微生物的分布实验报告

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1、微生物的分布实验报告微生物的分布实验报告 篇一：微生物实验报告 微生物实验报告 一环境中的微生物的检测和分离纯化 实验目的： 1 学习并掌握无菌操作技术原理和方法 2 学习用稀释涂布法分离微生物 3 认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的原理 实验材料： 1 土样溶液 0.5ml，无菌生理盐水 2 取液器(1000L 一支，100L 一支)，培养箱，培 养皿(12 个)，无菌有帽试管，三角瓶，无菌涂棒，接种环， 1000L 无菌吸头若干，记号笔，酒精灯，火柴，试管架 实验步骤： A 培养基的制备(已提前制备好) B 周围环境中的微生物的检测，在牛肉膏蛋白胨培养基 平板上作如下实验 1 取三个平

2、板，用 100L 的取液器分别吸取 100L 的河水、豆浆、豆奶，均匀加在三个培养基上，并用无菌 玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时间约 1-2 分钟，使细菌 均匀分布)。 2 再取三个平板，三个同学分别用手指(未 洗过)在培养基上涂抹几秒钟，一个同学对应一个平板。 3 再取一个平板，其中一个同学将手用肥皂洗过后， 再在培养基上涂抹。 4 再取一个平板，打开皿盖，一个同学对着培养基咳 嗽，使口腔中的气流和飞沫落到培养基上。 5 再取一个平板，打开皿盖，在空气中放置 10min 左 右，关上皿盖。 6 将上述 9 个平板放置在 35的培养箱中培养 24h。 C 土壤中分离微生物 1 采土样，制备土

3、壤稀释液(已准备好) 2 取三个平板，每个培养基上用取液器添加 100L 的 土壤稀释液，并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次，时 间约 1-2 分钟，使细菌均匀分布)。 3 将平板依旧放在 35的培养箱中培养 24h。 D 菌落计数 培养 24h 后，取出培养平板，算出每个平板上的菌落 数量。其中，土样中的微生物含量可用以下式子计算 土壤中的细菌含量(个/g 土壤)=菌落平均数10稀释 倍数 实验结果及数据： 实验结果如附图。 开盖 10min 手指直接按压 手指直接按压手指直接按压 1 号的手指经肥皂洗后按压对着培养基咳嗽 豆奶河水 土壤溶液土壤溶液 豆浆土壤溶液 实验讨论及感想： 1 根

4、据你对周围环境中微生物存在的观察，你认为无菌 操作要注意什么？ 在进行无菌操作的时候，应该要注意始终在明火旁边 操作，既不能离得太远，也不能离得太近。因为在明火旁 边可以减少空气中的微生物进入操作器具中的概率。 2 在日常生活中如何让讲究饮食和生活卫生？ 生活中，剩菜剩饭应该存放在冰箱内或是干燥低温处， 尽量避免适宜微生物生长繁殖环境。 3 试解释夏天时煮好的饭如果放在锅中保持盖着锅盖 不动，不容易变质，而一旦盛在碗里饭就容易变质，如果 是吃剩的剩饭就更容易变质的原因。 煮好的饭由于高温，本身含有的微生物被杀死，保持 盖着锅盖不动，外界的微生物难以进入，但是一旦盛在碗 里，抑或是吃剩的剩饭，由

5、于跟空气直接接触，大量微生 物会在其表面生长繁殖，导致其变质。 4 根据实验结果，试从微生物的角度批驳“洁癖行为” 。 完全的洁癖行为是不存在的。就算东西收拾的再干净， 也有无数肉眼看不见的微生物依然停留在器具表面，无法 完全清除掉，所以， “洁癖行为”是永远无法达到的。 二固定化酵母细菌发酵啤酒实验与酸奶制作 实验目的： 1 了解固定化细胞技术的方法和意义 2 了解酵母发酵产生啤酒的过程 3 学习酸奶制作方法 4 了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的区别 实验材料： 1 无菌滴管，无菌封口膜封好的 100ml 三角瓶 2 发酵培养基：100ml8%-10%的麦芽汁装于 250ml 三角 瓶

