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1、炭疽防控技术 甘肃省动物疫病预防控制中心 胥元鹏,炭 疽,炭疽是由炭疽杆菌引起的人和动物共患的一种急性、热性、败血性传染病，常呈散发或地方性流行。其特征是血液凝固不良，天然孔出血,死后尸僵不全,脾脏肿大，皮下和浆膜下出血性,胶样浸润 。,炭疽的历史及危害,炭 疽 是 一 种 古 老 的 疾 病 ， 早 在 古 巴 比 伦 就 被 发 现 ， 西 方 圣 经 和 我 国 黄 帝 内 经 中 均 有 记 载 ， 在 历 史 上 曾 给 人 类 生 命 财 产 造 成 巨 大 灾 难 。1607年 中 欧 有 6万 人 因 患 炭 疽 丧 生 ， 俄 国 1870 1880年 的 10年 间 ， 因
2、 牲 畜 患 炭 疽 损 失 了 9000万 金 卢 布 ， 仅 1875年 就 有 10万 匹 马 死 于 炭 疽 。 利 用 炭 疽 袭 击 人 类 发 动 生 物 战 争 、 进 行 生 物 恐 怖 活 动 是 在 微 生 物 学 发 展 到 一 定 水 平 后 才 开 始 的 。 ( 年月的一天早晨，英国伦敦圣玛丽医院的细菌学家弗莱明像偶然发现了青霉素 ).,炭疽的历史及危害,“炭疽夫人”伊生化武器高官,日本731部队在中国用炭疽制造的罪恶731部队俯瞰图,炭疽的历史及危害,五角大楼炭疽恐慌惊动白宫 又关闭一处邮政设施,甘肃省炭疽发生情况,甘肃省炭疽每年均有零星发生,造成一定数量牛羊猪
3、的发病死亡,对人的生命财产亦造成了一定的威胁. 如2002年不完全统计,我省有4地5县发生炭疽疫情，发病53头（只）（其中猪1头，牛19头，羊3只，山羊26只，驴1头，人3名），死亡49头（只）（其中牛18头，羊3只，山羊26只，驴1头，人1个），扑杀同群牛8头。,我国30多个省都不同程度的有炭疽的发生和流行.1956-1998年我国炭疽累计发病113495例,死亡4168例,死亡率3.64%.畜间检测发现,我国南方以牛炭疽为主,其次是猪犬马,羊也有发病.北方以羊炭疽为主.其次为牛.马.驴.骡.,炭疽杆菌,1876年Koch分离到炭疽杆菌，用它感染实验动物成功，奠定了炭疽细菌学基础和提出Koc
4、h假设，1881年巴斯德获炭疽人工减毒株，成功地用于家畜的预防接种，开创了活菌免疫接种预防感染性疾病的先例 。,炭疽杆菌,炭疽杆菌是人类历史上第一个被发现的病原菌，是致病菌中最大的杆菌之一，两端平切，无鞭毛，在宿主标本涂片中呈单个或短链，培养后常形成竹节状长链。在有氧条件下形成芽孢，呈椭圆形，位于菌体中心，囊孢不膨大。,炭疽杆菌,光镜下炭疽杆菌菌落边缘呈卷发状,炭疽杆菌,港两岁儿童染炭疽病死亡,光镜下炭疽杆菌荚膜形态,繁殖体和芽胞,本菌为革兰氏染色阳性菌。 长而直的大杆菌 长达310微米，宽115微米，无鞭毛，不能运动。,炭疽 (彩色扫描电镜),人脾脏中炭疽杆菌（扫描电镜）.,炭疽杆菌（透射电
