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1、武冈市展辉医院 微生物检验标准操作程序 展辉医院检验科 微生物检验操作程序（SOP）（第一版）制作人： 刘新平启用日期：2011年5月28日 目 录微生物室工作岗位职责4微生物检验室内质控操作程序（SOP）4微生物室标本接收程序（SOP）8微生物室标本接种程序（SOP）9病原微生物污染处理程序（SOP）10血液及骨髓培养标准操作程序（SOP）11痰（咽拭）培养标准操作程序（SOP）12尿液培养标准操作程序（SOP）13胆汁培养标准操作程序（SOP）14脑脊液培养标准操作程序（SOP）15脓液及伤口分泌物培养标准操作程序（SOP）16粪便培养标准操作程序（SOP）17穿剌液培养标准操作程序（SO
2、P）19生殖系统细菌培养程序（SOP）20细菌常规鉴定程序（SOP）21细菌涂片染色程序（SOP）28革兰阳性球菌的鉴定30 葡萄球菌属的鉴定30 微球菌属的鉴定32 链球菌属的鉴定32 肠球菌属的鉴定33 气球菌属的鉴定34革兰阴性球菌的鉴定35奈瑟菌属细菌的鉴定35韦荣球菌属细菌鉴定35革兰阳性杆菌的鉴定36 李斯特菌属与丹毒丝菌属的鉴定36棒状杆菌属的鉴定36诺卡菌属的鉴定37 红球菌属的鉴定38芽胞杆菌属的鉴定38肠杆菌科的细菌鉴定38弧菌属的鉴定39气单胞菌属的鉴定40不动杆菌属的鉴定40莫拉菌属的鉴定41金黄杆菌属的鉴定41假单胞菌属的鉴定41嗜血杆菌属的鉴定42放线杆菌属的鉴定4
3、2产碱杆菌属的鉴定43布鲁菌属的鉴定43军团菌属的鉴定43弯曲杆菌科细菌的鉴定43消化球菌属和消化链球菌属的鉴定44拟杆菌属及梭杆菌属的鉴定44厌氧无芽胞革兰阳性杆菌的鉴定44梭状芽胞杆菌属的鉴定45临床真菌的检验及鉴定46 毛癣菌属的鉴定46小孢子菌属的鉴定46 念珠菌属的鉴定47隐球菌属的鉴定47曲霉菌属的鉴定48毛霉属和根霉菌属的鉴定48镰孢霉属的鉴定48马尔尼菲青霉菌的鉴定48荚膜组织胞浆菌的鉴定49申克孢子丝菌的鉴定49微生物药敏试验程序49药敏质控程序51医院环境卫生学监测53空气含菌量的监测53工作人员手细菌监测54物体表面细菌的监测54消毒剂的监测55无菌物品的监测55血液培养
4、仪BacT/ALERT 3D Select操作程序 56ATBTM接种操作程序56微生物鉴定/药敏鉴定ATBTM操作57微生物室工作岗位职责1、负责全院临床各科细菌检验标本的验收，各种微生物检测；细菌培养手工和上机分析鉴定及药敏试验；支原体和衣原体检测；院感监测及其室内室间质控工作等。各项操作严格按照标准化操作程序（SOP）进行。2、每天检查细菌自动分析仪工作是否正常；观察培养箱温度、室内湿度、冰箱温度是否符合要求，并做好记录。查看培养基、各种生化管、试剂、药敏纸片、染色液等是否满足检测要求，并及时更新或配制。3、检查细菌培养申请单及原始登记本，确定标本接种是否正确。观察培养基、血液增菌培养瓶
5、生长状况，如发现有细菌生长立即进行移种，并涂片革兰染色，将细菌的染色特性及形态做好记录，及时通知临床医生。4、检测分析细菌，挑取可疑菌落涂片革兰染色镜检，将菌落纯分于血平板，做生化鉴定和药敏试验或上机分析鉴定，并及时发放检验结果报告。5、做好菌种的保存，对一些难得的菌株、标准菌株等要定期移种，一般一月一次，低温保存；做好移种记录，并做好生物安全防护。6、定期做好所用药敏纸片的质控，每周一次并有记录；3-6个月画一次质控图并有分析；对检验样本的数量、样本的阳性率、各种细菌的耐药性、各类细菌检出构成的百分比进行统计，并打印成文统一保存。7、经常保持室内的清洁卫生，生活垃圾与医疗垃圾要分装处理；每天
