骨髓细胞铁染色标准操作程序

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1、骨髓细胞铁染色标准操作程序骨髓细胞铁染色标准操作程序1.1.检验目的检验目的缺铁性贫血、铁粒幼红细胞贫血、难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多(RARS)的辅助诊断。2.2.检测原理检测原理骨髓小粒中的含铁血黄素(细胞外铁)和幼红细胞内的铁粒(细胞内铁)在酸性环境下与亚铁氧化钾作用，生成亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应。3.3.性能特征性能特征无。4.4.标本要求标本要求 （包括病人准备、容器、样本类型等）（包括病人准备、容器、样本类型等）4.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。4.2 标本类型：骨髓。4.3

2、 标本容器：洁净载玻片。4.4 标本存放:4.4.1 未检测标本的存放：放于细胞室未检测标本架上。4.4.2 已检测标本的存放：骨髓存片柜，保存 10 年以上。4.5 标本运输:室温条件下运输。4.6 标本拒收标准：参照采集手册 。5.5.仪器和试剂仪器和试剂5.1 试剂名称：浓盐酸 、20 g/L 亚铁氰化钾溶液、1 g/L 中性红液。5.2 试剂来源：自配试剂。5.3 试剂储存：20 g/L 亚铁氰化钾溶液保存于 28，浓盐酸、中性红液保存于室温。6.环境和安全环境和安全浓盐酸与亚铁氰化钾溶液避免相互污染，应分别不同位置存放。20 g/L 亚铁氰化钾溶液为剧毒液体，避免污染环境。7.检测前

3、准备检测前准备在玻片头端贴上标签编号。8.校准校准/定标定标无9.质量控制质量控制正常骨髓阳性对照。10.标本检测标本检测10.1 选取洁净干燥试管， 20 g/L 亚铁氧化钾液 500ml 加浓盐酸 100ml，混匀，滴加到干净玻璃皿中。选骨髓小粒丰富的髓片，倒扣在玻璃皿的混合液中，染色 30 分钟。流水冲洗 10 分钟。中性红复染 1-2 分钟。水洗，晾干，镜检。10.2 结果判断10.2.1 细胞外铁：分五级标准：-：无颗粒所见1+：有少数颗粒或偶见铁小珠2+：有较多的铁颗粒和小珠 3+：有很多的铁颗粒、小珠和少数小块状 4+：有极多的铁颗粒、小珠并有很多的小块，密集成堆10.2.2 细

4、胞内铁：用油镜计数 100 个中、晚幼红细胞，记录胞浆中含有蓝色细小颗粒细胞（铁粒幼细胞）的百分率。并根据细胞内铁颗粒的数目、大小，染色深浅和颗粒分布情况，将铁粒幼细胞分为四型： 型：幼红细胞内含铁粒 1-2 粒型：幼红细胞含内铁粒 3-5 粒型：幼红细胞内含铁粒子 6-10 粒型：幼红细胞含铁粒大于 10 粒环形铁粒幼红细胞：含铁粒在 6 粒以上，其中 2/3 以上的铁粒围核排成完全或不完全环形（1/2 以上） 。11.11.生物参考区间生物参考区间细胞外铁 ： 1+2+细胞内铁：铁粒幼红细胞12%44% 12.12.危急值危急值无。13.13.临床意义临床意义13.1 缺铁性贫血细胞外铁明

5、显减少，甚至消失，细胞内铁阳性率低或阴性。铁剂治疗后细胞内、外铁可迅速增多。非缺铁性贫血细胞外铁可增高，细胞内铁正常或稍多。13.2 铁粒幼红细胞贫血的幼红细胞含铁粒粗而多，并可发现环形铁粒幼红细胞，占幼红细胞的 15% 以上。13.3 难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多(RARS)时铁粒幼细胞增多，环形铁粒幼细胞15% 。14.14.注意事项（干扰、潜在变异、超检测范围结果的处理等）注意事项（干扰、潜在变异、超检测范围结果的处理等）14.1 所有器皿必须清洗，事先经除铁处理。尤其是载玻片。14.2 亚铁氰化钾-盐酸混合液应用液必须临用时配制。14.3 细胞外铁需用含有骨髓小粒的涂片。15.15.参考文献参考文献15.1 全国临床检验技术操作规程 （第 4 版）16.16.记录表格记录表格无