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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划骨诱导材料生物材料骨组织工程讨论组织工程是近年来正在兴起的一门新兴学科，组织工程一词最早是由美国国家科学基金会1987年正式提出和确定的。它是应用生命科学和工程学的原理与技术，在正确认识哺乳动物的正常及病理两种状态下结构与功能关系的基础上。研究、开发用于修复、维护、促进人体各种组织或器官损伤后的功能和形态生物替代物的科学。组织工程的核心就是建立细胞与生物材料的三维空间复合体，即具有生命力的活体组织，用以对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代。共基本原理和方法是将体外培养
2、扩增的正常组织细胞，吸附于一种生物相容性良好并可被机体吸收的生物材料上形成复合物，将细胞-生物材料复合物植入机体组织、器官的病损病分，细胞在生物材料逐渐被机体降解吸收的过程中形成新的在形态和功能方面与相应器官、组织相一致的组织，而达到修复创伤和重建功能的目的。骨组织构建构建组织工程骨的方式有几种：支架材料与成骨细胞；支架材料与生长因子；支架材料与成骨细胞加生长因子。生长因子通过调节细胞增殖、分化过程并改变细胞产物的合成而作用于成骨过程，因此，在骨组织工程中有广泛的应用前景。常用的生长因子有：成纤维细胞生长因子、转化生长因子、胰岛素样生长因子、血小板衍化生长因子、骨形态发生蛋白等。它们不仅可单独
3、作用，相互之间也存在着密切的关系，可复合使用。目前国外重点研究的项目之一，就是计算机辅助设计并复合生长因子的组织工程生物仿真下颌骨支架。有人采用rhBMP-胶原和珊瑚羟基磷灰石复骨诱导性的骨移植、修复大鼠颅骨缺损，证实了复合人工骨具有良好的骨诱导性和骨传导性，可早期与宿主骨结合，并促进宿主骨长大及新骨形成。用rhBMP-胶原和珊瑚复合人工骨修复兔下颌骨缺损，结果显示：2个月时，复合人工骨修复缺捐赠的交果优于单纯珊瑚3个月时，与自体骨移植的修复交果无明显差异。目前，用组织工程骨修复骨缺损的研究，已从取材、体外培养、细胞到支架材料复合体形成等都得到了成功。有人用自体骨髓、珊瑚和rhBMP-2复合物
4、修复兔下颌骨缺损，结果表明：术后3个月，单独珊瑚组及空白对照组缺损未完全修复；珊瑚-骨髓组和珊瑚-rhBMP-2组及单独骨髓组已基本修复了缺损；而骨髓、珊瑚和rhBMP-2复合物组在2个月时缺损即可得到修复。我们用骨基质成骨细胞与松质骨基质复合物自体移植修理工复颅骨缺损的动物实验，也取得了满意的治疗效果。带血管蒂的骨组织工程是将骨细胞种植于预制带管蒂的生物支架材料上，将它作为一种细胞传送装置。我们将一定形状的thBMP-2、胶原、珊瑚复合物植入狗髂骨区预制骨组织瓣，3个月时，复合物已转变成血管化骨组织。组织工程骨的构建又可以分为体内构建和体外构建两种形式，体内构建是将成骨细胞-支架复合物植入体
5、内，修复骨缺损。体外构建则是通过体外组织培养的方法应用水降解支架材料，接种成骨细胞，构建骨组织。体外构建虽然具有一些在体内构建难以实现的优点，但是在传统的静态培养条件下不能建造出厚度大于的骨组织。生物反应器和灌注培养系统的先后出现，改善了细胞、组织在体外培养的条件，有助于模拟体内环境、获得营养、排除代谢产物和物质交换，和促进组织工程产品实现商品化。一、骨组织工程支架材料1、人工骨的支架材料功能人的骨头在人体中起一支撑人体重量，维持人体力学平衡的功能，因此，人工骨的组织工程支架材料必须具备以下两个功能。有一定机械强度以支撑组织的高强度材料，以保证材料植入人体后，有支撑体的重量，不改变骨骼形状。有
