《实验二、无菌操作技术实验报告》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验二、无菌操作技术实验报告（1页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验二、无菌操作技术实验二、无菌操作技术一、实验目的：一、实验目的：1、掌握 MS 固体培养基的配制方法。 2、熟悉外植体材料的预处理，掌握其消毒和接种方法。 二、实验原理：二、实验原理：根据细胞全能性学说，对胡萝卜外植体脱分化培养。 三、实验仪器与材料三、实验仪器与材料：仪器：高压灭菌锅、超净工作台、镊子、刀、酒精灯 材料：胡萝卜 四、实验步骤四、实验步骤：（一）MS 固体培养基的配制配方单（配制 1000ml） （二）外植体材料的预处理、消毒和接种1、对植物材料进行适当的预处理。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至几小时，主要视植物材料清洁程度而定。2、用洗衣粉水浸洗上述植物材料约 5 min，
2、再用自来水冲净洗衣粉水。 3、接种前准备工作，摆放工具及材料，开紫外灯灭菌。4、在超净工作台上，用 70%酒精棉球擦手与器具外壁，即可对经上述预处理的植物材料进行表面灭菌处理，自此以后各步均须在超净工作台上操作。5、在使用灭菌剂之前，先将植物材料浸于 75%乙醇灭菌 30 秒，液面高度超出植物材料至少 0.5 cm，然后用 0.1%升汞浸泡 5 分钟。6、在灭菌时间结束前 1 min 时，即可将灭菌剂慢慢倒入废物缸，注意勿使植物材料滑出。接着立即倒入适量无菌水，无菌水的清洗时间每次约 3 min；清洗 3-5 次。 7、取出经上述灭菌处理的植物材料，置于无菌滤纸上，切除各切段或切块上被灭菌剂毒坏的部分。 8、接种（1）用 70%酒精清洗手及工作台 （2）酒精灯下灼烧刀、镊子，放在支架上（3）切割外植体 （4）在酒精灯前接种于培养基上，封口。9、培养 五、结果：五、结果： 统计植物材料表面灭菌结果；若染菌，分析污染原因。
