2018届高三生物二轮专题复习专题十一现代生物科技专题考点1基因工程和克隆技术课件新人教版

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1、考点1 基因工程和克隆技术,专题十一 现代生物科技专题,诊断基础,1.基因工程的正误判断 (1)限制性核酸内切酶只能用于切割目的基因( ),提示 也可用于切割质粒。,(2)DNA连接酶能将两碱基间形成的氢键连接起来( ),提示 DNA连接酶是将两核苷酸间通过形成的磷酸二酯键连接起来。,(3)质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体( ) (4)DNA连接酶能够将任意2个DNA片段连接在一起( ),答案,提示,提示 具有相同粘性末端的2个DNA片段连接在一起。,(5)抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达( ),提示 植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的过程,在这两个

2、过程中都会发生细胞增殖(有丝分裂),且在再分化过程发生细胞分化,形成各种组织细胞。,2.克隆技术的正误判断 (1)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性( ) (2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性( ),提示 在生物体内,由于基因的选择性表达,细胞不能表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官,细胞表现全能性的必要条件是离体状态、一定的营养物质和激素。,(3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中,不会发生细胞的增殖和分化 ( ),答案,提示,提示 制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胰蛋白酶处理,不能使用胃蛋白酶,因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用,但这样的环境

3、不适于细胞生存。,提示 连续细胞系的细胞一般都培养了多次,大多数具有异倍体核型。,(4)愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的( ),提示 外植体通过脱分化形成愈伤组织。,(5)用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性( ),提示 原生质体具有全能性。,(6)连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型( ),答案,提示,(7)制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织,再用胃蛋白酶处理( ),提示 杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得单克隆抗体。,(8)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸( ),提示 肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2的目的是维持培养液pH

4、。,(9)与“多莉”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和核移植( ) (10)植物原生质体融合和动物细胞融合原理是相同的( ) (11)杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得单克隆抗体的胚胎( ),答案,提示,整合要点,一、基因工程 1.基因工程的工具,拟核,双链,环状DNA分子,抗生,素抗性基因,DNA序列,粘性,碱基互,补,2.基因工程的原理和技术,化学,PCR,扩增,同一种限制,性核酸内切,酶,3.转基因动物、植物及微生物的培育流程,受精卵,转基因,转基因,(1)使用限制性核酸内切酶的注意点 一般用同种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因。 不同的限制性核酸内切酶也能切割出相同的粘

5、性末端。 (2)DNA连接酶DNA聚合酶 DNA连接酶连接两个DNA片段,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。,易错警示,(3)限制性核酸内切酶DNA酶解旋酶 限制性核酸内切酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列,并使两条链在特定的位置断开;DNA酶是将DNA水解为组成单位;解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 (4)启动子、终止子 启动子(DNA片段)起始密码子(RNA)。 终止子(DNA片段)终止密码子(RNA)。,二、植物的克隆 1.植物组织培养关键过程总结,愈伤组织,避,幼苗或胚,状,需,需,2.植物细胞工程操作,3.植物细胞培养、器官培养和原生质体培养的关

6、系,三、动物的克隆 1.动物的细胞和组织培养 (1)动物克隆的技术基础是 。 (2)动物细胞培养的过程:动物细胞培养包括组织块的切取、组织细胞的分散及细胞培养三个阶段。分散组织细胞常用的方法有 和 。,动物的细胞和组织培养,机械消化法,胰酶消化法,(3)原代培养和传代培养的含义 原代培养:从 取出后立即进行的细胞、组织培养的过程。 传代培养:将 分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。 (4)动物成纤维细胞的培养过程:切取组织小片 培养 培养。,机体,原代培养细胞,胰蛋白酶酶解,原代,传代,2.动物的细胞融合技术及其应用 (1)细胞融合,杂交,聚乙二醇(PEG),(2)单克隆抗体

7、的制备,杂交瘤,腹水,培养液分离,3.细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 (1)核移植:利用一个细胞的 来取代另一个细胞中的细胞核,形成一个重建的“合子”。 (2)动物的克隆繁殖,细胞核,早期胚胎,4.规避克隆动物与试管动物的3个误区 (1)误区一:试管动物与克隆动物的产生都是无性生殖。 纠正:试管动物的产生是 生殖,克隆动物的产生是 生殖。 (2)误区二:试管动物(哺乳类)的产生是在 进行的,克隆动物(哺乳类)的产生是在 进行的。 纠正:试管动物(哺乳类)和克隆动物(哺乳类)早期胚胎之前都是在体外进行的,早期胚胎经过 之后是在体内进行的。,有性,无性,体外,体内,胚胎移植,(3)误区三:胚胎移植

8、的优势是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,因此胚胎移植的胚胎只能来自体内受精的胚胎。 纠正:胚胎移植的胚胎有三个来源:体内正常 产生的胚胎、核移植产生的重组细胞培养而来的胚胎、体外受精产生的早期胚胎。,受精,探究考向,题型一 基因工程的原理、工具和技术 1.(2017海淀区期中)科研人员分别将蛋白C基因和蛋白G(葡萄糖转运蛋白)基因与质粒连接,形成重组DNA分子。将质粒和上述两种表达载体分别转入三组蛋白G缺陷细胞,在三种不同浓度的葡萄糖间隔刺激下,测定三组细胞的葡萄糖转运速率,结果如图。下列分析不正确的是,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,A.组实验的目的是排除空质粒对实验结

