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1、我国污染土壤生物修复技术的发展及现状2016-07-28 刘志培 刘双江 北极星节能环保网点击上方“北极星节能环保网”可订阅哦！导读：导读：本文简要回顾了近本文简要回顾了近 30 年来我国污染土壤生物修复技术的发展过程，主要包括生物修复技术在年来我国污染土壤生物修复技术的发展过程，主要包括生物修复技术在我国的发展阶段、生物修复的我国的发展阶段、生物修复的 4 大类型及其所适用对象与范围、生物修复用菌株的筛选与特性研究、活大类型及其所适用对象与范围、生物修复用菌株的筛选与特性研究、活 性菌株性菌株(菌剂菌剂)在典型污染土壤中的应用及其效果等，并针对土壤污染和生物修复技术的发展现状，简要在典型污染
2、土壤中的应用及其效果等，并针对土壤污染和生物修复技术的发展现状，简要 讨论了未来生物修复技术的发展。讨论了未来生物修复技术的发展。来源：生物工程学报来源：生物工程学报摘要：本文简要回顾了近 30 年来我国污染土壤生物修复技术的发展过程，主要包括生物修复技术在我国的发展阶段、生物修复的 4 大类型及其所适用对象与范围、生物修复用菌株的筛选与特性研究、活性菌株(菌剂)在典型污染土壤中的应用及其效果等，并针对土壤污染和生物修复技术的发展现状，简要讨论了未来生物修复技术的发展。1 环境修复技术的发展阶段环境修复技术的发展阶段据 2014 年国家环境保护部和国土资源部联合公布的全国土壤污染调查公报显示，
3、全国土壤总的超标率为 16.1%，其中耕地土壤点位超标率高达 19.4%;在调查的重污染企业用地和工业废弃地点位中，超标率分别高达 36.3%和 34.9%。因此，我国土壤污染的总体形势严峻，在重污染企业或工业密集区、工矿开采区及周边地区、城市和城郊地区出现了土壤重污染区和高风险区。土壤污染类型多样，呈现出新老污染物并存、无机有机复合污染的局面。其中有机污染物主要有六六六、滴滴涕、多环芳烃以及来源于化工厂、采油区、工业区、氮肥厂、电子厂、焦化厂、农药厂等的废弃物。无机污染物主要有镉、铅、砷等重金属元素;另外耕种过程中过度施用化肥、农药、固体废弃物等都不同程度地造成了土壤污染。据不完全统计调查，
4、因土壤污染而减产粮食 1 000 万 t，全国每年因重金属污染的粮食达 1 200 万 t，造成的直接经济损失超过 200 亿元。我国土壤修复技术经历 3 个阶段：第 1 阶段为 20 世纪 80 年代以前，土壤治理方式为物理修复，主要是土地资源的稳定利用，相关基本环境工程的配套。第 2 阶段是 20 世纪 90 年代，土壤治理方式为物理、化学和生物恢复，但主要修复技术是土地复垦，选用先锋植物、耐性植物恢复土壤特性。第 3 阶段是 21 世纪以来，土壤治理方式为物理、化学和生物恢复，修复技术主要采用微生物、植物、动物、固化/稳定化、土壤气提、化学氧化还原、热脱附、淋洗、化学萃取等，其中以微生物
5、修复、植物修复、微生物-植物联合修复为研发应用重点。可见，我国的生物修复处于刚刚起步阶段，最初的生物修复主要是利用细菌治理石油、农药之类的有机污染。随着研究的不断深入，生物修复又应用在地下水、土壤等环境的污染治理上。生物修复已由细菌修复拓展到真菌修复、植物修复、微生物-植物联合修复、动物修复，由有机污染物的生物修复拓展到无机污染物的生物修复。2 环境生物修复技术类型环境生物修复技术类型生物修复 (Bioremediation) 是一项清洁环境的低投资、高效益、便于应用、发展潜力较大的新兴技术，它具有成本低、操作简单、无二次污染、处理效果好且能大面积推广应用等优点，生物修复利用生物 (包括植物、