6、一定生物活性可诱导细胞生长、分化，并可被人体降解吸收。在组织工程出现以前的第一种功能的材料为非降解性材料，仅起到支撑固定的作用。存在的一个问题是：在骨头愈合后，必须进行第二次手术取出这种材料。第二种功能的材料主要是给细胞提供三维生长空间，其本身具有生活性，可诱导细胞分化生长和血管的长入，以形成活的骨组织，使其具有人骨的功能和作用。以上两面三刀个对骨支架材料要求的条件可以归结为：组织工程支架材料是具有一定强度并具有生物活性的可降解材料。2、人工骨支架材料研究进展人工骨支架材料可分为两类，即生物降解和非生物降解型。早期的人工骨支架材料都是非生物降解型的，这类材料有：高聚物，金属材料，生物惰性陶瓷，
7、生物活性陶瓷等。这些材料的特点是机械强度高。但存在二次手术问题，因此人们开始研究使用可生物降解并具有生物活性的材料，这类材料有纤维蛋白凝胶、胶原凝胶、聚乳酸、聚醇酸及其共聚体、聚乳酸和聚羟基酸类、琼脂糖、壳聚糖和透明质酸等多糖类。目前研究和使用的骨组织支架材料是降解材料或降解和非降解材料的结合。组织工程面临的挑战利用细胞和合成聚合物建造新器官存在着可怕的障碍，但却是可以克服的。组织工程正成为医学科学中欣欣向荣的新领域，仅仅在几年前，大多数科学家认为人类组织只能通过从捐献者那里直接移植或利用由塑料、金属和计算机芯片制造的完全人工部件进行替换。许多人认为完整的生物人工器官由活细胞与自然的或人工的聚
8、合物融合创造的混合物永远不能制造出来，人类移植器官的短缺问题只能通过某种程度利用来自(来自:写论文网:骨诱导材料)动物的器官而获得解决。然而，现在世界各地实验室进行的创新性和富于想象力的工作表明，制造生物混合器官是完全可行的。开发组织工程产品的生物技术公司的销售额己接近40亿美元，并且每年的开支为此额的25以上。不过，在这些投资通过可靠地减轻许多组织中的疾病所引起的人类痛苦而得到回报之前，组织工程必须克服某些重大的困难。现成的细胞确定细胞的可靠来源是组织工程的首要前提。动物细胞是个可能的来源，但确保它们具有安全性依然是个令人关注的问题，因为免疫系统对其排斥的可能性很高。基于这些原因，人类细胞是
9、首选对象。最近，对人类胚干细胞一一能够发育成一系列组织从而形成人的细胞的鉴别提供了解决此问题的一种方法。但是，从能够操纵培养中的胚干细胞到能够生产可用于创造或修复特定器官的完全分化细胞，骨诱导人工骨BAM骨诱导人工骨是全国唯一个填充和诱导双重功能的新一代骨修复材料BAMOICPC，是国际著名生物材料专家、国家生物医学材料工程技术研究中心主任张兴栋教授在其建立的我国原创性生物材料骨诱导理论的基础上研究开发的新一代人工骨，是国家自然科学基金重大项目、国家重点基础研究规划项目资助下取得的应用研究成果。BAM骨诱导人工骨是近于自然骨结构和无机组成的人工合成材料，具有优良的生物的相容性和骨传导性。BAM
10、骨诱导人工骨可直接诱导长入孔隙内的间充质细胞向骨母细胞、成骨细胞分化并进一步成骨，具有优良的骨诱导性，且无细胞的无限增殖。BAM骨诱导人工骨不外加骨生长因子和活性细胞，无感染传播源，避免了大量使用昂贵的外源性生长因子及其导致的免疫排斥反应。BAM骨诱导人工骨为外伤、病变及先天畸形等导致的骨缺损的修复和重建提供了又一选择。OICPC的骨诱导机制OICPC类似自然骨的特定化学组成与三维多孔结构易于吸附内源性骨生长因子，进而诱使长入其内的间充质细胞向OICPC趋化、迁移OICPC孔壁局域处内源性生长因子浓度达到骨诱导发生所需的阈值时，间充质细胞便向骨母细胞、成骨细胞分化，并进一步成骨。1、XX年获得
