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1、霉菌毒素的控制/检测方法以及解决方案,控制饲料原料中霉菌毒素的办法,农作物的耕种: 种植对霉菌有抵抗力的品种 使用有效的昆虫控制方法 维持好的灌溉系统 实行良好的耕作, 农作物轮换, 杂草控制 收割时: 适当的收割时间 迅速降低水份 除去多余的雑质,收获后及储藏: 保护储藏的原料/产品不被水份, 昆虫, 及其它环境因素的侵害 保存原料/产品在干燥干净的表面 测试所有要使用的原料的霉菌毒素 贮存桶及管路的定期清理 先进先出 收获后, 加工, 制造: 测试所有要使用的原料及成品的霉菌毒素 监控加工过程以维持高品质的产品 贮存桶及加工设备的定期清理 依照GMP程序,控制饲料原料中霉菌毒素的办法,饲喂
2、动物: 保存产品在干燥干净的表面 先进先出 贮存桶及饲喂系统的定期清理 水槽的定期清理 垫料,控制饲料原料中霉菌毒素的办法,如何解决霉菌毒素的危害？,霉菌毒素的预防1,控制饲料原料的质量。关键在于严格控制原料的含水量，一般要求玉米、高粱、稻谷等的含水量应不超过14%；大豆及其饼粕、麦类、糠麸类、甘薯干、木薯干等的含水量应不超过13%；棉籽饼粕、菜籽饼粕、向日葵饼粕、亚麻仁饼粕、花生仁饼粕、鱼粉、骨粉及肉骨粉等的含水量应不超过12%。,霉菌毒素的预防2,预防： 使用优质防霉剂，预防原料或成品饲料霉变。饲料防霉剂种类很多，目前使用最广泛的是丙酸及其盐类（包括丙酸钠、丙酸钙、丙酸铵和二丙酸铵）、山梨
3、醇及其盐类、双乙酸钠等是常用的防霉剂。饲料一旦污染应使用有效的霉菌毒素吸附剂。,霉菌毒素的控制,物理、化学处理法 2）生物转化法 3）吸附法（霉菌毒素吸附剂）,霉菌毒素的脱毒,物理化学方法？ 方便性如何？ 适口性如何？,吸附剂法,为了减少损失， 很多学者采用一些物质作为霉菌毒素的吸附剂来处理霉变饲料， 即在饲料中添加可以吸附霉菌毒素物质， 使毒素在经过动物肠道时不被动物所吸收， 直接排出体外。例如：甘露低聚糖，水合铝硅酸盐类，膨润土，蒙脱石等。,市场上霉菌毒素吸附剂产品主要类型,黏土类吸附剂； 酵母细胞壁提取物；酶解毒剂； 微生物解毒剂； 中草药制剂；,粘土类吸附剂,Silicon tetra
4、hedron: SiO44-,Aluminum octahedron: AlO69-,硅及铝 地球上最丰富的矿物质 不同的硅及铝组合造成不同的粘土类 粘土类吸附剂是自然矿产 粘土类吸附剂都带负极,硅铝酸盐Aluminosilicates,高岭土(1:1): 水合硅铝酸盐Al2(Si2O5)(OH)8 延展性差, 带负极沸石粉:水合硅铝酸盐Na2Al2Si3O10.2H2O 火山灰,可能污染许多矿物质及重金属 结构像蜂窝-分子筛, 可吸引大小适当带负极的分子 最常用在滤水器的滤芯膨润土 (2:1): Montmorillonites, Sodium and calcium bentonites
5、(Na,Ca)X(Al,Mg)2Si4O10(OH)2.nH2O 火山灰类的天然矿产 水合钙钠硅铝酸盐 延展性比较好,吸水后膨胀 增加饲料流动性,膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素,+,+,-,H2O: 高极性,螃蟹眼状的结构,黄曲霉菌毒素: 唯一带有极性的 霉菌毒素,膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素,Divalent Interlayer cations,or,粘土类吸附剂的局限性,添加剂量高 (1-3%) 吸附力取决于分子大小及带正价的分子 只能吸附带极性的黄曲霉毒素 但是也吸附矿物质, 例如锰, 锌, 镁 (Chestnut et al. 1992), 铜及钠 (Kramer 1993), 尤其是使用
6、量 0.5% 对吸附呕吐毒素, T-2毒素, 玉米赤霉烯酮 (Orr et al. 1988; Kubena et al. 1998), 赭曲霉毒素A (Huff et al. 1992), 蛇形菌毒素 (Kubena et al. 1993), 高羊茅毒素 (Chestnut et al. 1992)无效 可能有二恶英(dioxins)及重金属的污染 对环保有负面的影响,吸附剂法的缺陷,酶法分解霉菌毒素,黄曲霉毒素 B1,黄曲霉毒素 B2,黄曲霉毒素 G1,黄曲霉毒素 G2,黄曲霉毒素的结构非常相似, 一种酶就可以分解所有的黄曲霉毒素,使用酶分解黄曲霉毒素,一种酶可能可以分解所 有的单端孢霉
7、烯类毒素,单端孢霉烯类毒素(Trichothecenes),需要同时含有多种的酶,但是还有其他的霉菌毒素,黄曲霉毒素 萎蔫酸 Penicillic Acid Alternariol Fusariocin Penitrem Citreoviridin Fusarins Phomopsin 桔霉素 Islanditoxin Roridins 环匹克尼酸 Luteoskyrin Rubratoxin 呕吐毒素 串珠镰刀菌毒素 Slaframine 蛇形菌毒素 Monoacetoxyscirpenol Dicoumarol Neosolaniol Slaframine Stachbotryotoxin