6、微生物和原生动物) 的代谢功能，吸收、转化、清除或降解环境污染物，实现环境净化、生态恢复。从参与修复过程的生物类型来划分，生物修复包括微生物修复、植物修复、动物修复和联合修复等类型。2.1 微生物修复技术微生物修复技术土壤中存在着丰富的微生物，这些微生物具有多种多样的代谢功能，驱动着土壤环境中的物质元素循环。微生物修复技术就是利用土壤中的土著微生物的代谢功能，或者补充具有降解转化污染物能力的人工培养的功能微生物群，通过创造适宜环境条件，促进或强化微生物代谢功能，从而降解并最终消除污染物的生物修复技术。微生物修复的实质是生物降解或者生物转化，即微生物对有机污染物的分解作用或者对无机污染物的钝化作
7、用。利用微生物修复技术既可治理农药、除草剂、石油、多环芳烃等有机物污染的环境，又可治理重金属等无机物污染的环境;既可使用土著微生物进行自然生物修复，又可通过补充营养盐、电子受体及添加人工培养菌或基因工程菌进行人工生物修复;既可进行原位修复，也可进行异位修复。2.1.1 有机物污染土壤的微生物修复土壤微生物利用有机物 (包括有机污染物)为碳源，满足自身生长需要，并同时将有机污染物转化为低毒或者无毒的小分子化合物，如 CO2、H2O、简单的醇或酸等，达到净化土壤的目的。对具有降解能力的土著微生物特性的研究，始终是环境生物修复领域的研究重点。常见的降解有机污染物的微生物有细菌 (假单胞菌、芽胞杆菌、
8、黄杆菌、产碱菌、不动杆菌、红球菌和棒状杆菌等)、真菌 (曲霉菌、青霉菌、根霉菌、木霉菌、白腐真菌和毛霉菌等) 和放线菌 (诺卡氏菌、链霉菌等)，其中以假单胞菌属最为活跃，对多种有机污染物，如农药及芳烃化合物等具有分解作用。有些情况下，受污染环境中溶解氧或其他电子受体不足的限制，土著微生物自然净化速度缓慢，需要采用各种方法来强化，包括提供O2 或其他电子受体例如 NO3-，添加氮、磷营养盐，接种经驯化培养的高效微生物等，以便能够提高生物修复的效率和速率。有机污染物质的降解是由微生物酶催化进行的氧化、还原、水解、基团转移、异构化、酯化、缩合、氨化、乙酰化、双键断裂及卤原子移动等过程。该过程主要有两
9、种作用方式：1) 通过微生物分泌的胞外酶降解;2) 污染物被微生物吸收至其细胞内后，由胞内酶降解。微生物从胞外环境中吸收摄取物质的方式主要有主动运输、被动扩散、促进扩散、基团转位及胞饮作用等。一些有机污染物不能作为碳源和能源被微生物直接利用，但是在添加其他的碳源和能源后也能被降解转化，这就是共代谢 (Co-metabolism)。研究表明，微生物的共代谢作用对于难降解污染物的彻底分解起着重要作用。例如甲烷氧化菌产生的单加氧酶是一种非特异性酶，可以氧化多种有机污染物，包括对人体健康有严重威胁的三氯乙烯和多氯联苯等。微生物对氯代芳香族污染物的降解主要依靠两种途径：好养降解和厌氧降解。脱氯是氯代芳烃
10、化合物降解的关键步骤，好氧微生物可以通过双加氧酶和单加氧酶使苯环羟基化，然后开环脱氯;也可以先脱氯后开环。其厌氧降解途径主要依靠微生物的还原脱氯作用，逐步形成低氯的中间产物。一般情况下微生物对多环芳烃的降解都是需要氧气的参与，在加氧酶的作用下使芳环分解。真菌主要是以单加氧酶催化起始反应，把一个氧原子加到多环芳烃上，形成环氧化合物，然后水解为反式二醇化合物和酚类化合物。而细菌主要以双加氧酶起始加氧反应，把两个氧原子加到苯环上，形成二氢二醇化合物，进一步代谢。除此之外，微生物还可以通过共代谢降解大分子量的多环芳烃。此过程中微生物分泌胞外酶降解共代谢底物维持自身生长的物质，同时也降解了某些非微生物生
11、长必需的物质。2.1.2 无机物污染土壤的微生物修复微生物不仅能降解环境中的有机污染物，而且能将土壤中的重金属、放射性元素等无机污染物钝化、降低毒性或清除。重金属污染环境的微生物修复近几年来受到重视，微生物可以对土壤中重金属进行固定、移动或转化，改变它们在土壤中的环境化学行为，从而达到生物修复的目的。因此，重金属污染土壤的微生物修复原理主要包括生物富集 (如生物积累、生物吸附) 和生物转化等作用方式。微生物可以将有毒金属被吸收后贮存在细胞的不同部位或结合到胞外基质上，将这些离子沉淀或螯合在生物多聚物上，或者通过金属结合蛋白 (多肽)等重金属特异性结合大分子的作用，富集重金属原子，从而达到消除土