11、军队内部医疗系统科技进步二等奖。2、XX年1月获得国家教育部自然与科学一等奖。3、我国也因此成功获得第十九届国际生物陶瓷大会的举办权。4、被列为国家重点基础研究发展规划项目。5、被列为国家自然科学基金重大项目。6、被列为国家生物医学材料工程技术研究中心研发项目。本品为近于自然骨结构和无机组成的人工合成材料，具有优良的生物相容性、骨传导性和骨诱导性，不外加骨生长因子和活体细胞即可于人体中直接诱导新骨于本品内形成，并进一步与自体骨融合骨化；本品不导致细胞的无限增殖，无感染传播源，可避免因外源性生长因子的引入所致的免疫排斥反应。间充质干细胞成骨及成脂诱导培养基标准制作方法?浏览：185|更新：XX-
12、07-0111:12间充质干细胞培养细胞诱导分化时必然用到的就是培养液，配置出合适的培养液能够促进细胞的分化，因此这一步操作时相当的关键。如何才能配置适合的诱导培养液呢？济南中赛生物来介绍成骨与成脂诱导培养液的配备方法。成骨诱导培养液配备与诱导操作：1.准备含10%FBS的-MEM培养液；2.在备好的-MEM培养液中添加50M抗坏血酸,10mm-磷酸甘油和100nm地塞米松；3.准备6孔培养板，将P4细胞按照5103个/平方厘米的规格接种于原始-MEM培养液中；4.待细胞长至基本融合后，更换上述制备完成的成骨诱导培养液；5.每三天换液一次，细胞长至7天时进行碱性磷酸酶染色；6.二十八天后再进行
13、矿化结节的茜素红染色。茜素红染色方法介绍：1.去除细胞当前使用培养液，使用PBS清洗两次；2.使用10%甲醛室温固定15分钟，完成后使用重蒸馏水冲洗两次；3.按照1ml/孔加入40mM的茜素红染色液，室温孵育20min并轻微振荡；4.清除掉没有完全结合的染料，用重蒸馏水漂洗并振荡5min重复4次；5.倾斜放置2min,吸取多余的重蒸馏水；倒置显微镜观察拍照记录。成脂诱导培养液配备与诱导操作：1.配置FBS10%含量的HG-DMEM培养液；2.在配制完成的HG-DMEM培养液中加入1M地塞米松,10g/ml胰岛素，200M吲哚美辛和IBMX；3.准备6孔培养板，将P4细胞按照2104个/平方厘米
14、的规格接种于原始HG-DMEM培养液中4.待细胞长至基本融合后，更换上述制备完成的成脂诱导培养液培养2天，在用只含有10g/ml胰岛素的成脂维持培养液培养1天，如此交替循环培养至14天，使用红油O染色。红油O染色方法介绍：1.去除细胞使用的当前培养液，使用PBS清洗两次；%甲醛室温固定20分钟；3.重蒸馏水清洗3此，空气中干燥；4.加入%的红油室温孵育一小时；5.配制70%乙醇溶液清洗3次；6.倒置显微镜观察拍照记录。丁香园二、诱导成骨体系1试剂溶剂终浓度储存浓度1ml体系加量Dex去离子水M1mMLVcPBS50M50mM1L-磷酸甘油PBS10mM1M10L2DMEM和10%FBS。33代
15、以上细胞，24孔板每孔105个细胞，六孔板每孔6000个细胞，每三天半量换液，共诱导2周。成骨诱导剂：地塞米松，-甘油磷酸钠10mmol/L、维生素C50ng/ml，高糖DMEM，青链霉素各100u/ml，体积分数10%的胎牛血清。对成脂肪诱导要特别提醒你，用国产血清比进口的效果更好。我用的是SIGMA的地塞米松，25mg包装的，248元贵的惊人！须用无水乙醇溶解。我也用过病房常用的5mg的地塞米松磷酸钠，效果也挺好的。首选的是dexamethasone-watersoluble，cellculturetested。至少可以配成1:1000的母液，使用起来很方便。使用医用制剂尤其要小心溶剂的问题，好些制剂不是融解在水里的，如果你没有设置合适的阴性对照，会给你的实验带来Bug。脂肪诱导培养液：DMEM,10FCS，10-6M地塞米松，100微克ml1一甲基一3一异丁基一黄嘌呤，50微克ml抗坏血酸。很难找到一套抗兔的抗体。油红染色
