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1、Use of Histopathology to Solve Complex Diagnostic Problems in Pig Production 利用利用组织组织病理学解决养猪生病理学解决养猪生产产系系统统中中 复复杂杂的的诊诊断断问题问题 James E. Collins, DVM, PhD, Diplomate ACVP Professor and Director Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory 詹姆斯詹姆斯考林斯博考林斯博士士 教授&主管 美国明尼苏达大学,兽兽医医诊诊断断实验实验室室 Case No. 1 Diarrhea
2、 案例1-腹泻 High Morbity and Mortality 高发病率和死亡率 Source: Dr. Ackerman 来源：阿克曼博士 Source: AASV Source: Dr. Ackerman 来源：阿克曼博士 Diagnostics诊诊断断 Same basic guidelines of diarrhea diagnostic workups与腹泻诊断相同的基本准则 Select live, acutely affected pigs with watery diarrhea and vomiting选择伴有腹泻和呕吐的急性 感染活猪 Perform necropsy
3、 and collect samples within 15 minutes of euthanasia 在安乐死的15分钟内进行 剖检和样本采集 Gross lesions: liquid intestinal contents 肉眼观察 病变：肠内液体容物 Sample collection样样品采集品采集 Small intestine: 小肠： 6-10 sections representing the whole length of the small intestine 6-10段代表小肠的整个长度 10 cm segments fresh and 2 cm segments f
4、ixed 10厘米 新鲜样本和2厘米固定样本 Other tissues for a complete workup and to rule out differential diagnoses 采集其它组织来进行完全诊断， 排除差异诊断 Stomach, colon, tonsil, lymph node, lung, heart, spleen, liver, kidney, brain - fresh and fixed 胃，结肠，扁桃体， 淋巴结，肺，心脏，脾，肝，肾，脑 - 新鲜和固定样本 TGE/PED “Newspaper gut” 猪传染性胃肠炎/猪流行性腹泻“报纸肠” (yo
5、u could read a newspaper through it) 可以透过它读报纸 Necropsy剖剖检检 Virus isolation: 病毒分离 Enteric viruses - difficult to isolate in vitro肠道病毒 - 难以在体外分 离 Electron Microscopy: 电镜 low sensitivity 低灵敏度 Histopathology: 组织病理： atrophic enteritis 萎缩性肠炎 same as TGEV and Rotavirus与猪传染性胃肠炎和轮状病毒相同 Real time PCR: 实时PCR s
6、ensitive and specific 敏感和特异 available in US laboratories 美国实验室提供 PEDV diagnostic tests 猪流行性腹泻病毒猪流行性腹泻病毒诊诊断断检测检测 IHC, ISH: less sensitive than PCR 比起PCR较不敏感 good for research, retrospective studies对科研， 回顾性研究有益 ELISA: Biovet in the US & Canada Biovet 在美国和加拿大 Porcine Epidemic Diarrhea 猪流行性腹泻 Real-time
7、PCR assay for detection and differentiation of PEDV and TGEV in clinical and environmental samples. 实时荧光定量PCR检测能在临床和环境样本中检测到和区分猪 流行性腹泻病毒和感染性肠胃炎病毒 This test can be performed on different types of samples. 这种测试可以用不同类型的样品 PCR test three-in-one: TGEV + PEDV + SDCV like duplex PEDV/TGEV it detects and di
8、fferentiate viruses of PEDV and TGEV and also Swine delta coronavirus (SDCV). PCR检测 三合一：猪传染性胃肠炎+猪流行性腹泻病毒+ delta-轮状病毒， 像复式PEDV/TGEV 一样，它 能检测和区分猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒和delta-猪轮状病毒 ELISA test allowing to detect IgG antibodies to the PEDV nucleoprotein is now available. 能够检测到针对PED病毒核蛋白的IgG抗体的ELISA 测试现在已可用 Se
9、rological test (IFA) for detection of antibodies against the virus in serum samples.血 清学试验（IFA）能够检测血清样品中抗病毒的抗体 Sampling kit and protocol to help you perform environmental sampling 采样试剂盒和流 程能够帮助你进行环境采样 Porcine Epidemic Diarrhea 猪流行性腹泻 PEDV replicates in the epithelial cells of the small intestine PED
10、 病毒在小 肠的上皮细胞进行复制 Incubation period: 1-2 days 潜伏期： 1-2天 Shedding in feces: 7-11 days 从粪便 散毒：7-11天 Immune response: mucosal and serological: serum antibodies at 7-14 dpi 免疫应答：粘膜和血清学：在 攻毒7-14后的血清抗体 Source: Kim et al. 1999 Porcine Epidemic Diarrhea猪流行 性腹泻 PED is caused by a coronavirus (PEDV)猪流 行性腹泻是由冠状
11、病毒引起的（PEDV） PEDV causes diarrhea and vomiting in swine of all ages PED病毒能引起所有年龄猪腹泻 和呕吐 High mortality in piglets under 2 weeks of age 在低于2周龄仔猪中有高死亡率 Porcine Epidemic Diarrhea猪流行 性腹泻 PEDV first described in Europe in the 70s第 一宗猪流行性腹泻 病毒是70年代在欧洲被 确认 PED is an important problem in USA & Asia猪 流行性腹泻 在美
12、国和亚洲都是一个严重的 问题 E. Coli Edema disease 大肠杆菌水肿病 Edema Disease pig Stomach 水肿病猪的胃 E. coli toxin induced vascular necrosis 大肠杆菌毒素导致的血管坏死 Other sample types 其他其他样样本本类类型型 Feces (5 mL) 粪便（5毫升） Fecal swabs 粪便拭子 Feedback material 返饲材料 Environmental swabs 环境拭子 Feed (under development) 饲料（开发中） Case No. 2 案例2 Bl
13、oody diarrhea and increased mortality in gilts in isolation barn 隔离后备母猪血性腹泻 和死亡率的增加 Gilts recently arrived after 8 hour truck ride 经过8小时运输刚到的后备 Parasites 寄生虫 Trichuris suis 猪鞭虫 Large intestine, ulceration, necrosis 大肠，溃 疡，坏死 Brachyspira pilisicoli 短螺旋体 pilisicoli Bacteriology weakly beta-hemolytic ,
14、 PCR typing on isolates 细菌学 - 弱乙型溶血性，对 菌株的PCR分型 Telepathology emerging opportunities with the University of Minnesota Veterinary Diagnostic Laboratory 远程病理学- 与明尼苏达大学兽 医诊断实验室合作的新兴机会 Telepathology远程病理学 Gross & microscopic pathology at a distance 远程组织和显 微病理学 Real-time dynamic systems 实时动态系统 Static (eg.
15、 whole slide scanning) 静态（例如整个切片扫描） 21st century approach to veterinary pathology 21世纪兽医病 理学的方法 collaborative international training 国际合作培训 real-time professional consultation 实时专业咨询 public private partnerships 公私合作伙伴关系 IVCC / Zoetis Grant IVCC/硕腾资助 Year 1 telepathology partnership objectives 第1年远程病理学合作的目标 1)Establish telepathology equipment 建立远程病理学设备 UMN & Jilin University in China 美国明尼苏达学和中国吉林大学 2)Develop online training modules 发展网上培训课程 Use of equipment and real-time collaboration使用设备和实时协作 3)Collaborative pathology training modules 联合病理学培训课程 Equ
