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1、第43卷 Vo143 第1期 No1 淡水渔业 Freshwater Fisheries 2013年1月 Jan2013 泥鳅仔稚鱼发育期间消化酶及碱性磷酸酶比 活力的变化 张云龙，樊启学，彭聪，胡培培，宗克金，宋林，沈凡 (华中农业大学水产学院，武汉430070) 摘要：研究了泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)从孵化至30 DAH(日龄，Days after hatching)几种消化酶及碱性磷 酸酶比活力的变化情况。胃蛋白酶直至30 DAH仍未检出活性。而胰蛋白酶表现出较高的比活力，其比活力在初 次摄食之后显著上升，6 DAH达到最大值之后开始显著降低(P005)
2、， 14 DAH之后也有显著的下降(P005)(图3B)。与脂肪酶相 似，淀粉酶比活力也有两个明显的峰值出现在4 6 DAH和14 DAH(P005)，6 DAH之后以及14 DAH之后都有显著的下降趋势(P005)，21 DAH之后呈现较平稳的趋势(图3C)。碱性磷酸酶 比活力从2 DAH开始显著上升(P005)，在6 DAH达到最大值，6 DAH之后迅速降低(P 005)，21 DAH之后逐渐达到平衡状态(图3D)。 莹 善 囊 谧 舞 暑 耋 蟪 溢 镒 鬻 馕 图3 泥鳅仔稚鱼发育期间几种消化酶比活力的变化 Fig3 The variation of the specific acti
3、vities of four digestive enzymes during the development of Manguillicaudatus larvae and juveniles 图中结果为平均值-4-标准差，n=3，不同字母表示差异显著(P005) 3讨论 泥鳅仔鱼在1 DAH即可检出胰蛋白酶活性， 其比活力在实验期间整体变化模式为先上升，在6 DAH时达到最大值，随后开始显著下降，10 DAH 之后表现比较平稳。这种变化模式在现有的研究结 果中比较普遍，如塞内加尔鳎(Solea senegalen sis)H 、尖吻重牙鲷(Diplodus puntazzo)81、细点牙
4、鲷(Dentex dentex) 、胭脂鱼(Mycocyprinus asiatic ItS) 等。胰蛋白酶的这种变化模式被认为是脊椎 动物包括鱼类个体发育的一个明显特征_3，“ 。泥 鳅仔鱼在初次摄食之前即可检出较高的胰蛋白酶比 活力，证明其更可能是受基因调控而非受食物诱 导 ” 。胰蛋白酶比活力在卵黄耗尽之后(6 一 oJ llI，n一 蜒 溢皿醐篷 22 淡水渔业 DAH)开始迅速下降，其主要原因是泥鳅体内可溶 性蛋白的累积 ，而并不是其消化能力的衰退。 胃蛋白酶出现的时间因种类而异，如古巴雀鳝 (Atractosteus tristoechus)在5 DAH出现 ，斑带副 鲈(Para
5、labrax maculatofasciatus)为10 DAH J，细 点牙鲷为17 DAH ，牙鲆(Paralichthys cal rni CU$)为18 DAH ，河鲈(Perca fluviatilis)为29 DAH 121。关于泥鳅是否有胃仍有争议，孟庆闻等 认为泥鳅无胃 ，但也有学者认为泥鳅具“I”型 胃 ” 。本实验中直至30 DAH仍未检出胃蛋白 酶活性，可以推断泥鳅在早期发育阶段缺乏分泌细 胞的分化。而胡廷尖等 发现泥鳅成鱼具有胃腺， 表明30 DAH时泥鳅的消化道发育仍未完善。仔稚 鱼无法消化食物中的蛋白质或者其它营养成分是很 常见的 ，其主要原因是消化酶活力不足。而泥