5、镜） 在活炭疽病畜体或死亡后未经解剖的尸体内，不形成芽胞。,一旦体内炭疽杆菌暴露于空气中，接触了游离氧，在一定温度下(12-42)就会形成芽胞。 芽胞呈卵圆形或圆形，位于菌体中央或稍偏向一端。,荚膜染色,A：炭疽芽孢薄片（透射电镜）有致密的胞膜 B： 炭疽芽孢（扫描电镜）收缩成椭圆形 C：炭疽繁殖体薄片（透射电镜）,炭疽杆菌为需氧菌，在37时生长良好。在普通琼脂平皿培养基上生长成不透明、灰白色、扁平、表面粗糙的菌落，边缘不整齐，能形成几个或数十个菌体相连的长链，低倍显微镜观察呈卷发状。在血液琼脂平皿培养基上，生长出湿润粘稠的菌落。菌落周围不溶血。,炭疽杆菌存在于炭疽病畜的尸体、土壤和水中。 病
6、畜死亡后各个脏器、血液、淋巴系统、分泌物及排泄物等处均有炭疽杆菌存在。 其中以脾脏的含菌量为最多，血液的含菌量次之。,肺中炭疽芽孢 （ 扫描电镜 ）炭疽杆菌的繁殖型菌体对外界理化因素的抵抗力较弱。但形成芽胞后抵抗力特别强，在污染的土壤、皮张、毛及掩埋炭疽尸体的土壤中能存活数年至数十年，在粪便和水中能长期存活。,炭疽杆菌,炭疽杆菌是一种不运动的革兰氏阳性大杆菌。在血液中单个或成对存在，少数呈3-5个菌体组成的短链，菌体两端平截，有明显的荚膜；在培养物中菌体呈竹节状的长链，但不易形成荚膜；体内之菌 体无芽胞，但在体外接触空气后很快形成芽胞。,炭疽杆菌青霉素串珠试验,菌体呈现串珠状,炭疽杆菌,该菌之
7、芽胞抵抗力则特别强，在直射阳光下可生存4天，在干燥环境中可存活10年，在土壤中可存活30年；煮沸1时尚能检出少数芽胞，加热100，2小时才能全部杀死。消毒药杀芽胞的效果为：乙醇对芽胞无害；3一5石炭酸13天；3一5来苏儿1224小时；4碘酊2小时；若在01升汞中加入05盐酸则15分钟；据报道20漂白粉或10氢氧化钠消毒作用显著。,炭疽的流行特点,各种家畜和人均可感染，其中牛、马、绵羊感受性最强；山羊、水牛、骆驼和鹿次之；猪感受性较低。狗、猫等杂食动物，虎、狮、豹、狼等肉食动物也可因误食炭疽病畜肉而感染死亡。本病具有发病急、病程短、可视黏膜发绀、天然孔出血等流行特点。病畜的分泌物、排泄物和尸体等
8、都可作为传染来源。该病人侵途径主要是消化道，也有经皮肤及呼吸道感染者。该菌入侵门户主要是咽、扁桃体、肺和皮肤。该病多为散发，常发生于夏季。,(一)流行特点 感染谱广： 各种家畜、野生动物和人都有不同程度的易染性。 草食动物最易感： 绵羊、牛、驴、马、骡、山羊、鹿发病最多；骆驼、水牛及野生动物次之；猪发病较少。野生动物如狼、狐狸、豹等吞食炭疽尸体而发病，并可成为本病的传播者。 人主要通过吃死畜的肉或接触污染炭疽杆菌的畜产品而感染。,季节性： 本病有一定季节性，夏季发病较多，秋、冬发病较少。夏季发生较多，可能与放牧时间长，气温高，雨量多，吸血昆虫大量活动等因素有关系。 疫源地： 炭疽芽胞可使污染地
