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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划生化报告单看血糖实验：Folin-Wu法定量测定血糖的含量一、实验原理Cu2+(CuSO4)+葡萄糖Cu+(Cu2O)Cu2O+酸性钼酸试剂蓝色钼化合物OD420比色无蛋白血滤液中的葡萄糖和碱性硫酸铜溶液共热反应，Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+,Cu2O又把酸性钼酸试剂还原成低价的蓝色钼化合物钼蓝。血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。二、实验仪器1、新鲜兔子血2、滤纸3、血糖管4、奥氏吸管5、锥形瓶6、漏斗7、电
2、炉8、水浴锅9、7200型可见分光光度计三、实验试剂1、标准葡萄糖溶液(1)1%葡萄糖母液：称取葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至100ml。(2)葡萄糖标准液：取葡萄糖母液于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。2、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠10g，溶于蒸馏水并定容至100毫升。3、/LH2SO4溶液：于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。4、碱性硫酸铜溶液A液：无水碳酸钠35g，酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水，稀释定容至液：硫酸铜晶体5g，溶于蒸馏水并定容至100ml。临用时，A液：B液=15：1混合，混合液于冰箱中保存。5、酸性钼酸盐溶液：称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入
3、XXml的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水，摇匀，静止数小时后取上清夜500ml，于1000ml容量瓶中，徐徐加入225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加25%硫酸150ml。置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。然后加99%醋酸75ml，摇匀，用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。四、实验步骤?取25ml的血糖管(见图1)3支，编号。第一支血糖管中加入1ml蒸馏水；第二支血糖管中加1ml标准葡萄糖液；用奥氏吸管吸取无蛋白血滤液1ml，放入第三支血糖管中。?然后向三支血糖管中各加入2ml新配制的碱性硫酸铜溶液，同时置于沸水浴中8分钟，取出，在流水中迅速冷却后各加
4、4ml酸性钼酸盐溶液。一分钟后，用蒸馏水稀释至25ml，混匀，用7220分光光度计在420波长处比色，以空白管调节零点。五、结果计算m=A1/A0C0100式中:m=100ml全血中含血糖毫克数;C0=标准液葡萄糖含量A1=样品液光吸收值;A0=标准液光吸收值：1ml无蛋白血溶液相对于全血则100ml全血中所含血糖的含量：m=/ml100ml=六、实验分析1实验过程中那些操作可能影响实验结果的准确性？答：移取血液时；加硫酸、钨酸钠时；滤纸过滤时；蒸馏水稀释时2实验中，血糖管有什么作用？答：血糖管下部分管径较细，以避免还原生成的氧化亚铜被空气中的氧再氧化，降低实际结果3实验过程中，为什么要用流水
5、冷却加入碱性硫酸铜液反应后的血糖管？答：因为用流水冷却加入碱性硫酸铜液反应后的血糖管可以让血糖管里的溶液尽快地稳定下来，防止里面的溶液出现凝固注意事项1.加硫酸、钨酸钠时，要边加边摇匀2.沉淀由鲜红变为暗棕色，是因钨酸钠与硫酸生成钨酸，在适当酸度时，使血红蛋白变性沉淀，如果沉淀不变暗棕色或重新过滤后仍混浊，是因为血液中所加抗凝剂过多，可以加入10硫酸1-2滴，待暗棕色后再过滤。3.用定量滤纸过滤后应该得到完全澄清无色之无蛋白血滤液。如果得到仍带有红色的血滤液则说明蛋白质未被完全去除。如何审核生化检验报告生化检验报告的审核，是对生化检验结果质量的最后一次把关，工作意义重大。审核工作的好坏，主要决
6、定于以下几个因素：一、能够熟练的分析室内质控结果。二、对检验项目所用检验方法学有深入的了解。三、对所用仪器的性能和工作原理要熟悉掌握。四、要有扎实的医学基础，由其是实验诊断学知识。五、对实验前质量控制的掌握也非常重要。下面对以上几点在生化报告审核过程上的应用进行具体的说明。一、生化报告审核人员必须对当天室内质控结果熟知，并且进行过具体的分析。要保证所有质控结果都在控的情况下，才可进行报告的审核工作。对于在控的项目，要了解该项目的质控值相对于靶值是偏高还是偏低，对于哪些接近2SD警告线的项目，更要重点观注。例如：球蛋白项目结果一般是采用总蛋白值减去白蛋白值计算得出。也就是说球蛋白的结果受总蛋白和
