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1、NY 82.15 1988 中华人民共和国农牧渔业部部标准 果汁测定方法 胡萝卜素的测定 NY 82.15 1988 本标准等同采用国际果汁联盟 IFJU 分析法。No.44（1972）总类胡萝卜素和 胡萝卜素的测定。 1 原理 利用甲醇石油醚将果汁中的总类胡 萝卜素抽提出来，经氧化铝柱层析 ，使 胡萝卜素与其它色素分离，将洗脱液于 450nm 波长处进行比色测定。 2 试剂 2 1 甲醇（京 Q/HG 10 1506 1976） ：分析纯。 2 2 石油醚： （ HG 3 1003 1976） ：分析纯，沸程 60 90。 2 3 硫酸钠（ GB 639 1977） ：分析纯。 2 4 石英
2、砂：过筛，用浓盐酸浸泡，除 去铁质，再以稀氨水浸泡，最后用蒸馏水冲洗至中性，烘干备用。 2 5 氧化铝（ HGB 3413 1962） ：分析纯，用 8%水使部分失活。 2 6 标准 胡萝卜素溶液： 溶解 20mg 胡萝卜素于少量氯仿中， 用石油醚 （ 2.2） 稀释至 50mL， 用时吸取 2mL 再以石油醚稀释至 100mL,浓度为 8g/mL。 注：用氧化镁代替氧化铝，效果也很好。 3 仪器 3 1 分析天平：感量 0.0001g。 3 2 分光光度计。 3 3 层析柱： 2 ，L25 的层析柱。 3 4 分液漏斗： 250mL。 3 5 过滤器。 3 6 真空浓缩器。 3 7 容量瓶：
3、 50mL、 20mL。 3 8 移液管： 5mL、 10mL、 25mL。 4 测定程序 4 1 提取 准确称取 10g 果汁于烧杯中，加入 30 40mL 甲醇和石油醚溶液（ 1 1） ，搅拌，过滤。转移滤液至分液漏斗 中，加入甲醇和石油醚溶液（ 1 1）重复提取，直至石油醚相呈无色。 4 2 洗涤 加蒸馏水 100mL 于分液漏斗中， 旋摇使提取液中的甲醇溶于水中， 静置澄清，放掉下面含有甲醇的水层。经反复洗涤，直至提取液中的甲醇与石油醚完全分离。 加入无水硫酸钠干燥石油醚层，然后过滤到 200mL 容量瓶中，用石油醚洗涤硫酸钠，洗涤液并入容量瓶中，再用石油醚稀释至刻度。 4 3 浓缩
4、中华人民共和国农牧渔业部 1988 01 27 发布 1988 08 01 实施 中华人民共和国农牧渔业部 发布 实施NY 82.15 1988 取 175mL 提取液真空浓缩至 5mL 左右。 为清除痕量残留的甲醇， 再取 10mL石油醚，真空浓缩至 2 3mL。重复两次。 4 4 柱层析及洗脱 层析柱中， 氧化铝的填充高度为 8 。 先用 8%的水使部分失活。 再加入纯石油醚，当石油醚流出至液面刚好填过氧化铝层为止。将浓缩提取液加入层析柱中，使各种色素在柱上逐渐分离，而石油醚淋洗液则由下端流出。 当加入约 25mL 石油醚后， 胡萝卜素馏分便到达柱子的下限。此时，可再加入 25mL 石油醚
5、淋洗， 将馏出液收集在 25mL 量筒中， 转移至 50mL 容量瓶中， 并用石油醚洗涤量筒数次， 合并洗涤液 于容量瓶中， 最后用石油醚定容。 4 5 比色测定 标准曲线的绘制：用浓度为 8 g/mL 的标准胡萝卜素溶液配制成一系列浓度为 0.2、 0.4、 0.8、 1.2、 1.6、 2.0、 2.4 g/mL 的石油醚溶液，用纯石油醚作空白， 用 1cm 比色皿， 于 450nm 波长处测读吸光值。 以吸光值为纵坐标， 浓度为横坐标，绘制标准曲线。 用同样方法测读提取液的吸光值。从标准曲线中查出其含量。 5 结果的表示和计算 胡萝卜素的含量表示为 mg/100mL 试液，取两位小数。对浓汁应表示为 mg/100g 试液，取两位小数。 附加说明： 本标准由北京农业工程大学负责起草。 本标准主要起草人：张坤英。 中华人民共和国农牧渔业部 1988 01 27 发布 1988 08 01 实施 中华人民共和国农牧渔业部 发布 实施
