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1、血型血清学若干问题,南方医科大学.南方医院 兰炯采,.,一、标本,1、标本采集 (1)采错被检者（换床、同名检测未错,输血错) (2)护士送检途中“掉包” (3)大量输液处采样 (4)抗凝管未混匀,只采干管凝块血红细胞有凝集,2、被检者特殊情况 (1)新生儿(Ag不成熟,ABO抗体来自母亲/IgG);老年(Ag）；输异型血/成份血/血浆置换； 疾病：白血病，淋巴病：Ag感染多/全凝集；类B真红，多发性骨髓瘤：串钱状AIHA（自身免疫性溶血性贫血）干扰正/反定型 冷凝集 血浆蛋白紊乱,低丙球血症； 造血干细胞移植后 罕见先天性无ABO抗体 ABO亚型 ABO外抗体,二、定型试剂,失效; 使用不当
2、（AHG最适稀释度）; 效价（抗A128，抗B64），亲合力（3min1mm2），特异性（A2B不漏检，抗体筛选，冷凝集素）; 染色（抗A，B红，抗-A兰，抗-B蓝），未染色者标签脱落； 试剂红细胞3-5%；溶血洗 3-5个混合； 阴/阳对照（酶，聚凝胺）。,三、操作,1、血清1-2滴（50-100u），滴管450倾斜； 2、先加血清，后加细胞！ 3、室温/血清（血浆） 4、离心条件/玻片清洁 抗-A（256）0.01ml+NS0.49ml取0.1ml +(3-5%)RBC0.1ml1000rpm 秒 10 15 20 30 1+ 1+ 2+ 2+ 取离心时间为15秒 5、结果观察（凝块大小，
3、游离细胞mf，真、假凝集，镜下膜完整）,ABO定型,正定 反定 吸收 分 抗A 抗A1 抗B 抗AB 抗H A1 A2 B O 放散 泌 A1 + + - + - - - + - A A,H Aint + W+ - + W+ - - + - A A,H A2 + - - + + -/+1% - + - A A,H A3 Mf - - Mf + -/+20% - + - A A,H Abountu Mf - - Mf + + - + - A H Abend -/+ - - W+ + - - + - A H Ael - - - - + - - + - A H Ax -/w+ - - + + + -
4、/+ + - A A,H Am -/w+ - - -/W+ + - - + - A A,H B - - + + - + + - - B B,H B5 - - MF Mf + + + - - B B,H Bx - - VW+ W+ + + + - - B H Bm - - - VW+ + + + - - B B,H O - - - - + + + + - H H Oh - - - - - + + + + ? -,ABO定型考虑的问题,1、正反定型不以谁为准？-找出原因 标本错误（细胞/血清不一个人） 输液处采样 输异型血 新生儿/老年 疾病 移植 ABO外抗体 亚型（A2产生抗-A1） 试剂 2
5、、抗-AB（W+而抗-A，亚型？） 3、mf：亚型？输异型血？,4、OC（+）： 买？ABO外抗体 5、抗-A/抗-B：W+吸收放散证实 6、唾液/分泌型 唾液隔水煮沸15离心上清（倍比稀释）加量抗血清修正液（1：8？）室温静置1hr加对应红细胞离心结果（后留稀释管阳性） 修正液：倍比稀释，4+最后一管稀释度 7、抗-H参考价值 必须同时作AB，A，B，O对照比较 8、B2？ 中国报道B2，对应A2，产生抗-B1，抗BW+，H弱于O强于B， 1961，Jacobowic：一个家系母及2 均B，但B抗原弱，类似A1与A2，称BK,1976，Bryant:提出B2 ，未被公认：Mollison(B
6、lood +ransfusion in clinical medicine),Mohn(Human blood groups),Zmijawsk;C Blood banking sciences),Lawrence Cclinical practices of transfusion medicine),肖星甫（输血技术手册），李昌林（免疫血液学）均未承认有B2。 9、A2抗A1严重溶血性输血反应 10、亚型与输血 理论：29个血型系统，400多种血型抗原； （一个人）有什么Ag，不产生什么Ab，缺什么Ag，（接受该Ag）可能产生什么Ab。 原则：供者Ag只能比受者少，不能比受者多。 亚型病人
