《生物研究生英文文献报告制作好》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生物研究生英文文献报告制作好（20页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Hormonal regulation of the death commitment in programmed cell death of the silkworm anterior silk glands,家蚕前部丝腺程序性死亡中死亡转型的激素调控研究,报告人：xxxx 导 师：xxx 专 业：xxxx,纲要,引言 实验 结论 问题,引言,昆虫幼虫到蛹转化过程中，组织响应20E产生各种生长变化，其逐渐获得20E响应能力的过程叫蛹的转型。如家蚕表皮，成虫盘等。 特点：1.对20E有响应能力2.JH可以抑制20E响应的获得。 3.从JH逐渐失去敏感开始，到完全失去敏感结束。 (Riddifo
2、rd, 1985; Obara et al., 2002; Koyamaet al., 2004） 家蚕的前部丝腺（ASG）在五龄5天（5）开始响应20E产生程序性死亡（PCD），在4到5对JH失去敏感。 （Kakei et al., 2005）,家蚕ASG是否也有和蛹转型相似的死亡转型？,ASG,葡萄糖氧化酶 （ GOD ）,H2O2,20E的响应,PCD,引言,ASG的研究方式：体外培养,干扰ASG对20E响应的测定,（Matsui et al., 2011）,实验设计,排除GOD/H2O2干扰,确定20E响应获取时间 找出相关基因,JH是否与ASG获取20E响应有关系,确定JH失去敏感的
3、时间,确定Kr-h1途径与20E响应获取的关系,扩大培养基体积培养,JHA处理蚕后取出ASG 用9ml 1 M 20E培养,JHA处理不同龄期后取ASG用9ml 1 M 20E,JHA处理不同龄期蚕后测定Kr-h1表达水平,9ml 1 M 20E培养ASG 形态学观察及电泳,实验,1. 3的ASG在不同剂量Grace培养基培养,3的ASG在0.3,3,6,9 ml 1 M 20E的Grace培养基培养144h,0.625,0.31,实验设计,排除GOD/H2O2干扰,确定20E响应获取时间 找出相关基因,JH是否与ASG获取20E响应有关系,确定JH失去敏感的时间,确定Kr-h1途径与20E响
4、应获取的关系,扩大培养基体积培养,JHA处理蚕后取出ASG 用9ml 1 M 20E培养,JHA处理不同龄期后取ASG用9ml 1 M 20E,JHA处理不同龄期蚕后测定Kr-h1表达水平,9ml 1 M 20E培养ASG 形态学观察及电泳,选用9ml 1 M 20E,蛹定型特点：1.对20E有响应能力 2.JH可以抑制20E响应的获得。 3.从JH逐渐失去敏感开始，到完全失去敏感结束,实验,2.1.ASG获得20E响应的时间,取各时期的ASG在9ml 1 M +20E和-20E的Grace培养基培养144h,实验,2.2.光镜观察和DAPI染色及20E相关基因的表达,V1,V2,+20E,-
5、20E,Score 0,Score 6,Type B,9ml培养8h,实验设计,排除GOD/H2O2干扰,确定20E响应获取时间 找出相关基因,JH是否与ASG获取20E响应有关系,确定JH失去敏感的时间,确定Kr-h1途径与20E响应获取的关系,扩大培养基体积培养,JHA处理蚕后取出ASG用9ml 1 M 20E培养,JHA处理不同龄期后取ASG用9ml 1 M 20E,JHA处理不同龄期蚕后测定Kr-h1表达水平,9ml 1 M 20E培养ASG 形态学观察及电泳,选用9ml 1 M 20E,V2的ASG完全响应20E完成PCD,蛹定型特点：1.对20E有响应能力。 2.JH可以抑制20E
6、响应的获得。 3.从JH逐渐失去敏感开始，到完全失去敏感结束。,实验,3.JH对20E响应能力获得的影响,A,B,A.3去除CA，幼虫0.1g JHA处理, 0用9ml 0.1M 20E培养144H B. 3去除CA，幼虫0时0.1g JHA处理，3取出ASG用9ml 0.1M 20E培养144H,实验设计,排除GOD/H2O2干扰,确定20E响应获取时间 找出相关基因,JH是否与ASG获取20E响应有关系,确定JH失去敏感的时间,确定Kr-h1途径与20E响应获取的关系,扩大培养基体积培养,JHA处理蚕后取出ASG后用9ml 1 M 20E培养,JHA处理不同龄期蚕后取ASG用9ml 1 M
7、 20E,JHA处理不同龄期蚕后测定Kr-h1表达水平,9ml 1 M 20E培养ASG 形态学观察及电泳,选用9ml 1 M 20E,V2的ASG可完全获得20E响应完成PCD,JHA与20E响应获取有关，表现为抑制,蛹定型特点：1.对20E有响应能力。 2.JH可以抑制20E响应的获得。 3.从JH逐渐失去敏感开始，到完全失去敏感结束。,实验,4.JH失去敏感的时间,A.3去除CA，取V0到V6幼虫分别用0.1g JHA处理，2天后取出ASG用9ml 0.1M 20E培养144H。,B. 2到6用0.1g JHA处理，到V8取出ASG，用9ml 0.1M 20E培养144H。,A,B,实验
8、设计,排除GOD/H2O2干扰,确定20E响应获取时间 找出相关基因,JH是否与ASG获取20E响应有关系,确定JH失去敏感的时间,Kr-h1基因与20E响应获取的关系,扩大培养基体积培养,JHA处理蚕后取出ASG 用9ml 1 M 20E培养,JHA处理不同龄期蚕后取ASG用9ml 1 M 20E,JHA处理不同龄期蚕后测定Kr-h1表达水平,9ml 1 M 20E培养ASG 形态学观察及电泳,选用9ml 1 M 20E,V2的ASG可完全获得20E响应完成PCD,JHA与20E响应获取有关，表现为抑制,JH敏感在V4到V5之间开始失去，在V6彻底失去,实验,5.JHA与Kr-h1的表达,B
9、.3去除CA，取V4到V6幼虫分别用0.1g JHA处理，2天后取出ASG,A.左. 正常幼虫的表达右. 3去除CA，幼虫V0时0.1g JHA处理，V3取出ASG检测,B,A,结果,ASG在V1与V2之间响应20E。 JH可以抑制ASG对20E响应。 ASG开始在V4到V5之间对JH失去敏感，在V6完全失去。 V2到V6，JH浓度很低，JH在这时期与20E响应无关，此时GOD/H2O2抑制了20E的响应，GOD可以预防20E意外升高对ASG造成损害。,结果,第一次证实ASG死亡转型存在。 提出在20E介导ASG进行PCD过程，受到JH和GOD双重调控的独特机制。,问题,20E响应获取和JH失去敏感的分子机制还不清楚。IV4到V2在虫体内不会出现任何PCD现象，幼虫蜕皮时期对凋亡的抑制机制还不清楚。Kr-h1在V6也可受JH诱导表达，Kr-h1可能与死亡定型无关。JH对死亡定型的影响可能存在另外一种信号途径。,待解决,