6、中 3 浓度为 2.5%的海藻酸钠溶液 5ml，灭菌 4 浓度为 1.5%的 CaCl250ml，灭菌 5 浓度为 0.9%的无菌生理盐水，5ml 6 袋装巴氏消毒的牛奶， 7 啤酒菌种：啤酒酵母 8 酸奶菌种：市售酸奶 实验步骤： A 固定化酵母细胞发酵啤酒 1 菌体培养：将培养了 24h 的新鲜斜面菌种接种于三 角瓶中培养。 2 细胞固定化：在预热至 35的海藻酸钠溶液中加入 2ml 预热至 35的酵母培养液，混合均匀，以无菌滴管(离 液面 5cm 以上，离液面太近无法制得凝胶珠)缓慢而稳定的 滴入 CaCl2 溶液中，即可得到直径约为 3mm 左右的凝胶珠。 注意无菌操作。钙化 30 分

7、钟左右。 3 固定化细胞发酵啤 酒：在无菌玻璃棒的帮助下倒掉 CaCl2 溶液，将生理盐水 倒入制得的固定化好的酵母细胞的瓶子中，洗一次凝胶珠， 倒掉生理盐水。将 100ml 发酵培养基(麦芽汁)倒入制得的 固定化小球的瓶子中，用无菌封口膜封好瓶口。20-28静 置培养 24h。注意无菌操作。 4 放置在 4的冰箱中冷藏一段时间，品尝啤酒。 B 制作酸奶 1 取 1000ml 鲜奶搅拌煮沸消毒，加白糖 60g 搅拌溶解， 乘热分装到干净无菌的 100ml 三角瓶中，用无菌封口膜封 好瓶口。让其自然冷却(冷却中最好能摇晃三角瓶 2-3 次， 以免乳脂结皮)。用洁净的封口膜将三角瓶口盖住。冷至 4

8、0(不烫手)时，取市面上销售的未经过灭菌的原味酸奶 按 5%(体积分数)比例倒入溶解好的糖的牛奶中，摇匀。 2 或直接把是受经过巴氏消毒的“无抗牛奶”分装到 干净无菌的 100ml 三角瓶中，加入 6%(质量分数)白糖，摇 晃确保使糖分充分溶解，取市面上销售的未经过灭菌的原 味酸奶按 5%(体积分数)比例倒入溶解好糖的牛奶中，摇匀。 三角瓶可用一次性纸杯或塑料杯代替，封口膜可用白纸代 替。 3 在 42的情况下，三角瓶(纸杯或塑料杯)静置发酵 培养 6-8h(如果用纸杯盛牛奶，白纸封口，由于传热慢，需 要发酵 10-12h)。牛奶变为不流动的酸奶时，停止发酵。 4 置于 4的冰箱中 24h 以

9、上，待冷却老熟后便得到酸奶。 5 品尝酸奶。 实验附图 我制作的酸奶 实验讨论及心得 我制作的酸奶 1 谈谈固定化细胞技术的意义。 固定化技术就是将生物酶或细胞固定在一定的基质上。 与传统方法相比，该技术具有能多次使用菌体的特点，简 化了操作步骤。 2 试述纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差异。 纯种发酵对无菌操作的要求较高，因为是在成分单一 的发酵基质中，仅接入一种微生物，通过对该种微生物的 培养，得到纯度较高的单一性产物，所以对无菌操作的要 求也较高一些。 3 为何有的同学用无菌滴管把海藻酸钙与酵母菌混合 液滴加入 CaCl2 溶液时，未得到凝胶珠，而得到了不规则 形状的固体？ 可能是在

10、滴加的时候没有保证逐滴加入，使得大量的 混合液聚集在一起，形成了不规则形状的固体。 4 在制作酸奶时，为什么要使用“无抗奶”作为原 料？ “无抗奶”即不含抗生素的牛奶，在制备酸奶的时候， 如果不使用无抗奶的话，牛奶中含有的抗生素会杀死原味 酸奶中的乳酸菌，导致无法正常发酵，也就无法制成酸奶。 篇二：微生物学实验报告 XX 级制药专业 工业微生物学实验报告 姓名: 刘甜甜学号: XX304090 班级: 制药 12-2 班 指导老师：王健 日期：XX.6.11 一、实验目的 1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素 抑菌、杀菌的原理。 2、掌握物理、化学及生物的因素抑 菌、杀菌的试验方法