9、果的影响 B.、组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而减小 C.由实验结果推测蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白 D.实验结果表明蛋白C的转运功能强于蛋白G,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,解析 组中转入的是空质粒,其目的是排除空质粒对实验结果的影响,A正确; 由图可知,、组葡萄糖转运速率随葡萄糖浓度增加而增加,B错误; 组中转入的是空质粒,组转入的是蛋白C基因,对比组与组结果可推知蛋白C是一种葡萄糖转运蛋白,C正确; 组中转入的是蛋白G基因,组转入的是蛋白C基因,结果组的转运速率大于组,这表明蛋白C的转运功能强于蛋白G,D正确。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10

10、,11,12,2.(2017宣城期中)下列有关人胰岛素的重组DNA分子的叙述,正确的是 A.重组DNA分子中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA逆转录获得 B.重组DNA分子的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点 C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D.胰岛素的重组DNA分子中要有启动子和终止密码子,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,解析 由于基因的选择性表达,在人的肝细胞中,没有胰岛素基因转录的mRNA,A错误; 重组DNA分子的复制启动于复制原(起)点,胰岛素基因的表达启动于启动子,B错误; 标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有

11、目的基因,从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来,C正确; 胰岛素的重组DNA分子中要有启动子和终止子,终止密码子存在于mRNA上,D错误。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,3.(2018“七彩阳光”联盟)某研究小组欲利用抗虫基因,通过农杆菌转化法培育抗虫玫瑰。图1和图2分别表示出了抗虫基因和农杆菌Ti质粒的限制性核酸内切酶识别位点和抗生素抗性基因(pst、Sma、Alu表示限制性核酸内切酶切割位点;amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因)。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,请回答: (1)为获得大量抗虫基因,且保证形成重组质粒时,目的基因

12、以唯一方向接入,可选用_(填限制性核酸内切酶的种类)分别切割目的基因和Ti质粒,再用DNA连接酶连接,形成重组DNA分子,再与经过_处理的_(A.有amp和tet B.有amp,无tet C.无amp,有tet D.无amp和tet)农杆菌液混合,使重组DNA进入农杆菌。再利用农杆菌转入培养的玫瑰细胞,使目的基因导入玫瑰细胞中。,答案,Sma和Pst,CaCl2,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,D,点石成金,(2)将含有导入了目的基因的玫瑰细胞的试管放在_上,进行液体悬浮培养获得胚性细胞,进而培育成抗虫玫瑰。 (3)这种借助基因工程方法,将外源基因导入受体细胞,再通过这些

13、转基因细胞进行培养,获得具有特定性状的新植株的技术就是_ _。 (4)当前多地过度开发旅游造成生态环境的破坏,为减缓生态环境的破坏,可发展_工程,并在旅游区种植抗虫玫瑰,可有效降低农药对环境的污染,并获得较佳的经济效益、社会效益和_。,答案,摇床,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,植物细胞工程,技术,生态旅游,生态效益,有关基因工程操作易错分析 (1)基因文库中不是直接保管相应基因,基因文库中的基因保存在受体菌中。 (2)原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,有利于目的基因的复制与表达,因此常用大肠杆菌等原核生物作为受体细胞。 (3)植物细胞的全能性较高,可经植物组

14、织培养过程成为完整植物体。因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞;动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。,点石成金,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,(4)操作工具有三种,但工具酶常用两种,载体不是酶;在基因工程操作步骤“获得目的基因”和“形成重组DNA分子”两个过程中通常用同种限制性核酸内切酶,目的是产生相同的粘性末端;DNA连接酶只在“形成重组DNA分子”操作中用到。 (5)一般情况下,用同一种限制性核酸内切酶切割质粒和含有目的基因的片段,但有时可用两种限制性核酸内切酶分别切割质粒和目的基因。这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。 (6)标记基因的作用

15、和种类:标记基因的作用筛选、检测目的基因是否导入受体细胞;常见的标记基因有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,A.的形成需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B.侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到的染色体上 C.的染色体上若含抗虫基因,则就表现出抗虫性状 D.只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异,题型二 基因工程的应用 4.如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,解析 重组质粒的形成需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与,DNA聚合酶一般用于DNA复制过程,A错误; 侵染植物细胞后,重组Ti质粒上的TDNA整合到植物细胞的染色体上,B错误; 受体细胞的染色体上含抗虫基因,但不代表该基因就一定成功表达,因此不能确定是否表现出抗虫性状,C错误; 只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异,D正确。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,5.(2017南昌期中)下列关于基因工程应用的叙述,正确的是 A.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C.一种基因探针能检测水体中的各种病毒 D.利用基因工程生产乙肝疫苗时,目的基因存在于人体B

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