7、白蛋白两个因素的影响，假如当天总蛋白结果在控但偏高，而白蛋白结果在控却偏低，这样球蛋白的结果误差就是总蛋白和白蛋白误差的总和，很可能出现球蛋白结果增高，白球比值倒置现象。在审核过程中应该与以纠正。二、对检验项目所用检验方法学要有深入的了解。比如遇到激酸肌酶活力小于激酸肌酶同工酶活力时就需要很好的运用检验方法学的知识加以分析。现在用于全自动生化分析仪上的CK-MB项目检验试剂，所采用的方法是免疫抑制速率法。即抗肌酸激酶-M亚单位的抗体可以完全抑制肌酸激酶-MM的活性，但不影响肌酸激酶-MB或肌酸激酶-BB上B亚单位的活性。由于肌酸激酶-MB是由等量的M亚单位和B亚单位组成，因而在抗肌酸激酶-M亚
8、单位的抗体存在情况下所测得肌酸激酶-MB的活性应为不含抗肌酸激酶-M亚单位的抗体存在情况下测得的活性的50%(因CK-BB含量极少，活力被忽略)，结果乘以2即是CK-MB的活力。当出现CK-MB活力CK活力时可能的情况为：1、因血清内CK-MM的含量过高，使抗肌酸激酶-M亚单位的抗体没有完全抑制住肌酸激酶M亚基的活性，在结果计算时肌酸激酶M亚基的一部分活力也被乘以2，使检验结果偏高。解决方法：可以对标本进行稀释后重新检测。2、因各种原因，使CK的抗原性改变，造成抗肌酸激酶-M亚单位的抗体不能与肌酸激酶M亚基结合型成抗原抗体复合物，也就不能抑制肌酸激酶M亚基的活性，在结果计算时肌酸激酶M亚基的一
9、部分活力也被乘以2，使检验结果偏高。这种情况下通过对标本稀释是不能解决问题的，只能按上述情况对临床进行告知。三、对所用仪器的性能和工作原理要熟悉掌握。比如用贝克曼仪器就不用考虑交叉污染问题，但要注意因仪器的检测速度慢，待检标本开盖时间过长会因血清的蒸发而发生浓缩现象。用日立和罗氏等仪器就要考虑到试剂位置的摆放顺序，以避免出现因试剂针的前一试剂残留对后面检验项目的影响。再比如如果发现当天结果全部偏低，或某一时间后的结果全部偏低，哪么要考虑是否发生仪器的样品针侧堵，或样品针注射器漏气。解决问题后对所有标本进行重新检测。四、要有扎实的医学基础和实验诊断学知识，这一点极其重要。因为在审核检验结果时，判
10、断检验结果是否符合患者的病理、生理情况都要熟练的运用实验诊断学知识，这样可以防止仪器的偶然误差对检验结果的影响。对不符合病理、生理情况的结果可进行复检，以排除仪器的偶然误差。实验诊断学也是检验科与临床交流的一个契合点，当临床对检验结果的准确性有不正确怀疑时，正是运用实验诊断学知识进行仔细推敲的时侯。比如我曾经遇到临床向我反应：一个洋地黄中毒的患者血钾过高，临床医生认为我们的检验结果不准确，理由是诊断学书中把洋地黄中毒列为低钾的原因之一。在仪器状态良好的情况下，我对原标本和该患者新取标本同时进行了血钾检测，结果仍然偏高，对以上现象我和临床医生进行了交流，我认为+是洋地黄类药物抑制Na,K-ATP
11、酶活性，使细胞内钾外移，这时的血钾就应当是偏高的，同时肾脏会因血钾浓度增加，而进行大量的排钾，在药物作用减弱或结束后，Na+,K+-ATP酶活性恢复，细胞重新从组织液中纳钾，这时由于前期肾脏的排钾和后期细胞的重新纳钾，才会使血钾浓度偏低。现在的第6版诊断学已经把洋地黄中毒列入了高钾的原因之一，此处建议对洋地黄中毒进行分期，如高钾期和低钾期，然后分别列入血钾增高和减低的原因内。五、实验前的质量控制是由临床科室来完成的，这一过程完成的好坏直接影响到检验科后期的检验质量，如果实验前的质量没有控制好，那么在检验科是没有办法进行后期弥补的，所以对这类问题的处理只有一个方法，就是要求临床重新按照实验前质量
12、控制的规定进行标本的重新采集。哪么在审核生化报告过程中如何发现这类问题呢？这就需要综合运用前面介绍的所有知识，综合分析，如果怀疑是实验前的质量控制有问题，就要和临床科室进行交流，找出失控的原因。比如发现检验结果除了Na+和Cl-离子增高明显外其它结果全部偏低，并且标本血清量多，颜色变淡，血球少，这就有可能是在输液同侧肢体采血造成的。再比如用氧化酶法检测血糖时发现结果非常低，可以怀疑临床是否对患者应用了具有还原性的药物，如维生素C等。综述：以上为了表述的清楚，对生化结果审核的重要因素进行了分条，但在实际工作中经常要综合运用上述知识才能正确分析检验结果，找出不准确的原因，加以处理。因影响检验结果的
13、因素众多，仪器所检验测出的结果不一定全部符合客观，一定要加入检验者的主观判断，有必要时要向临床了解患者的情况，不能进行完全的双盲原则进行报告的发放。在临床对检验结果提出疑义时，不能只简单的回答“这是仪器做出的结果”，而应该回顾检验过程，在确信标本来实验室后的检测没有问题时，要极积的与临床一起分析原因，向临床提供出所有可能影响结果的实验前因素，并且要一起讨论有可能出现该结果的病理、生理情况。血糖仪与生化仪结果对比评估报告使用科室：血糖仪型号及编号：脑四科ACCU-CHEK试纸条批号：试纸条有效期：XX-10生化分析仪型号：贝克曼AU5800样品对比结果注：差异=/生化仪结果100血糖仪检测人:张红梅血糖结果对比统计分析报告人：王玉霞审核人：周凤XX年9月30日目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。