11、。 3、了解细菌的形态特征、染色特 点。 4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的 菌落特征。 5、掌握细菌分离划线培养的方法。 6、掌握 细菌的初步生化反应。 7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌 K-B 药敏纸片法。 二、实验内容 1 细菌 Grams stain 染色，镜检，观察记录细菌形 态和特色特征 1.1 实验原理：染色原理：G+菌与 G 菌细胞壁不同， G+菌比 G 菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，G+ 菌比 G 等电点低。 1.2 实验步骤： 1.2.1.制片：1 涂片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术 自平板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约 1cm2 大小

12、，自然干燥； 固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次， 使菌膜牢固附于玻片表面； 1.2.2 染色：初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表 面，轻微摇动，维持 3040,细流水冲洗，切勿直接冲 洗涂片区域； 媒染：取卢氏碘液 12 滴覆盖菌膜表面，轻微摇动， 维持 3040,用上法细流水冲洗； 脱色：取 95%酒 精 23 滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可, 用 上法细流水冲洗； 复染：取 1：10 稀释石炭酸复红覆 盖涂片区域，轻微摇动，用上法细流水冲洗； 吸水纸 初步吸干玻片水分，然后自然干燥； 1.2.3 镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100 倍 目镜）下。 三、分离培养

13、1 实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或 同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通 过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养 繁殖后生成个菌落。有时这 些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离 多次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表 面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。 2 实验步 骤 2.1 示教：观察普通平板、麦康凯平板、血平板、四区 分离划线平板，手机摄像。 2.2 分离划线培养： 预实验：以灭菌接种环与普通平板背面做四区分离划 线； 正式试验：1 以灭菌接种环取细菌少许，在普通平 板上划线，划线区域约占整个平板的 1/101/5,划

14、线间不能 有交叉现象；2 以灭菌接种环自第一区 23 个交叉，然后 依次分离划线，约占整个区域的 1/31/4；3 依上法进行 3、4 区分离划线；4 倒置平皿置 37温箱培养 24h，观 察记录实验结果，手机摄像。 四、细菌初步生化反应： 1 实验原理：具有的细菌，能催化过氧化氢生成水和新 生态氧，继而形成分子氧出现气泡。 2 实验步骤 2.1 色素试验：取滤纸条，两次对折，以折角小心取菌 落少许，小心展开，观察记录，手机拍照； 2.2 氧化酶试验：取上述含菌滤纸条，滴加氧化酶试 剂一滴，观察记录，手机拍照； 2.3 触酶试验：以灭菌接 种环取细菌少许，置一洁净玻片表面，另设 NS 对照，各

15、加 一滴新制的 3%H2O2, 观察记录，手机拍照； 五、细菌药敏试验： 1 实验原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测 试的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取平板中的水分溶 解后并不断先向纸片周围扩散，形成递减的梯度浓度，在 纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明 的抑菌圈。抑菌圈的大小反应测试细菌对测定药物的敏感 程度，并与该药物对测试菌的 MIC 呈负相关（抑菌圈越大， MIC 越小） 。 2 实验步骤： 2. 1 以灭菌接种环取细菌少许，与普通平板做密集划 线； 2.2 以无齿镊小心夹取定量药效纸片，按六边形贴于 培养及表面，倒置平皿置 37温箱培养 24h，观察记录实

16、验结果，手机拍照。 3 实验结果： 六实验分析与讨论 1 无菌操作：所有取菌种前都要将接种环灭菌，取菌时 培养基也不能开太大的口，取完以后应及时盖好并放好， 以防止菌种被污染。操作应当在火焰旁做。 2 冷却操作：加热灭菌接种环后，应室温下冷却，否则 会因高温杀死细菌。 。 3 接种操作时应当执笔式握接种环，轻轻触碰菌种，再 接种到有生理盐水的玻片上，太少或者太多对实验都有所 影响。 4 染色操作：边染色边轻轻晃动以让染色剂充分覆盖菌 种，冲洗时不要倾斜太大角度，不可直接对着菌落冲洗,以 防把细菌冲洗下去。 5 分离培养琼脂很软，划线时注意手腕用力，只在其表 面划线。 6 生化实验过程中细菌出现气泡说明细菌中有过氧化氢 酶。用试纸取菌种注意是否取到，否则做出来是无色的。 对照实验时注意菌种没有加生理盐水，而空白对照式生理 盐水，触酶实验时注意及时拍照。 7 药敏实验：纸片旁边出现抑菌环。贴纸片时应注意力 度不要把琼脂划破。 篇三：微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒) 微生物实验