6、 鳅仔稚鱼缺乏功能性的胃可能会影响泥鳅对食物蛋 白的利用率，这是否与其苗种培育期间高死亡率相 关仍需深入研究。 脂肪酶在l DAH即可检出，证明其也是受基 因调控的 ， 。初次摄食之后脂肪酶比活力开始显 著下降，这也与斑带副鲈 、细点牙鲷 及日本 牙鲆(Paralichthys olivaceus) i91的研究结果相似。 鱼类仔鱼存在两种脂肪酶，一种涉及卵黄囊中脂肪 的消化，另一种则与食物中脂肪的消化相关 ， 而泥鳅仔鱼初次摄食之后脂肪酶比活力下降可能是 由于这两种酶的转变引起的。512 DAH呈现小 幅度的波动变化，之后开始显著上升，这可能与胰 腺外分泌功能以及利用机体储存和食物中脂肪能力
7、 的增强有关。 。14 DAH之后又开始显著下降至一 个相对平稳的水平，这可能是受食物摄入量变 化 及可溶蛋白沉积有关。这种变化模式似乎是 因种而异的，如波斯鲟(Acipenser persicus)L 3j、古巴 雀鳝 、黄线狭鳕(Theragra chalcogramma) 及 黑线鳕(Melanogrammus aeglefinus) 的脂肪酶比 活力则一直呈现上升趋势。 同样地，淀粉酶活力在1 DAH即可检出，表 明其在仔鱼期也是受基因调控的 ”。本实验 中，泥鳅仔稚鱼淀粉酶比活力有两个明显的峰值， 分别在内源性营养向外源性营养转变期和仔鱼向稚 鱼转变期。这也与古巴雀鳝 J、塞内加尔鳎
8、 及 大雀鳝(Atractosteus spatula) 的淀粉酶变化模式 相似。仔鱼初次摄食之后及1217 DAH淀粉酶比 活力上升，对这一现象的解释仍存在分歧。 Cahul1 的研究表明饲料中12的淀粉含量可显著 诱导舌齿鲈(Dicentrarchus labrax)淀粉酶活力升高。 而轮虫和卤虫的糖原含量分别为40和 64 ，对于杂食性鱼类来说其糖类的含量并不 高。由此可推测泥鳅仔鱼淀粉酶比活力的上升并不 是受饵料诱导的。Oozeki等 叫对黄线狭鳕的研究 发现活饵料中淀粉酶对鱼体淀粉酶全活力的贡献率 为25234，他们推测外源酶活力增加了鱼 体的淀粉酶活性。而本实验中淀粉酶的变化模式与
9、 黄线狭鳕持续增加的模式并不相同，因此无法用这 一结论来解释其活性升高。造成这一现象的原因更 可能是泥鳅消化系统快速发育引起的消化能力增 强。淀粉酶比活力在7 DAH之后显著下降可能是 由于泥鳅仔鱼肠上皮细胞增加，蛋白质和脂肪的利 用率上升而糖类的利用则降低了。而其在17 DAH 之后的显著下降可能是淀粉酶分泌系统的中止，各 种鱼类的中止时间并不一致，如塞内加尔鳎 在 18 DAH，舌齿鲈 则在25 DAH，这主要是由于 种间差异造成的。 碱性磷酸酶是一种肠上皮刷状缘膜酶，与鱼类 消化问接相关。AlvarezGonz61ez等 总结了磷酸 酶的两大作用，水解无机磷酸盐和转运营养物质。 因此，多
10、数学者都将碱性磷酸酶的显著上升作为仔 鱼肠功能发育完全的标志 H ，完成了仔鱼向 成鱼消化模式转变的关键步骤 。泥鳅碱性磷酸 酶比活力在26 DAH有显著的上升，证明了泥鳅 仔鱼肠上皮功能快速发育的过程。各种鱼类肠道功 能发育成熟的时间并不一致，如塞内加尔鳎 为 2127 DAH，而池沼公鱼(Hypomesus olidus)在卵 黄囊仔鱼期就具有功能化的肠上皮。肠上皮功能较 早的快速发育保证了泥鳅在缺乏功能性胃的条件下 仍能快速生长。 参考文献： 1Martinez I，Moyano F J，Femdndez C，et a1Digestive enzyme activity during l
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