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1、实验五 蟾蜍坐骨神经腓肠肌、坐骨神经干标本制作 刺激强度和刺激频率与肌肉收缩的关系 神经干的动作电位和兴奋传导速度的测定,一、实验目的 1、掌握蟾蜍坐骨神经一腓肠肌、神经干标本的制作方法。 2、观察刺激强度与肌肉收缩幅度之间、刺激频率与肌肉收缩形式之间的关系。 3、观察坐骨神经动作电位的基本波形，学习测定神经兴奋性传导速度的方法。 4、学会生物机能实验系统的使用方法。,二、器械和材料蟾蜍或蛙、蛙手术器械一套（粗剪刀、直剪刀，大、小镊子）、铁架台、探针、玻璃分针、小玻璃板和蛙板、培养皿、棉线、纱布、任氏液、张力换能器、神经屏蔽盒、生物机能实验系统,三、实验原理 蟾蜍神经肌肉标本是研究神经肌肉生理
2、最常用的对象，因其离体后所需的生存条件比较简单，易于控制和掌握。如在常温下只需用任氏液湿润，就可较长时间地保持它的生理功能，所以用其来观察兴奋性、兴奋的过程以及一些剌激的规律和骨骼肌收缩的特点等是颇为理想的。,四、实验方法刺激强度和与肌肉收缩的关系 阈刺激、阈强度；最适刺激、最适刺激强度；刺激频率和与肌肉收缩的关系 单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩；,（一）破坏脑和脊髓 1、用左手握蛙，并用食指按压其头部前端，拇指按压背部，使头前俯。 2、右手持探针由头前端沿中线向尾方划触，触及凹陷处即枕骨大孔处。 3、将探针由凹陷处垂直刺入，刺破皮肤即入枕骨大孔。这时将探针转向头方，向前探入颅腔，然后向
3、各方搅动探针，以捣毁脑组织。 4、将探针退出，并转向尾方，与脊柱平行刺入脊管，以破坏脊髓，这时，动物四肢肌肉的紧张性完全消失。取出探针后，用一小干棉球堵住针孔止血。,神经干的动作电位和兴奋传导速度的测定 （一）坐骨神经干标本制备 1、按上述方法分离另一侧后肢，打开腹腔掏出内脏，找到和脊柱相连的坐骨神经。并用玻璃分针分离坐骨神经至腘窝处。 2、将胫神经和腓总神经分离至踝部，结扎足端，游离神经干即制成坐骨神经标本。 3、将标本放入任氏液中5分钟左右，屏蔽盒上的所有电极用浸有任氏液的棉球擦拭，神经的中枢端接触刺激电极，外周端接触引导电极，用浸有蒸馏水滤纸片放在盒内，防止神经干燥。,（二）连实验系统装
4、置 1、信号输入线（黑、白、红）接CH1（并按顺序接神经屏障盒的引导电极） 注意：测神经传导速度时还要再加入一组信号输入线接CH2，黑线和上黑线夹在一起，后按白、红顺序接引导电极。 2、刺激线接右下（接神经屏蔽盒的刺激电极红正、黑负） 3、在神经屏蔽盒上看第46引导电极之间神经干的距离，输入就可以测速度。,二、注意事项 1、在剥制标本时，不能用金属器械触碰神经干。 2、分离神经时，一定要把周围的其它的组织剥离干净。 3、标本制备过程中，要随时用任氏液湿润神经和肌肉，防止干燥；不能使动物的皮肤分泌物和血液等沾污神经和肌肉，也不能用水冲洗，以免影响组织的机能。 4、每次刺激后，肌肉需休息0.51分钟。,作业1、制作坐骨神经腓肠肌、神经干标本。2、分别用生物生理机能仪器测出肌肉单收缩、完全强直收缩、不完全强直收缩的图象并分析。3、何为阈下刺激、阈刺激、阈上刺激、最适刺激并找出阈刺激、最适刺激强度。4、测出坐骨神经的传导速度是多少。,