9、区成为疫源地。大雨、山洪暴发或江河涨水时可将土壤中病原菌冲刷出来，污染牧场或饲料、水源等引起传染。,流行：炭疽病畜及死后的畜体、血液、脏器组织及其分泌物、排泄物等均含有大量炭疽杆菌，如尸体掩埋不严或太浅，甚至随意剥皮、解剖和随地刮扔，被猫、狗、鸟及野兽等扒食，可将皮.肉、内脏拖到很远的地方散布病原；另外从病畜口、鼻、肛门、阴道流出的血液，病畜炭疽痈破溃液等污染厩舍、饲养管理用具、饲草、饲料，一经健康家畜接触，就可能被传染而发病。,传播途径有三： 1、主要通过消化道感染 这是因为采食或饮用被炭疽杆菌污染的草料、井水、河水，以及在污染牧地放牧受到感染。 2、其次是通过皮肤感染 主要是由带有炭疽杆菌
10、的吸血昆虫叮咬及创伤(如绵羊的剪毛、断尾、去势伤口、咽粘膜创伤等)而感染。 3、第三经过呼吸道： 由于吸入混有炭疽芽胞的灰尘，粘膜侵入血液而发病。,炭疽的主要症状,以牛炭疽为例 牛：潜伏期20天。病牛多呈急性经过，病初体温高达4141，呼吸增速，心跳加快；食欲废绝，有时可见瘤胃膨胀；可视黏膜有出血点；有时精神兴奋，行走摇摆；最急性型常在放牧或使役中突然倒毙，无典型症状。 皮肤型炭疽常发生于颈、胸、腰及外阴，有时发生于口腔，造成严重的呼吸困难；发生肠痈（肠型炭疽）时，下痢带血，肛门浮肿。,炭疽的主要症状,皮肤型炭疽（据J.G.Black）,解剖变化,牛炭疽常呈败血型，也可表现为痈型。 1败血型(
11、急性型)炭疽 尸僵不全或缺如，尸体极易腐败而致腹部膨大；从鼻孔和肛门等天然孔流出不凝固的暗红色血液；可视黏膜发绀，并散在出血点；因机体缺氧、脱水和溶血，故血液黑红、浓稠、凝固不良，呈煤焦油样；剥开皮肤可见皮下、肌肉及浆膜下有出血性胶样浸润；脾脏显著肿大，较正常大23倍，脾体暗红色软如泥状；全身淋巴结肿大、出血，切面黑红色。,解剖变化,2痈型(皮肤型或肠型)炭疽 当机体抵抗力较强或入侵的病原较少、毒力较弱时，则病变常定位于局部，即痈型炭疽。炭疽痈实质上是局部组织或器官发生的出血坏死性或浆液出血性炎症。其中心部位发生坏死呈黑褐色，致密、坚实；坏死区周围出血、色红；再向外则是大面积淡黄色或黄红色胶样
12、浸润。,诊 断,因炭疽病经过急、死亡快，加之疑似炭疽病例严禁剖检，故诊断较为困难。其诊断要点为： 天然孔出血，血液黑色、凝固不良，如煤焦油样； 黏膜、浆膜多发生出血，浆膜腔积液； 败血脾及出血性淋巴结炎； 可见到肠痈或皮肤痈； 血液、病变组织和淋巴结涂片细菌检查； 为进一步确诊可采用动物接种试验、血清学诊断及鉴别诊断等。 炭疽与气肿疽区别：牛气肿疽多具气性肿胀，有捻发音；患部肌肉红黑色，切面呈海绵状；脾和血液无明显变化 炭疽与巴氏杆菌病区别：颈部肿胀与炭疽相似，但脾不肿大；血液凝固良好。,诊断 (一)流行特点 疫源地、季节性 (二)症状 潜伏期： 20天 1最急性： 常见于绵羊和山羊。病情急剧
13、，死亡羊只内脏常无炭疽典型病变，几乎与正常屠宰羊相似，应予注意。 2急性型： 大多为牛。 3. 亚急性： 般见于马、骡、驴。,4猪 猪对炭疽的抵抗力较强，大多数是慢性，生前无明显临床症状，多在屠宰后肉 品卫生检验时才被发现。 其特征变化是咽部发炎，扁桃腺肿大、坏死。颌下淋巴结肿大、出血和坏死，切面干燥、无光泽，呈砖红色，有灰色或灰黄色坏死灶。周围组织有大量黄红色胶样浸润。 亚急性型： 主要是咽炎的表现，体温升高，精神沉郁，食欲不振，咽喉部明显肿胀，吞 咽和呼吸困难，颈部活动不灵活。口、鼻粘膜呈蓝紫色，最后窒息而死。 急性型： 本型发生较少，主要是急性败血性变化，体温升高到415以上，精神沉郁，
