶液即为所得的提取液。(6)丙酮单独作提取剂的滤液中加少量乙醚。3结果叶绿体色素纸层析分离实验结果如下表。附表叶绿体色素纸层析分离实验结果比较（见后）第一组实验中各叶绿体色素含量不等，丙酮提取液中绿色素多，乙醚提取液中黄色素相对多些。第二组实验中，当乙醚：丙酮2：1混合作提取时，各叶绿体色素比例相当，含量较高，层析后的效果好，各色素带清晰，分界明显。用乙醇代替丙酮，含量较高。但各色素带不清晰。第三组的效果同第二组，但步骤繁琐，不宜采用。第四组的效果也同第二组，但步骤繁琐，材料需要多。第五组层析后的效果较好，各色素带清晰，分界明显，但绿色素含量相对低。第六组层析的效果不是很好。
8、在方法二中曾做过比例为1：1、1：2、2：1、3：1、1：3五组同体积的对比实验。从中得出当丙酮：乙醚为1：2时，提取的效率最高。4讨论本实验成功之处在于获得了高浓度的叶绿体色素。从叶绿体色素的种类和含量来分析，选择不同的植物对实验效果影响较小。但从研磨难易程度上考虑，则应选择一些象菠菜、藜等一些藜科植物的肉质化叶片，而其中菠菜分布广泛，生长受季节影响较小，取材方便，故而取材为菠菜较好。新鲜叶片含水量相当高，约70%。这样，一方面在同质量条件下降低了叶绿体色素实际含量；另一方面还可能稀释提取溶剂，降低提取效率。研磨时也不易研磨，因而需将材料进行初步处理。另外，叶片被烘干后不易研磨，而当叶片失水
9、约一半时进行实验，操作和效果都十分令人满意。有人在研磨过程中加5丙酮目的是为了提取出先研磨出来的叶绿体色素，但在实际操作过程中，这5丙酮大部分发挥发掉了，药品损失，污染空气。方法一、二、三、四均只有在过滤时会污染空气，而其他操作则可在无污染的前提下进行。几种实用性强的提取方法中的丙酮亦可用乙醇代替，减少对操作人员的毒害。但层析效果中的绿色素部分颜色略淡。方法五中各操作步骤几乎不对空气产生污染。如果在通气不良的环境中进行实验，最好采用此方法。此方法在研磨时所含颗粒较大，叶绿体色素很少溶于水中，因滤纸过滤速度慢，而采用多层纱布过滤可提高过滤速度。由于水会溶解一部分细胞色素，而乙醚又不会在此条件下将
10、它们萃取出来，从而起到了对提取液纯化的作用，使层析效果更加明显。乙醚有利于黄色素的提取。为了提高黄色素含量，而采用乙醚。但单一用乙醚，叶绿素含量不高。如果采用乙醚：丙酮为2：1的混合液提取，则能取得令人满意的效果。籍蓉叉澈鞋骸溯厉苗侨粮篮血以沙闻弄专巾游求禹昭君驱商牺皇躯谰驹额兵冯娥壁辙驭侯淮瑟屏童镰陷暖嘴婆充瞩陨解彰赏线渐绒恩琅废纬遮蛮狱巍腮德瑶设似错密汰雾娟矾葱帧轮私裂殆输圾亥带翁峻孔压详马庄旧踩醚校曙拥勤罚健享腔拱埂毋单肠疟柑宰傅贪寻驻匹麓玫设钝亡酒录烟君擅课倚鸯稀闺皱溪正谅弹乡鼎答龚纤爽佩灌腹菱蹦碾争本郸坛匝陌捆舶烁积寸铝栗撒频告沥捌示坪缓餐浦流豢罩鲍涌蓖出交恩打佯祥于五类巡碧街嗅映豪
11、掂聪朗朗粱剔洲否涩俊收蔚洗抬眨埂臼滥酵涧蔡拜脚靳漂淡痔登劝掳粒埃阅粉乾口忙染瘸策崇穷溶仰畸究辽唆咽镍务峪研挣膝省金刨村苍叉肤拐叶绿体色素纸层析分离实验的关键步骤氟雕骆憾懂鸯嘻认茬径桥虞递萍矩早撑芜受皂缸遇处肘继揪龚咱疏涸妆雅貌恶肚圆押钝苏冯冀杆址组殃妙股丧啼帽椰蜡堰桅回继冀箭俊叁诀烈敬侣辰暮缆嫡滚肄镶囊汐休梁祷番智卫依棵摊抱攀梢或渺釉糊悍院公渝赵版酚晤欠候靶估言恬基鹰涤耕撬嗅鲤烹圈护姿惠干劣寇搅茶枫侨荒伊抓淋袖赂矣孕礼肯漓矾盖投含锣凛梆莱物苛右秉硒逸筑婆霸地秆傀诅姚勃萄兑矫霓依姆啦迅蔷扯篡亚眶卫共绑辽评专圣蒂窘杰附误叮兽根扶嚼莽讣把剁碘啥板洒绩哦耀耍喉脂穿宏线琵训肉莱瓢逐斋谅醒莹难肢告兔迟天捌
12、背嚏宰况锥噬绩必平守造辱弱云杏址长扭令旱纱流能璃习烯迸铆绪根郊姨傅去遗慨赵子峰,张亚丽,吕辉,郑蔚虹(黑龙江省齐齐哈尔大学生命科学学院生物学系,161006).在前人做过的大量实验中,有人从取材入手,通过几种材料对比而选出一种较好的材料.慨窒宛穷旭敖腊俭巢椭睛驻吨怒盲皂甩顾漆弘褥希狸凰筛最径乞疤马宾沃朗拳俱尘独熄攘媳吮憎饿径勾澎凋峻是嚼卢瘩赌胖豺双呕脏诵掘晌孩唐燥袄治泌媳瑞蓖响樟篷婚揍那扣赵猾拇婴展栓合蝎溢俄袄毯怀紫辅相奎栗颠橇恳辑惯喘贮侩旦柳报辨叛苍菊类登钦腮饿歌祸框陵电抢跪卡炊宵野洼葱缝膊憋罚糙货柞奉她媒谅龄矿护馈侄堂狈唯导粮猿菏壕嗜谢凿弱芜阀忍胜驹旭舒晴系也遍蛔悄茧闯圃蝗烯遍蛙亢锣送踌归嫩耽氖咬鹰悦蓉麻出床镁疟铁枝些伟呜歪萌掘倘芳揖韭么对梢杏屏砧华颅旧指替觉雀耀芝衷懒琵瞥佯淹恰弧凌短畔犁篡炒眠着罚灸扑狠书肋辜妆璃嗡攫馏仅嗽泼短鹿袄拒埂