8、s Ergotamine 赭曲霉毒素 Sterigmatocystin Ergo Toxins Oosporein T-2毒素 Fumitremorgen Paspalitrems Tremorgens 烟曲霉毒素 Patulin 玉米赤霉烯酮,还有其他300多种, 可能还有数千种未知的霉菌毒素,酶分解霉菌毒素的局限性,酶也是蛋白质, 活力可受pH, 温度, 及受质(霉菌毒素)的影响酶对受质的选择非常专一性, 而且专一性的程度非常高, 有时是绝对性的是否适合该种酶的作用条件，酶解后的次级产物是否能保证没有毒性。,酵母细胞壁提取物,有效成份:改性的葡聚糖,利用酵母细胞壁内的葡萄糖甘露聚糖的化学结
9、构与同样属于有机类的霉菌毒素的亲和性，吸附霉菌毒素。类似于肥皂去油的原理，为表面亲和吸附。,改性的葡聚糖的三维螺旋结构,改性甘露聚糖-黄曲霉毒素,黄曲霉毒素,甘露聚糖,其他毒素与它的吸附方式,T2,呕吐毒素,赭曲霉毒素,烟曲霉毒素,乳酸菌对于霉菌毒素的作用,乳酸菌对于霉菌毒素的去除的作用是目前在食品和人类营养方面一个崭新的课题。目前主要集中在黄曲霉毒素AFb1上。已经有大量研究证实了一些乳酸菌能够很好去除黄曲霉毒素，可能还有其他毒素（参见随附的参考文献）。,霉菌毒素检测方法,饲料中霉菌及霉菌毒素的检测方法主要有目测法、 薄层色谱法(T LC) 、 高效液相色谱法(HP LC) 、 酶联免疫法(
10、E LISA) 、 放射免疫法(KIA)及气相色谱法等。快速试纸检测法,薄层层析法(TLC),T LC法是我国测定食品及饲料中霉菌毒素的国家标准方法之一 ,其原理是针对不同的样品 ,用适宜的提取溶剂将霉菌毒素从样品中提取出来 ,经柱层析净化 ,再在薄层板上层析展开、 分离 ,利用霉菌毒素的荧光性 ,根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含量。T LC法由于设备简单 ,易于普及 ,所以国内外仍在使用 ,但该法样品前处理繁琐 ,且提取和净化效果不够理想 ,提取液中杂质较多 ,在展开时影响斑点的荧光强度 ,而双向展开虽避免了杂质干扰，但增加了操作步骤和时间(叶雪珠 ,2003) 。,液相色谱法(HP
11、LC),HPLC法是近几年发展起来的检测霉菌毒素的方法，主要是用荧光检测器检测 。在适宜的流动相条件下，采用反相C18柱 ，使霉菌毒素同时分离。用 HPLC 法检测，最低检出量0. 08 ng ，回收率为 92. 87 % 。该法快速而准确 ,但需要昂贵的仪器设备 。,酶联免疫法(ELISA),ELISA 法是1971年提出的。基本原理是在合适的载体上 ,酶标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体形成酶标记的抗原抗体复合物 ,在酶底物参与下 ,复合物上的酶催化底物使其水解 ,氧化或还原成为另一种带色物质。可用分光光度计进行测定 ,从而可计算出参与反应的抗原和抗体的含量(杨利国 ,1998) 。该免疫学
12、方法更实际 ,其灵敏度与 TLC 或 HPLC 法相当或更高 ,因而具有更广阔的应用前景。该法由于快速、 灵敏、 准确、 可定量、 操作简便、 无需贵重仪器设备 ,且对样品纯度要求不高等特性 ,特别适用于大批量样品的检测。,金标快速试纸条检测原理,试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1特异性抗体。测试时，样品滴入试剂盒孔内，如AFB1在样品中浓度低于5ng/ml时，胶体金抗体不能与AFB1全部结合。这样，胶体金抗体在层析过程中会被固定在膜上的AFB1-BSA偶联物结合，在测试区（T）内会出现一条紫红色条带。如果AFB1在样品中浓度高于5ng/ml
13、时，胶体金抗体与AFB1全部结合，从而在测试区（T）内因为竞争反应不会与AFB1-BSA偶联物结合而不出现紫红色条带。,检测时间短，从样品处理到检测不到半小时。采用无毒无害的乙酸乙酯为霉毒素提取剂，提取时短、溶剂易于去除，改变了传统脱溶剂长且污染环境和危害操作人员的健康等缺点。不需紫外光源、专用检测仪和专业人员，适用于现场和基层单位。操作简单、结果准确，可逐份检测，故成本低。试剂稳定，室温保存，有效期长（至少一年半）。,金标试纸法快速检测的优势,理想的霉菌毒素吸附剂,具有吸附不同种类霉菌毒素的能力； 在饲料中使用量低且有效； 能在饲料中迅速均匀地混合； 在制备颗粒、膨化料和饲料储存期间具有较强的稳定性； 不会吸附饲料中的维生素、微量元素或其他营养物质； 在广泛的PH 范围内具有高稳定性； 排出后可被生物降解；,Declan O , Sullivan(2003),谢谢大家,联系方式： 电邮：intech- 电话：0731-4305959 手机：13974971191,
