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1、专题3 植物的组织培养技术,基础自主梳理,全能性,脱分化,再分化,4实验操作步骤： 制备MS培养基外植体消毒_培养_栽培 二、月季的花药培养 1理论基础：花粉具有_。2花粉发育过程：_、单核期、_等阶段。 3产生花粉植株的两种途径：,接种,移栽,全能性,四分体时期,双核期,(2)接种 剥离花药尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织。 要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或_的形成。 (3)培养：花药培养一段时间后开裂，_或释放出胚状体。要将前者及时转移到分化培养基上，如释放出胚状体，要尽快在花药开裂后，将_，分别移植到新的培养基上。,胚状体,长出愈伤组织,幼小植株分
2、开,学车问答 http:/ 学车问题回答,驾驶员模拟考试2016 http:/ 科目一 科目二 科目三 科目四,高频考点突破,(2)月季的花药培养,2影响植物组织培养的因素 (1)内因：植物的种类，同一植物材料的年龄、保存时间的长短等。 (2)外因 营养 a矿质元素。 b有机物。,调节剂(生长素、细胞分裂素) a使用顺序不同结果不同。 b两者用量比例不同发育方向不同。 环境条件：温度、pH、光照等。 【易误警示】 一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。,即时应用(随学随练，轻松夺冠) 1菊
3、花的组织培养和月季的花药培养都是利用组织培养技术，关于两者的叙述下列说法中正确的选项有( ),A. B C D 解析：选D。菊花的组织培养用茎段来培养，比较容易，不必添加植物激素；在菊花组织培养中不会发生染色体倍性的变化；需要每天日光灯照射12小时；形成愈伤组织或胚状体后不必更换培养基。月季花药的离体培养需要添加细胞分裂素和生长素等植物激素；在花药培养中，通过愈伤组织形成的植株会出现染色体倍性的变化，所以需要染色体倍性的鉴定；最初不需要光照，幼小植株形成后需要光照；形成愈伤组织或胚状体后需要转移到分化培养基上进一步分化培养。,生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用
4、及特点为：,即时应用(随学随练，轻松夺冠) 2利用植物组织培养的方法可快速、大量地繁殖植物。在培养过程中，取该植物的花芽并将其分别培养在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中，花芽的生长状况如下表所示：,请据表回答下列问题： (1)在此过程中能实现脱分化的花芽是_组。从实验结果可以看出，能诱导新芽形成的条件是_。 (2)上述实验结果表明，在植物组织培养过程中，诱导芽和根形成的关键是_。 在生产实践中，欲快速、大量获得此植物的花芽，可选用_组的培养基进行大量生产。,答案：(1)BCD 细胞分裂素浓度大于生长素浓度 (2)培养基中细胞分裂素含量与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞分裂素与生
5、长素的浓度比) D,命题视角剖析,花药的离体培养(2011年南京质检)下图是水稻的花药通过无菌操作，培养产生花粉植株的两种途径的示意图。请据图回答下列问题：,(1)图中的花粉应选自_的时期，花药培养成功率最高。图中的A是_，C过程指_，B指_。 (2)这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于_。 (3)配制培养基时加琼脂的目的是_。 (4)组织培养要求无菌操作的原因是_。 (5)要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有_和_两类植物激素。,【尝试解答】 (1)在单核期即细胞核由中央移向细胞一侧 胚状体 诱导生根 幼苗 (2)培养基中激素的种类及其浓度配比 (3)使培养基呈固体状态，有利于外植体的
6、生长 (4)如不无菌操作，微生物会在培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织竞争 (5)细胞分裂素 生长素,【解析】 (1)进行花药离体培养，花粉发育时期的选择非常重要，宜选取单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期。 (2)图示两种途径的主要区别在于所使用培养基中激素的种类及浓度比不同。 (3)培养基中加入琼脂可制成固体培养基。 (4)由于微生物会在营养丰富的培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织进行竞争，故培养过程中应“无菌”操作。 (5)植物组织培养过程中，生长素与细胞分裂素的应用对于外植体脱分化、再分化至关重要。,( 2009年高考山东卷)人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利
7、用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：,请回答： (1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行_。接种前，要对人参根进行_。 (2)用于离体培养的根切块，叫做_。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于_污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于_污染。 (3)用少量_酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。,(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用_方法，操作时应采用_加热。 【尝试解答】 (1)灭菌 消毒 (2)外植体 真菌(霉菌) 细菌 (3)果胶 (4)萃取(浸取) 水浴,【解
8、析】 (1)灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止杂菌的污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行消毒。,(2)用于离体培养的离体的植物组织或器官(根切块)称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。我们可以根据菌落的特征判断微生物的种类。霉菌的菌落较大，肉眼可见许多毛状物，呈棕色、青色等，细菌菌落常表现为湿润、黏稠，有光泽。 (3)果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层，
9、使愈伤组织分离。 (4)人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，可以用萃取法从培养物干粉中提取。萃取时要采用水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，用明火加热容易引起燃烧、爆炸。,实验操作中易误的几个问题 (1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照；而在后期均需光照。,自我挑战下列有关花药离体培养， 说法错误的是( ) A对材料的选择最常用的方法是焙花青铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色 B材料消毒时需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗 C接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照 D若接种的花药长出愈伤组织或形成胚状体后，要适时转换培养基，以便进一步分化成再生植株,【尝试解答】 _A_ 【解析】 确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法，有些植物细胞核不易着色时，需采用焙花青铬矾法。,