12、壤中重金属的目的。同时，微生物还可以通过细胞表面所带有的负电荷通过静电吸附或者络合作用固定重金属离子。生物转化包括氧化还原、甲基化与去甲基化以及重金属的溶解和有机络合配位降解等作用方式。在微生物的作用下，汞、砷、镉、铅等金属离子能够发生甲基化反应。其中，假单胞菌在金属离子的甲基化作用中起到重要作用，它们能够使多种金属离子发生甲基化反应，从而使金属离子的活性或者毒性降低;其次一些自养细菌如硫杆菌类 Thiobacillus 能够氧化 As3+、Cu2+、Mo4+、Fe2+等重金属。生物转化中具有代表意义的是汞的生物转化，Hg2+可以被酶催化产生甲基汞，甲基汞和其他有机汞化合物裂解并还原成 Hg，
13、进一步挥发，使得污染消除。从目前来看，微生物修复是最具发展潜力和应用前景的技术，但微生物个体微小，富集有重金属的微生物细胞难以从土壤中分离，还存在与修复现场土著菌株竞争等不利因素。近年来微生物修复研究工作着重于筛选和驯化高效降解微生物菌株，提高功能微生物在土壤中的活性、寿命和安全性，并通过修复过程参数的优化和养分、温度、湿度等关键因子的调控等方面，最终实现针对性强、高效快捷、成本低廉的微生物修复技术的工程化应用。2.2 植物修复技术植物修复技术从 20 世纪 80 年代以来，利用植物修复环境污染物的技术迅速发展，植物修复技术就是利用自然生长植物根系 (或茎叶) 吸收、富集、降解或者固定污染土壤
14、、水体和大气中的污染物的环境技术总称。主要通过植物提取、植物蒸腾作用、根系过滤和植物钝化来实现。一般来说，植物对土壤中的有机和无机污染物都有不同程度的降解、转化和吸收等作用，有的植物可能同时具有几种作用方式。植物修复技术目前主要应用于重金属污染土壤的修复，利用对重金属有富集特征的植物来吸收或者吸附积累重金属，达到从土壤中除去重金属的目的。对有机污染物的修复机制主要是根际修复，利用植物根际的环境来刺激微生物生长，改变根际微生物大的群落结构、分泌与有机物降解相关的氧化还原酶来降解有机污染物。2.3 动物修复技术动物修复技术动物修复是利用土壤中某些低等动物 (如蚯蚓等) 和其体内的微生物，在污染土壤
15、中生长、繁殖等活动过程中对土壤中的污染物进行转化和富集的作用，最后通过对这些动物集中处理，从而降低土壤中的污染物。该方法主要应用于重金属污染土壤修复过程中，采用土壤动物这种天然的方法来转化重金属形态或富集，可以在一定程度上提高土壤肥力。土壤动物不仅自己能够直接富集土壤中的污染物，还能够和周围的微生物共同富集，并在其中起到一种类似“催化剂”的作用。土壤动物能够通过 3 个方面影响土壤中的微生物，首先土壤动物可以通过直接取食土壤微生物，使其始终保持高活性状态，而且通过取食降低微生物的生存空间的竞争，使微生物更好地生长;其次，土壤动物通过自身分泌物刺激微生物生长繁殖;再次，通过土壤动物的活动，使得土
16、壤通气透水，改善了土壤生态环境，有利于土壤微生物的生长，从而实现共同修复污染土壤的目的。土壤动物修复技术未来的发展方向，是将土壤动物作为一种“催化剂”，将其放入被污染的土壤中，提高传统的生物土壤修复技术的修复速度和效率。2.4 联合生物修复技术联合生物修复技术联合修复技术就是协同两种或两种以上修复方法，克服单项修复技术的局限性, 实现对多种污染物的同时处理和对复合污染土壤的修复,提高污染土壤的修复速率与效率。该方法已成为土壤修复技术中的重要研究内容，其中植物-微生物联合修复是最为广泛采用的联合生物修复技术。2.4.1 重金属污染土壤的联合修复近几年，重金属污染土壤的植物-微生物联合修复作为一种强化植物修复技术逐渐成为国内外研究的热点，这种方式可以充分发挥各自的优势，从而提高污染环境的修复效率。微生物可以辅助超积累植物修复重金属污染土壤，其中有关微生物调控植物修复的机理及效应是人们关注的重点。微生物在其代谢过程中可改变根际土壤重金属的生物有效性，从而有利于超积累植物对重金属的吸收和积累;微生物的代谢产物还可改善土壤生态环境;另外，微生物还能够分泌植物激素类物质、铁载体等活性物质，促进
