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1、2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,如何让不同种的动物体细胞进行杂交？,植物体细胞杂交,去细胞壁,纤维素酶、果胶酶,筛选,动物细胞与植物细胞的差别：,无细胞壁 全能性受限制，不能发育成杂种动物,动物细胞杂交与植物细胞杂交的不同： 不需去除细胞壁 不能发育成新的动物个体,一、动物细胞融合（细胞杂交）,1、概念：,指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,2、结果：,形成单核的杂交细胞,3、原理：,细胞膜的流动性,4、诱导方式,物理法：离心、振动、电激,化学法：聚乙二醇（PEG),生物法：灭活的病毒,5、过程：,动物细胞A 动物细胞B,诱导，融合,2个完整的杂交细胞AB,有丝分裂,（膜融合、
2、质融合）,（核融合）,注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞,6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,二、单克隆抗体,传统的抗体生产办法及缺陷是什么？,抗体由什么细胞产生？,B淋巴细胞,每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群,1975，米尔斯坦和柯勒 杂交瘤技术,1、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又
3、能足够数量的单一抗体。,2、过程,B淋巴细胞 骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B细胞,B-瘤细胞,瘤-瘤细胞,选择培养,杂交瘤细胞（ B-瘤细胞）,克隆化培养,抗体检测,杂交瘤细胞,体外培养,单克隆抗体,3.单克隆抗体的应用：,单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大,作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速,用于,运载药物：制成“生物导弹”,治疗疾病：主要用于癌症治疗,总结,一种诱导细胞融合的新方法,一种新细胞,一个优势,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振动、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导
4、方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物、动物细胞融合的比较,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,2动物细胞融合的目的中最重要的是-（ ） A.克服远缘杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ） 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞,A,D,4. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是-（ ） A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,
