《临床输血检验胡丽华输血感染性疾病及输血不良反应课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《临床输血检验胡丽华输血感染性疾病及输血不良反应课件（123页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、输血感染性疾病及输血不良反应,华中科技大学同济医学院检验系,教学目的与要求,掌握输血传播疾病的预防与控制策略 掌握血液筛查的重要方法及其在安全输血中的重要作用 熟悉输血传播疾病的定义与相关病原体 熟悉病毒灭活的定义与基本内容 了解HBV,HIV和HCV等病原体检测的基本方法 了解常见输血不良反应,输血传播的疾病 (Transfusion-transmitted disease),电视剧”渴望”中刘小芳二次手术输血600ml,！,如此输血风险大,输血风险,包括： 输血的不良反应是指急慢性免疫性和非免疫性非感染性的并发症或疾病。 输血传播疾病(Transfusion-transmitted dis
2、ease)又称输血相关疾病或输血传染病，是指输入污染了病毒、细菌和寄生虫等致病微生物的血液或血液制品而引起的疾病。,输血与HIV的传播,静脉吸毒:61.6% 采血浆:9.4% 性传播:8.4 血液及血液制品:1.6% 母婴垂直传播:0.3%， 传播途径不详:18.7。,资料来源:卫生部医政司血液处2007,1985年浙江4例血友病因输进口因子而感染HIV 河南上蔡县文楼村（艾滋村）-卖血后遗症 近年来：德奎市某医院血库、黑龙江北安建设农场发生因输血感染艾滋病致死事件等,输血能传播多种疾病,输血传播疾病的预防与控制,严格筛选献血者 加强采血和血液制品制备的无菌技术操作 对血液制品进行病毒灭活 严
3、格掌握输血适应症 合理用血,提倡成分输血与自身输血,(一)严格筛选献血者,既往医学史调查 体格检查 严格的血液筛查 提倡无偿献血(Unpaid Blood Donation),Phase I 1949-1978 Paid Blood Donations Phase II 1978-1997 Paid and Government Quota Paid Blood Donations Since 1993 - Anti-HIV1/2, HBsAg, anti-HCV (ELISA), Syphilis (RPR, Trust and ELISA) and ALT Phase III 1998by
4、 now Volunteer Unpaid Blood Donations,Blood Screening History and Strategy in China,我国对血液及血液制品病原体筛查的现状,Optional test including Anti-HBc, NAT, HTLV.,BioOne Corporation,Screening Tests Introduced Since 1970 in USA,1970 1975 1980 1985 1990 1995 2000 2003,HBsAg,Anti-HIV,Anti-HTLV,Anti-HCV,Leucodepletion
5、,NAT HCV,NAT HCV & HIV,HIV Ag,ALT,Anti-HBc,NAT HCV, HIV, HBV,WNV,No longer performedSurrogate marker or device,其他国家和地区对血液及血液制品病原体筛查的历史与现状,Marker Method USA France UK HBsAg ELISA 1971 1971 1972 Anti-HIV ELISA 1985 1985 1985 Anti-HBc ELISA 1987 1988 Anti-HTLV ELISA 1989 1991 2002 Anti-HCV ELISA 1990 1
6、990 1991 HIV Ag ELISA 1996,日本、欧洲和澳大利亚等: 从1999年起开始对献血者进行 HCV-RNA,HIV-RNA和(或)HBV-DNA的检测,世界各国应用核酸扩增技术（NAT）筛查献血者的现状,HBV：日本，美国,德国（部分血浆产品） HCV： 澳大利亚,新西兰, 日本, 美国, 加拿大, 德国,法国,奥地利, 意大利, 荷兰, 英国, 芬兰, 挪威, 西班牙, 中国香港 HIV RNA:澳大利亚,新西兰, 日本, 美国, 加拿大, 德国（血浆产品）,法国,荷兰, 西班牙, 中国香港。 正在考虑加入的国家：瑞典，巴西，希腊, 南非等。,ELISA与血液筛查（1）,
7、通过ELISA对血液及血液制品进行筛查，使输血传播的疾病降低到较低水平，如HBV传染的危险性从20世纪80年代初期的1/2100降低到现在的1/70000。而且从社会经济学的成本效益方面保障了我国公民的临床用血需求,过去十几年输血传播的HBV、HCV和HIV显著减少（摘自2000年的transfusion杂志）,ELISA与血液筛查（2）,ELISA的优点 （1）操作简单，可自动化。 （2）危险性较低，污染概率也较低。 （3）试剂稳定，检测费用较低。,HBsAg与anti-HBc联合检测有助于提高HBV感染的检出率,注:美国从1987年开始对献血者同时检测HBsAg与anti-HBc,Inte
