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1、,临床微生物标本 正确采集与运送,正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！,3,基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 6.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 8.送检标本应注明来源和检验目的,4,血培养标本 采集与运送,关于血培养,怀疑有血液感染时，抽取血培养的次数应是A 1次 B 至少2次 C 4次 D 越多越好 如果血培养标本不能及时运送，应暂存何种环境A 4 B 18 C 室温 D 无所谓 败血症的血液细菌培养出现
2、阳性结果最快时间是A 100/ml,6,你认为对吗？ 为了提高病人血培养的阳性率，最好的抽血时间是：,A.发热开始时 B.寒战开始时 C.发热最高峰时 D.寒战结束时 E.预计寒战发热前,2018/10/10,Dr.HU Bijie,7,血培养的数量,研究结果 一套血培养的阳性率为65 二套血培养的阳性率为80 三套血培养的阳性率为96 CLSI(药敏试验标准）建议方针 对于每位需要血培养的患者需采取2至3套。 对于成年患者的血培养，只采单一的血培养是不允许的。因为单一血培养的结果的临床意义很难解释。 采血培养后的2至5天内，不需要重复采血培养，因为治疗后的2至5天内血液中的感染细菌不会马上消
3、失。,CLSI指南：血培养的原则和流程,血培养的采血量,对于成年患者，每套血培养瓶推荐的采血量为20至30ml 对于婴幼儿患者，采血量不超过患者总血量的1,血培养中需氧瓶与厌氧瓶的分配,对于常规的血培养，建议采取包括需氧和厌氧的一套血培养瓶 当采血量不能满足推荐的采血量时，首先应进行需氧瓶的培养,皮肤消毒与污染防治,碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要好于碘酒 碘酊和洗必太的消毒效果大致相当 消毒次序 消毒皮肤范围,标本的运送,血培养瓶在采血接种后必须马上送检 血培养瓶在采血接种后在室温中不得超过数小时 血培养瓶不得在采血接种后放入冰箱或冷冻,2018/10/10,Dr.HU Bijie,12,添
4、加剂（树脂、活性炭、抗凝剂）,和无添加剂的血培养瓶相比，拥有添加剂的血培养瓶的阳性率更高 含有添加剂的血培养瓶的阳性率更高，但同时污染菌的生长也会更迅速,2018/10/10,Dr.HU Bijie,13,常见问题,厌氧菌培养有价值吗？ 真菌培养需要另开单子吗？ 分枝杆菌培养有专门的培养瓶吗？ 骨髓培养能增加阳性率吗？ 开始治疗后，间隔多少长时间复查？,真菌血培养,有三种自动化的血培养系统可以进行真菌血培养 真菌血培养最好在需氧瓶进行 能够中和灭活抗生素的血培养瓶可以提高真菌的检出率,婴幼儿的血培养,不必像成年患者一样采取2至3套血培养瓶 一些研究建议只采取一瓶需氧瓶进行培养 对于婴幼儿患者，
5、采血量不超过患者总血量的1,特别注意：感染性心内膜炎,抽取血培养的时机 ABE：必须在根据经验使用抗生素前30分钟之内抽取血培养 SBE：(1)在30min-1h之内连续抽取数套血培养;(2)皮肤消毒尤为重要，因为其主要的病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性的葡萄球菌。必须取自外周静脉而非留置的静脉装置,否则会判有很高的污染风险从而导致错误的心内膜炎结论； 抽取血培养的数量 最佳的血培养数量不确定，但只抽单瓶血培养是不够的 多套血培养可以帮助区别血培养假阳性（如皮肤污染等） 建议：起始采集3套血培养，如24小时内仍报告阴性，则继续采集2套血培养，全部培养为5套。,2018/10/10,Dr.HU B
6、ijie,17,痰培养标本 采集与运送,2018/10/10,18,病原体种类繁多而复杂 使下呼吸道感染病原诊断成为难题,细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌） 真菌（包括肺孢子菌） 病毒 支原体、衣原体与立克次体 原虫 寄生虫,2018/10/10,Dr.HU Bijie,19,我国痰细菌培养现状,标本送检率低 培养菌检出率极低 结果重复性差 报告速度慢 感染菌与污染菌不易区分 药敏结果与治疗反应存在差距,2018/10/10,Dr.HU Bijie,20,关于咳痰标本,在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后12h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本
7、 ; 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导; 无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰； 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰； 对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检,2018/10/10,Dr.HU Bijie,21,标本采集方法 医师或护士直视下采集标本 病人先漱口，去除表面的菌群 教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 临床上约半数咳痰标本不合格！,咳痰标本,2018/10/10,Dr.HU Bijie,22,咳痰标
