《流式细胞术对1例白血病病例的免疫表型分析》由会员分享，可在线阅读，更多相关《流式细胞术对1例白血病病例的免疫表型分析（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果 流式细胞术对1例白血病病例的免疫表型分析 【关键词】 免疫表型 【摘要】 目的 探讨白血病免疫分型在临床诊断、 治疗 中的作用。 方法 采用免疫荧光标记的方法，用流式细胞仪 分析 患者血细胞表面各种抗原标记物的表达情况。结果 形态学最初诊断为再生障碍性贫血的这例病例，经流式细胞术检测出有异常幼稚细胞群体的存在，两次的免疫表型分析显示异常细胞群体由最初的两群细胞克隆演变为一个克隆群体，并带有B细胞系列的抗原标记，临床最终诊断为急性淋巴细胞白血病。 目前 采用针对
2、B系的化疗方案，疗效较显著。结论 流式细胞术的免疫表型分析对临床的诊断、治疗方案具有重要的 参考 价值。 【关键词】 免疫表型；流式细胞术 【Abstract】 Objective To evaluate the effect of flow cytometric immunophenotyping in clinic diagnosis and Treated with fluorescEin-conjugate antibody, expression of antigen from bone marrow cells was analysed by flow cytometry. Res
3、ults This case originally diagnosed as AA by morphologic method was discovered to have lots of blasts by flow cytometry. Through two times immunophenotyping analysis, two abnormal colonies developed a colony with B cell antigen. The case was finally diagnosed as ALL and treated with chemotherapy and
4、 having a good curative effect. Conclusion Immunophenotyping of flow cytometry have important reference effect on clinic diagnosis and therapy. 【Key words】 immunophenotyping；flow cytometry 流式细胞术的免疫表型分析在血液系统疾病领域越来越受到人们的重视，流式所提供的信息对临床的诊疗具有重要的参考价值，现将此病例的免疫表型分析报告如下。 1 临床资料 一般资料 患者，男，57岁，面色苍白，呈贫血貌，形态学最初诊
5、断为再生障碍性贫血。 抗体 CD45PC5、CD3FITC/CD16+56PE、CD2FITC、CD4PE、CD5FITC、CD7PE、CD19FITC、CD10PE、CD20FITC、CD22PE、HLA-DR FITC、CD33PE、CD11bFITC、CD14FITC，为Coulter-Immunotech公司产品； CD34FITC、CD13PE、CD11cPE、CD15PE，为PHARMINGEN公司产品。 仪器 FACS Vantage流式细胞仪。 样品的制备 100l全血加20l抗体，室温避光孵育20min，加2ml溶血素，孵育10min，PBS洗二次，置4冰箱待检。 流式分析
6、FACS Vantage流式细胞仪氩离子激光器，激发波长488nm。在CD4PC5对侧向散射光散点图中，用门圈出各个细胞群体，分析各个细胞群体的抗原标记物的表达量，收集测定细胞XX0个。 2 结果与讨论 利用流式细胞仪进行免疫分型，最重要的一个标记物就是CD45，众所周知，CD45是人类共同的白细胞抗原标记，它的表达与否、强弱高低与细胞的成熟度有关，原始细胞和幼稚细胞在向成熟细胞分化过程中，CD45表达的荧光强度递增，因此利用流式细胞仪特有的SSC和CD45两个参数就可在流式图谱中鉴别至少4个细胞群体：淋巴细胞群体、单核细胞群体、粒细胞群体、原始或幼稚细胞群体1，2。由于流式细胞仪可以任意圈出
7、一个细胞群体进行细胞的免疫表型分析，因此用门圈出各个细胞群体，结合T系、B系、髓系各个抗原标记物，即可鉴别群体所在系列及其分化阶段。 本文这例形态学最初诊断为AA的病例，曾进行两次免疫表型 分析 。第一次免疫分型时，就已发现有异常细胞群体的存在，见图1，两群异常细胞群体(Blast1和Blast2) 约占有核细胞群体60%，粒系群体明显增生受抑，只占有核细胞群体5%，其中较幼稚一群Blast2HLA-DR阳性，CD19、CD10双阳性，CD20、CD22双阳性，另一群Blast1 群体除表达上述抗原外，CD33也为阳性，推测此时骨髓内幼稚群体过度增长，在进一步分化的过程中出现部分淋系与粒系标记
8、双表达的细胞群体。相比之下成熟淋系群体在数量和抗原标记表达上表现基本正常，T系表达CD3、CD5、CD7、CD2、CD4，B系表达CD19、CD20、CD22，CD10不表达；而粒系群体虽然所占比例较低，但也表达其正常的抗原标记CD13、CD15、CD11b、CD11c。 图1 流式细胞术免疫表型分析略 相隔9天进行第二次免疫分型检测，各细胞群体分布有了变化，见图2，带有B系与髓系双抗原标记的幼稚群体消失，异常群体仅见一群，为带有B系抗原标记， HLA-DR阳性，CD19、CD10双阳性、CD20、CD22双阳性， B细胞系显著异常3；成熟淋系群体免疫表型基本正常，但粒系群体(Myeloid)
9、免疫表型发现，尽管有抗原标记物CD13、CD15、CD11b、CD11c的正常表达，但HLA-DR表达过高，成熟粒系分化有异常。可见，此病例由最初的两群细胞克隆演变为一个克隆群体，并表达显著的B细胞系列的标记，流式诊断为急性B淋巴细胞白血病，临床最终也支持这一结论，现采用倾向于B系的化疗方案，疗效较显著，达完全缓解。 图2 流式细胞术免疫表型分析 略 流式细胞术的免疫表型分析为临床提供了一个不同于FAB分类的亚型诊断，它为临床的诊断、 治疗 方案的选择甚至预后都提供了极为重要的信息 参考 ，有关方面的资料正在积累之中，相信其在临床的 应用 将具有更广阔的前景。 【参考 文献 】 1 Micha
10、el J, K Lynn Guenther, KEith E, et al. Immunophenotyping of Acute Leukemia by Flow Cytometric Analysis. Am J Clin Pathol,1993,100:534-540. Denise A Wells, George E Sale, Howard M Shulman, et al. Multidimensional flow cytometry of marrow can differentiate leukemic from normal lymphoblasts and myeloblasts after chemotherapy and bone marrow transplantation. Am J clin Pathol,1998,110:84-94. 左连富.流式细胞术与生物医学.沈阳：辽宁 科学 技术出版社，1996,20. 课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。