7、：接受O型血 亚型献血员：当A/B型血用,ABO定型与疾病,1、白血病血型变异 血型终生不变；基因未变，抗原减弱；“阶段性”，可恢复；只变“少”，不变“多”（A/BO，ABA/B；不会反过来！） 2、血浆蛋白紊乱 凝集 肝脏病，传染病（TB，黑热病），多发性骨髓病球蛋白 心肌梗塞，感染，外伤，肿瘤纤维蛋白 办法：加盐水散开 洗涤红细胞至散开定型 例：顾，正定型时而B，时而AB，反定型抗-A 分析：正定型抗-AB，抗-A，抗-B均小凝块，加盐水减弱，镜下串钱状，红细胞洗涤后正定型为B，血球蛋白紊乱引起B型。 例：薛，TB，正定似AB，但抗-A50%凝集，镜下串钱状，加盐水串钱状不完全消失。 分析
8、：洗涤3次红细胞抗-A（-），抗-B（+），B型。,3、类B G-杆菌感染，A“AB” O“B” 感染控制，“B”消失 血清中 抗-B 唾液无B物质 可吸收抗-B，吸收后抗-B效价不降低，放散出抗B（比正常B细胞）多（类B与抗B结合疏 ） 加AB血清不凝集（与全/多凝集正别） 例：韩，52y，胆道手术，正定型B，但血清合抗-B，与A型血 血主/次侧均凝集，与O配血次侧凝集。 分析：抗-AB（+），抗-B（+， 离细胞多），抗-A（-）。血清中抗-B效价8，抗-A效价512，唾液中 H，红细胞上H似O型。，吸收抗-B效价只降 1高度，放散点抗B64。 O型，产生类B,4、多/全凝集 细菌污染RB
9、C T活化，出生6个月后产生抗-T 多凝集：与部份（？/10）AB型血清凝集 全凝集：与“全部”（10份）AB型血清凝集 真凝集，洗涤细胞不能去除 （血清中抗T已被自己RBC吸收）无自身凝集 感染史/血污染 控制感染后消失 mf 凝集4强，37弱 全/多凝集, 正定型吸收/放散，“全/多凝集RBC”吸收抗-A/抗-BRBC吸/放：ABO抗体+抗-T试剂（ABO RBC CT未溶化）避开抗T干扰，测定ABO抗体吸收情况判定全/多凝集RBC ABO血型，对照：反定型，唾液血型物质制定ABO血型。 例：苏，女，8M，肺炎，正定型AB，但配血血清凝集AB红细胞。 分析：正定型抗-AB，抗-A，抗-B均
10、凝集，游离C50%；10份AB型血清（+），室温强，37消失；RBC不吸收抗-A，抗-B；反定型AC（+），BC（+），自身（-）。 O型，全凝集，输O RBC，或O RBC+代血浆（无抗体）,5、冷凝集素 AIHA，肺炎冷凝集素，甚至30凝集自身/他人RBC。 递增温度（37-45）盐水洗RBC 例：赵，贫血，正定型“AB”，洗涤RBC后定“O”；与O型配血全侧轻凝集。 分析：37盐水洗2次，正定型O型；血清中冷凝集寿效价64，宜37配血，并作自身对照。,6、AIHA，LE RBC 粘自身抗体干扰正定型（蛋白介质ABO抗血清中非特异凝集）；血清中自身抗体干扰反定型。 递增温度盐水（22374
11、5），反复洗涤RBC正定型 氯喹放散法正定型：（兰炯采，中华血液学杂志 1988；9（10）：624：二磷酸氯喹以NS配20%，加20%AB血清，PH6.0；压积RBC0.2ml+20%氯喹液0.8ml37震荡5分钟洗3次定型），自身吸收（氯喹放散）反定型，O.C吸收反定型（同种抗体漏检？）,例：兰炯采，中华医学检验杂志1990；13（5）311：6/21AIHA ABO正反定型不合 直抗 间抗 放散前 放散后 正 反 正 反 + 4 AB B B B + 4 AB B B B + 16 AB B B B + 4 AB ？ B B + 16 AB O O O + - AB O O O,例：韩，
12、1y，Hb2g%，正定型：RBC盐水洗涤A；反定型：OC（+），AC（+），BC（+），37(试管)法：OC(-)，AC(-)，BC（+） 朱，34y，LE,正定型：A，反定型：6，20凝集AC，37减弱，37（试管）法：AC（-） 张，伊文氏综合症 正定型：抗-A（+），抗-B（+），自身（+），盐 水洗涤不消失。 反定型：OC（+），AC（+），BC（+），45盐水洗3次，定O型；与O型血主侧凝集，选择凝集不强于自身对照者输血，无反应。,ABO亚型,常规用抗-AB！ 例：张，胆囊炎，初定O，配血次侧（与O型献血员血清）凝集，主侧（与O型RBC）不凝集。 复查：抗-A，B（+），抗-A（-）
13、，抗-B（-）（初定血型未用抗-AB而误定O），RBC吸收放散抗-A，唾液有H，无A物质，血清有抗-B，不凝集A2 AX 例：王，抗-A（-），抗-B（-）初定O，作O型献血，配血凝集。 7份O型人血清+EC，3份15份凝，4份30分凝；王清+AC（+），BC（-）。唾液有H，无A，B物质，王C吸收抗-B，排除（血袋）污染。 BX（？）,新生/婴儿ABO定型,胡利亚、兰炯采，中华医学检验杂志，1992；15（4）：231 27例6月婴儿：正、反定型不一致22例，低离子法正反定型一致，且输血无反应。 方法：测定管中加2滴低离子溶液（NaCl75g,甘氨酸18g 加PBS20ml加 H2O至1000ML侗 PH6.7,ABO外抗体影