8、本不合格，你退检吗？,如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于10个，应不做或仅在特殊要求时做培养。 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。 复旦大学中山医院的做法 痰液外观：脓性，粘脓，粘液，水样 镜检：WBC？，SEC？ 痰标本质量评价：合格，不理想（建议重送）,2018/10/10,Dr.HU Bijie,23,哪些实验室因素，影响检验结果,痰标本的洗涤与匀化 质量评估（细胞学筛选） 接种平板：质量，血、巧克力、麦康凯，选择性 培养环境：CO2 培养时间：24h，48h 菌落观察水平 结果报告形式：所有菌种/群（?），半定量,2018/10/10,Dr.HU Bijie,24
9、,几种下呼吸道直接采集的标本,经气管穿刺吸引transtracheal aspiration,TTA 经胸壁针刺吸引transthoracic needle aspiration, TNA 经支气管镜采样 支气管肺泡灌洗bronchoalveolar lavage, BAL 经支气管镜直接吸引 防污染样本毛刷protective specimen brush, PSB 开胸肺活检open-lung biopsy，OLB 经人工气道吸引分泌物 endotracheal aspirates，ETA 操作：质量评价与退检，洗涤与消化，(半)定量与增菌培养,2018/10/10,Dr.HU Bijie
10、,25,经人工气道采样,导管吸痰（ETA） 防污染毛刷(PSB) 防污染灌洗(PBAL),2018/10/10,Dr.HU Bijie,26,常见问题,下呼吸道吸出的痰可以做增菌培养吗？ 哪些标本可以做厌氧菌培养？ 常规涂片检查能检出什么？ 痰真菌培养应该几天出报告？ 结核快速培养需要另开单子吗？,2018/10/10,Dr.HU Bijie,27,尿培养标本 采集与运送,2018/10/10,Dr.HU Bijie,28,临床案例,某男，90岁，脑梗后，因咳嗽、发热入院，痰粘咳不出，胸片示两肺纹理增加，尿常规见WBC150 。多种抗生素治疗无效，改用头孢他啶和环丙沙星也仍低热。,如何诊断和治
11、疗？,尿培养：肺克10万/ml，ESBL,2018/10/10,Dr.HU Bijie,29,你知道吗？,尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。 诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。 多次收集或24小时尿不能用作培养。 申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。 室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏
12、，但也不能超过24小时。,2018/10/10,30,尿液,中段尿 导尿管导尿 经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液 送检标本以晨起第一次尿液为佳 不能立即送检者，可暂存4冰箱,2018/10/10,Dr.HU Bijie,31,清洁中段尿液,尽量取早晨第一次尿液 弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿,2018/10/10,Dr.HU Bijie,32,导尿管尿液,集尿袋内的尿液不能用作培养； 导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。 除非是流行病学调查，长期留置导管病人常规尿培养没有临床意义，大量病原菌常可在这类病人中检出。 留置导管尿液标本
13、常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。 采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中。 标记 申请单上注明尿液采自留置导尿管。 运送 30分钟内不能送往实验室，将标本冷藏。实验室没有接收人员时可将标本置于实验室冰箱里。,2018/10/10,Dr.HU Bijie,33,粪便标本 采集与运送,2018/10/10,Dr.HU Bijie,34,你会选择粪便检验项目吗？,粪常规培养：沙门菌，志贺菌 粪特殊培养：霍乱与副霍乱菌，弧菌 粪真菌培养：价值？ 粪艰难梭菌培养：不常规进行,2018/10/10,Dr.HU Bijie,35,粪便,用棉拭挑粪便插入CaryBlair运送培养或pH7.0的磷酸盐甘油 不易获取粪便者或婴幼儿，可用肛拭(拭子前端先用无菌甘油水湿润),2018/10/10,Dr.HU Bijie,36,中国感染病的有效诊治和防控：任重道远！,正确的感染病原学诊断 合理使用抗菌药物 提高感染性疾病预后，降低医疗费用 降低细菌耐药 预防感染性疾病传播,