8、rpretation of Hepatitis B Panel,(2) (3) (4) (5) (6) acute or chronic active hepatitis B，high transmissibility chronic hepatitis B，high transmissibility chronic hepatitis B, low transmissibilty chronic hepatitis B， low transmissibilty immue due to natural infection recovering from hepatitis B, low tr
9、ansmissibility four interpreation,see next slide immune due to vaccine immue due to natural infection ， susceptible 1.HBsAg，2anti- .HBs，3.HBeAg，4.anti- HBe，5.anti-HBc 6. anti-HBcIgM,新一代的ELISA试剂能提高HIV与HCV的检出率,HIV Ab四代检测试剂比较,1985年,1990年,1994年,2000年,HCV Ab三代检测试剂比较,1989年,1993年,1991年,ELISA对血液进行 筛查存在残存危险性
10、(residual risk),日本红十字会,时间：2000.22001.4 入围标本： HBV/HCV/HIV 的免疫学指标阴性。 标本总数：6,805,010 血浆池的大小：50人份 方法： HBV/HCV/HIV 的多重RT-PCR。,检测结果,HIV-RNA阳性: 4 (1:1,701,253) HCV-RNA阳性: 25 (1:272,200) HBV-DNA 阳性: 112 (1:60,759）,德国输血医学与血液免疫学研究所,时间：19972000 入围标本： HBV/HCV/HIV 的免疫学指标阴性。 标本总数：1087000 血浆池的大小：96人份 方法： HCV（罗氏 Am
11、plicor 方法）HBV和HIV（Taqman技术）,检测结果,HCV RNA：2 (1:543,500) HIV RNA：1 (1: 1, 087,000) HBV DNA： 2 (1:543,500),注:美国从1999年开始对献血者进行NAT检测,残存危险性的原因,ELISA检测病原体存在较长窗口期。 病毒基因型. 病毒突变或变异 ELISA的灵敏度不够高。 献血者的免疫功能被抑制。,窗口期(Window period),窗口期；指从病毒感染人体后到血清中可检测到相应的病毒标志物（抗原、抗体或核酸）的时间。 窗口期的患者存在病毒血症，且可能具有传染性。 理论上，所有的病毒标志物用于病原
12、体的检测均存在窗口期，因此窗口期的越短越有利于病毒的筛查。,HCV感染的窗口期,HIV感染的窗口期,HBV感染的窗口期,病毒基因型(Genotype),HBV的基因型：A、B、C、D、E、F型。 HCV的基因型：HCV可分为6个基因型，即1-6型，进一步可分为50余个亚型，以小写英文字母表示，如以1a、2b、3c等表示。 HIV的基因型：和型。由于存在众多的基因型或亚型，部分ELISA试剂不能检测当地少见的基因型或亚型。,HBV基因型的分布图,病毒突变与变异(Mutation and Variation),原因： （1）个体免疫力的差异 （2）抗病毒治疗 （3）疫苗接种,HBV变易导致ELIS
13、A的假阴性,地点；保加利亚索非亚 献血员：女性，献血两次。 入选条件：HBsAg（-），抗HCV（-）和抗HIV（-） 进一步检测： HBeAg（+），抗HBc（+），HBV-DNA：4,120 拷贝 /mL 测序: 143位苏氨酸变成亮氨酸Leu,HBV变易导致ELISA的假阴性,地点；法国 血浆产品 Centaur试剂检测HBsAg（-），而雅培试剂检测HBsAg（+） 法国政府要求两个公司进行解释 目前未有进一步的结果报告，但众多专家分析可能是由于HBsAg突变所致,HBsAg的突变,1.HBsAg最重要的区域是124-148位氨基酸 2. HBsAg最常见的突变区域是141-145位氨
14、基酸 3. HBsAg最易突变的氨基酸是145位的谷氨酸,HBsAg存在结合捕获抗体与检测抗体的区域,一旦HBsAg与捕获抗体或检测抗体结合的区域发生突变，将会导致ELISA结果出现假阴性。,不同试剂检测突变 的HBsAg的能力存在差异,ELISA检测的灵敏度不够高,目前世界上最好的用于检测乙肝表面抗原（HBsAg）的ELISA试剂盒的灵敏度为10pg/ml，相当于106HBV颗粒/ml。,49,输血传播乙型病毒性肝炎的残余风险的比较,1995年前和2000年后输血传播HBV的危险度,50,输血传播丙型病毒性肝炎的残余风险的比较,1995年前和2000年后输血传播HCV的危险度,工作中应特别注
15、意HIV抗体检测的基本流程,小结,ELISA是当前乃至未来几十年血液筛查的主要方法之一。 NAT技术具有更高高敏感性和特异性，能显著降低输血传播疾病的发生 ，但其推广运用主要取决于成本效应分析。,(二)对血液制品进行病毒灭活,(1)NAT或其他筛查方法存在窗口期 (2)检测试剂的灵敏度不够高 (3)人为误差 (4)输血相关新的病原体病毒灭活:是保证输血安全的又一种重要手段!,人粒细胞无形体病,锥虫病,高致病性禽流感,登革热,西尼罗河病毒病,疯牛病,输血相关新发现传染病,病毒灭活的基本原则,杀灭血液或血液制品中的各种不同类型的病毒 尽可能杀灭血液或血液制品中的所有病毒 最大限度地保持血液成分的活性与治疗作用:(1)病毒灭活后RBC的存活率大于70%;(2) 血浆病毒灭活后凝血因子的活性为处理前的80%.,