6、下班对室内空气进行消毒处理；生物安全防护严格执行医院医务人员职业暴露防护制度。微生物检验室内质控操作程序（sop）一、目的：规范微生物检验及室内质量控制，保证细菌检测及药敏结果的可靠性。二、程序的更改：该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出，并报请专业组长及科主任批准签字后生效。三、控制方法(一)对实验室人员的要求每个实验室的技术人员数要充足，且要具备良好的职业道德。凡参加细菌检验的技术人员，要有一定的理论知识和实践能力水平。要有广泛的基础训练教育，而且要在一位有经验的微生物学家的监督下，进行实际工作的严格训练，对新工作人员，除教会基本原理和操作外，还应对其进行职业道德教育。(
7、二)实验室操作手册制定微生物检验室标准化操作程序的手册，内容要全面，文字应简练，间隔一定时间要进行修改、删旧补新。操作手册一般包括以下内容：实验室的规章制度：包括各级人员职责、权限及各项有效的制度，如标本的接收、报告的发送、交接班、轮换、消毒隔离及安全制度等。样品采集、运送与处理；细菌检验流程及检测工具；检验方法与质控方法 ( 细菌分离、培养、鉴定与药物敏感试验 )；试剂和培养基质量控制；仪器操作手册；报告方式；临床意义及参考数据；实验室安全。(三)仪器设备的质控 1、高压灭菌器及干热灭菌器：使用灭菌器应遵守仪器操作规程。物品灭菌时，应同时放入监控指标。生物指标应用嗜热脂肪芽胞杆菌悬液，装入试
8、管或安培瓶，也可用纸带。化学指标用对热敏感的染料标记的变色带子。灭菌时，将试管或安培瓶、纸条或变色带等夹放在试验包裹中，以监视灭菌效果。对大型灭菌器，监视指标应放在不同位置。2、培养箱、水浴箱及冰箱：温度要求：培养箱351；水浴箱370.5；冰箱42，冰格51；低温冰箱202；超低温冰箱8010。温度记录：每天在工作开始和结束时记录温度，这类仪器要放入最高、最低温度计监视。3、二氧化碳培养箱：二氧化碳培养箱内的CO2含量控制在510之间。4、厌氧缸及厌氧培养箱：工作时应保证绝对无氧，在使用时应用化学和生物学两种指标进行监视。化学指标用美蓝或刃天青，无氧时均为无色；生物学指标用诺维氏芽胞梭菌，如
9、厌氧装置有隙缝时，该细菌即不生长。钯粒应新鲜并具有活性，用过钯粒通过加热1601.52小时，重新活化后使用。5、生物安全箱处理：对含有分枝杆菌和致病性真菌的标本，或培养物是需要的。穿过通风橱表面的气流，不应小于30.38M/分，用于消除橱内污染的紫外线灯及滤过装置，必须每隔3个月校正其性能一次，不合格者应调换。6、接种环要求长58cm，环直径约3mm；尿定量接种环，应定期检验其容量是否准确，否则应予校准；接种针长58cm。临床微生物实验室常用仪器设备的质量控制标准见下表。表1 常用仪器设备的质量控制仪器设备名称控制标准允许范围监控方法和频率光学显微镜每年 4 次或需要时，作清洁与调试培养箱35 1 每天观察记录温度二氧化碳培养菌每天观察记录温度和温度35 1 二氧化碳浓度气体5%-10%10%冰箱每天观察记录温度冷藏室4 2 冷冻室-5 1 低温冰箱-20 2每天观察记录温度压力蒸汽灭菌器 121 121 使用时观察并记录温度、压力，每周用嗜热芽孢菌或每次用化学方法测试灭菌效果 随着医学检验学科的不断发展，许多自动化仪器和微量生化反应系统相继进入微生物实验室。给细菌和真菌的培养、鉴定与药敏试验，带来快速准确的结果。对于这些仪器设备的质
