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1、上课注意事项,保持安静; 实习课安排：两个班平均分三组. 分别在三个实验室,每组选组长一名. 地点:综合实验楼形态学实验室（5层） 内容:安排见课程表.,期末考试成绩分配,组织学与胚胎学,Histology and Embryology,主 讲: 杜 辉 Tel:0538 -6222080(O) Moble phone:18660893723 E-mail: ,教材和参考材料,使用的教材: 组织学与胚胎学 唐军民、张雷主编，北京大学医学出版社,参考材料： 1.组织学与胚胎学实验指导与图谱 苏衍萍等主编，上海科技出版社 2.组织学与胚胎学同步学习指导 泰山医学院组胚教研室编,网站,第一章 组织学
2、绪论,Chapter1 Introduction of Histology,一 、研究内容,组织学histology: 是研究正常（normal）机体微细结构（microstructure）和相关功能（function）的科学。 研究内容:细胞、组织、器官和系统几部分, 又称显微解剖学。,细胞（cellC）,组织（tissue）,器官（organ）,系统（system）,组织学 研究内容,组织学各论,组织学总论,1. 细胞 C膜、C质、C核 是人体结构和功能的最小单位 光学显微镜（light microscopeLM) 即可观察到。 电子显微镜（electron microscopy-EM）-
3、超微结构,细胞膜 细胞核 细胞质,卵细胞,神经细胞,血细胞,(1)透射电镜（EM）:观察C内部更细微的结构, 即超微结构。,(2) 扫描电镜 观察组织C的表面立体结构。,组织（tissue）,定义：形态相同或相似、功能相近细胞(cell)及细胞外基质 (extracellular) 构成。 长度单位：1m=103mm=106um=109nm 四大基本组织： 上皮组织 epithelial tissue 结缔组织 connective tissue 肌组织 muscular tissue 神经组织 nervous tissue,器官organ: 四大基本组织按一定的比例、数量及方式组合成器官。
4、系统system: 若干功能相关的器官构 成系统。,是宏观研究与微观研究的桥梁。 促进人类对自身的认识。 是静态结构与动态功能认知的纽带。 促进生理学的发展。 是异常结构与正常结构认知的桥梁 是病理学的基础。,二、组织学研究的意义,三、组胚学常用的研究方法,一、普通光学显微镜（conventional light microscope,CLM） 1.标本的制作 a 石蜡切片技术 基本过程: 取材、固定脱水及透明浸蜡包埋切片染色脱水、透明胶封 510um厚度,b 其它的标本制作方法,火棉胶包埋，冰冻切片，涂片，铺片，磨片。,2.最常用的组织切片染色法,苏木精（hematoxylin）-伊红（eo
5、sin）染色法 HE染色 苏木精：碱性染料 伊红：酸性染料。 组织结构的特征 嗜碱性:对碱性染料亲和力强的性质，可被苏木精染成紫蓝色。 嗜酸性:对酸性染料亲和力强的性质。可被伊红染成红色。 中性: 对两种染料亲和力不强的性质, HE染色着色淡。,其他染色法,银染法：硝酸银 银颗粒(黑)。 亲银性（argentaffin） 嗜银性（argyrophilia）,甲苯胺蓝-醛品红染色、磺焦油蓝染色等 异染性（metachromasia）,二、电镜技术,1.透射电镜技术（transmission electron microscope TEM）,a. 标本制作 5080nm的超薄切片 b.染色 重金属
6、盐染色 c. 超微结构 d.电子密度高、低,电子密度高: 当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时, 电子被散射的多, 因此, 射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像, 电镜照片呈黑或深灰色, 称为电子密度高。反之称为电子密度低。,2.扫描电镜技术(SEM),a. 标本制作 不需制作超薄切片 b.染色 重金属盐染色 c. 超微结构 用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感。,其它的显微镜技术,3.荧光显微镜技术（fluorescence microscope） 4.激光共聚焦扫描电镜技术（CLSM） （conforcal laser scanning microcope）,3. 组织化学技术,(1
7、) 一般组织化学(histochemistry)技术 原理 ：待检物试剂有色沉淀（原位） 常用技术： a.多糖和糖蛋白的糖链:过碘酸希夫（pariodic acid Schiff reactionPAS）反应 原理：多糖 过碘酸 多醛希夫试剂 紫红色沉淀 b. 脂类：苏丹、油红、尼罗蓝等 c. 酶 ：酶对底物作用原理 d. 核酸：盐酸处理，再用Schiff试剂检测,2. 免疫组织化学(immunohistology)技术 免疫细胞化学（immunocytochemistry)技术,根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质. 特异性强、敏感度高。 用标记的抗体与组织中的抗原结合，
8、标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察） 分为： 直接法 间接法,免疫组织化学原理模式图,3. 原位杂交技术（in situ hybridization） 即核酸分子杂交组织化学术,检测基因（DNA片段）的有无基因的表达活性（mRNA）。 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。 常用标记物：放射性核素、地高辛,4、细胞培养(cell culture)、组织培养技术 5. 干细胞（stem cell）和组织工程 (tissue engineering) 6、图像分析术(image analysis)又称形态计量术（morphometry) ,体视学(sterology) 流式细胞仪技术等。,其它技术,四、学习方法,建立立体和动态的概念 注意结构和功能的联系 注重理论与实践相结合 勤奋加技巧,提高学习效果,本 章 测 试,1.名词解释：,HE染色 （HE staining ） PAS反应 （PAS reaction）,2.填空： 在电镜照片上呈黑色或深灰色称 电子密度，呈浅灰色称 电子密度。 关于石蜡切片技术切片厚度一般为 ；透射电镜技术切片厚度一般为_。,