14、食欲废绝，呼吸困难，可视粘膜发紫，1-2天死亡。 发生肠炭疽时，病猪发生便秘及腹泻，甚至粪中带血，重者可死亡，轻者可恢复健康。,(三)病理变化 炭疽病畜的尸体、血液和各脏器组织内含有大量炭疽杆菌，暴露在空气中则形成芽胞，抵抗力很强，不易彻底消灭，因此，对病畜禁止剖检。 1、急性败血型尸体迅速腐败而膨胀，尸僵不全，天然孔流出暗红色带泡沫的血液。粘膜呈暗紫色，有出血点，剥开皮肤可见皮下、肌肉及浆膜有红色或黄红色胶样浸润，并有数量不等的出血点。血液粘稠，颜色为黑紫色呈煤焦油样，不易凝固。脾脏高度肿大，比正常大2-5倍，包膜紧张，切面脾髓软如泥状，黑红色，脾的结构模糊不清，用刀可大量刮下。淋巴结肿大，
15、出血。肺充血、水肿。心、肝、肾变性。胃肠有出血性炎症。,2痈型 体表痈肿部呈现浆性出血性水肿。肠型多见十二指肠及空肠，初红色圆形隆起，界限明显，表面覆有纤维素，随后发生坏死，形成灰褐色痴。周围组织及肠系膜出血。3咽型 炭疽可见扁桃腺坏死，喉头、会咽、颈部组织发生炎性水肿。周围淋巴结肿胀、出血、坏死。,（四）实验室诊断1细菌学诊断 从死畜耳静脉或四肢末梢的浅表血管采取血液涂片，用姬姆萨或瑞氏染色，用显徽镜检查，可以看到单个或短链有荚膜的两端平截竹节状大杆菌，即可作出初步诊断。猪体局部炭疽涂片的菌体形态常不典型。如果尸体不新鲜时，要注意与类炭疽杆菌相混同，所以腐败病料不适于镜检。 采取新鲜病料接种
16、在普通琼脂平皿上，37温箱培养24小时后，可见有表面粗糙、边缘卷发状的典型菌落；在普通肉汤培养中，管底有絮状沉淀，上层液透明，轻轻摇动，沉淀物徐徐上升，随后即下沉，不形成菌膜。必要时，对培养的细菌还可进行鉴定试验。,2动物感染试验 一般常用小鼠、豚鼠及家兔。 将病料或培养物用生理盐水稀释5-10倍，对小鼠皮下注射0102毫升，或豚鼠0205毫升，家兔皮下注射051毫升，经2-3天死亡。死亡动物的脏器、血液等抹片，经瑞氏染色镜检，可见多量有荚膜的成短链的炭疽杆菌。也可用病料进行培养及炭疽沉淀反应检查，均可得到阳性结果。,3. 炭疽沉淀反应 又叫阿斯科里氏反应。 方法是取病死动物的组织数克，剪碎或捣烂，加510倍生理盐水，煮沸1015分钟，冷后过滤或离心沉淀，上清液加入细玻璃管或小试管内，用毛细吸管吸取沉淀素血清慢慢加入管底，使形成整齐的两层液面，在两液的接触面出现白色的沉淀环判为阳性反应(反应在1-2分钟内出现，最长在10-15分钟观察)，即可诊断为炭疽。这个反应特异性高，操作简便、迅速，检出率高，即使腐败的炭疽材料，仍可出现阳性反应。大量畜产品检查时，也常采用此法。 干皮张病料进行检查时，先进行高压消毒后剪碎，加510倍05石炭酸生理盐水冷浸20小时或置37中浸泡3小时，浸出液滤过，即可作为沉淀原，按前法进行检验。,
