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1、猪腹泻性疾病及其控制,蔡旭旺 农业微生物学国家重点实验室204电 话：18602753964 QQ:2532609832E-mail： ,1. 概述,猪的腹泻是集约化养猪生产条件下的一种典型的多因素性疾病，给养猪业造成重大经济损失。 肠炎与腹泻是引起仔猪死亡的重要原因之一，若猪场管理不当，肠炎与腹泻常成为一个猪场长期难以解决的问题。 猪的腹泻可以由传染性和非传染性因子引起。,1.1 引起肠炎与腹泻的主要病因,细菌及其毒素,病毒,寄生虫,真菌,变态反应,营养,无机物中毒,普通病,肠炎 腹泻,1.2 引起腹泻的主要传染性因子,猪瘟病毒伪狂犬病毒 病毒性病原 传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒猪轮状病
2、毒猪圆环病毒致病性大肠杆菌沙门氏杆菌 细菌性病原 C型魏氏梭菌 猪痢疾短螺旋体其它（弯曲菌、胞内劳森菌）,球虫 寄生虫性病原 隐孢子虫蠕虫（结肠小袋纤毛虫等）黄曲霉毒素 真菌及其毒素 镰刀菌毒素其它,1.3 引起腹泻的生物性病原可分,原发性腹泻病原：只限制在肠道局部繁殖的病原，是引起肠炎和腹泻的直接病因。 继发性腹泻病原：是全身循环经过性传染病的病原，在这些病原中，腹泻是作为被病原侵害的组织器官在肠道出现的一种结果。,1.4 几种腹泻疾病的发病年龄区间,24小时 5天 3周 5周 10周 20周 30周 成年类圆线虫大肠杆菌严重症状 TGE 轻微症状严重症状 PEG 轻微症状梭菌性肠炎轮状病毒
3、肠炎球虫沙门氏菌肠炎猪痢疾,2. 猪传染性胃肠炎 （Transmissible gastraenteritis of pigs，TGE）,猪传染性胃肠炎是一种急性胃肠道传染病，以呕吐，严重腹泻和脱水为特征。 各种年龄猪都可发病，10日龄以内仔猪病死率很高，可达100%，5周龄以上猪的死亡率很低，成年猪几乎没有死亡。 病理变化主要是肠道的卡他性炎症和小肠黏膜微绒毛萎缩。,2.1 概述,猪传染性胃肠炎病毒，属于冠状病毒科冠状病毒属，基因组为单股正链RNA。 有囊膜，形态多样，呈圆形、椭圆型和多边形，直径约为80120nm，表面有一层棒状纤突。 只有一个血清型，病毒能在猪肾、猪甲状腺和唾液腺等细胞中
4、繁殖继代，引起细胞病变的能力因病毒株而异。,2.2 病原,冠状病毒粒子结构示意图。,病毒存在于病猪各器官、体液和排泄物中，以空肠、十二指肠和肠系膜淋巴结含毒量最高，在发病早期呼吸系统和肾脏的含毒量也相当高。 病毒不耐热，在4以上很不稳定，加热5645分钟，6510分钟死亡。但在4以下的低温可以长时间的保持其感染性。 肠道内的病毒在20可保存6个月，在18保存18个月仅下降1个对数滴度。,对光线敏感，在阳光下曝晒6小时即被灭活。紫外线能使病毒迅速灭活，但在阴暗处历时7天仍保持感染力。 病毒在pH48稳定，pH2.5时则被灭活。 病毒对乙醚，氯仿敏感，所有对囊膜病毒有效的消毒剂对其均有效。0.5%
5、石炭酸在37处理30分钟可杀死病毒。,冠状病毒复制示意图,冠状病毒进入宿主细胞后，首先直接以病毒基因组RNA为模板翻译出RNA聚合酶，然后利用该酶完成负链亚基因组RNA的转录、各结构蛋白mRNA的合成，以及基因组RNA的复制。结构蛋白和基因组RNA复制完成后，在宿主细胞内质网装配成新的病毒颗粒，并通过高尔基体分泌到细胞外，完成其生命周期。,3. 流行病学,传染源： 主要是病猪和康复后带毒猪。 病毒主要存在于猪的小肠黏膜（空肠含毒量最高可达106PID猪感染剂量）、肠内容物、肠系膜淋巴结和扁桃体中。 可随粪便排毒达8周之久，最长的达104天。,传播途径： 主要通过食入被污染的饲料经消化道传染，也
6、可通过空气经呼吸道传染。 密闭猪舍，湿度大，猪只集中的猪场更易传播。,易感动物： 各种年龄的猪均有易感性，但10日龄以内仔猪的发病率和死亡率较高。 断奶猪、肥育猪和成年猪发病的症状轻微，大多数能自然康复。 其它动物无易感性。,流行特点： 多发生在冬春寒冷季节，即12月至4月之间。 一旦发生，在猪群里迅速传播，数日内可使猪群大部分猪受感染。 新疫区呈流行性，老疫区则呈地方流行性或周期性流行，发病率降低，症状较轻。,4. 临床症状,潜伏期随猪的年龄而有差异，仔猪1224小时，大猪24日。 突然发病，传播迅速。仔猪先突然发生呕吐，接着发生急剧的水样腹泻，粪便为黄绿色或灰色，有时呈白色，并含凝乳块。
7、部分病猪体温先短期升高，发生腹泻后下降。,病猪迅速脱水，很快消瘦，严重口渴，食饮减退或废绝。一般经27天死亡，10日龄以内的仔猪有较高的致死率，随着日龄的增长致死率降低，病愈仔猪生长发育较缓慢。 架子猪，肥猪和成年猪的症状较轻，发生一至数日的减食，腹泻、体重迅速减轻，有时出现呕吐，哺乳母猪泌乳减少或停止。一般37日恢复，极少发生死亡。,病猪消瘦、脱水。,病猪呕吐和腹泻。,猪传染性胃肠炎：架子猪呈水样腹泻。,猪传染性胃肠炎：架子猪呈水样腹泻。,呕吐物。 腹泻粪便。,5. 病理变化,主要病变在胃和小肠。 仔猪胃内充满凝乳块，胃底部黏膜轻度充血，有时在黏膜下有出血斑。 小肠内充满黄绿色或灰白色液状物
8、，含有泡沫和未消化的小乳块，小肠壁变薄，弹性降低，以致肠管扩张，呈半透明状。,肠系膜血管扩张，淋巴结肿胀，肠系膜淋巴管内见不到乳糜。 将空肠纵向剪开，用生理盐水将肠内容物冲掉，在玻璃平皿内铺平，加入少量生理盐水，在低倍显微镜下或放大镜下观察，可见到空肠绒毛显著缩短。 组织学检查，黏膜上皮细胞变性，脱落。肾常发生变性，并有白色尿酸盐沉积。,胃浆膜出血。,胃底黏膜充血、点状或斑状出血。,小肠扩张，肠壁极薄。,小肠弥漫性充血、出血和变薄，肠管扩张。,肠壁极薄，由于细菌感染致黏膜严重出血。,左为病猪肠绒毛变平，右为正常。,空肠与回肠绒毛显著萎缩。,萎缩绒毛 正常绒毛,6. 诊断,病原学检查 病毒分离：
9、取病猪的肛拭、粪、肠内容物或空肠、回肠段为病料，经处理后接种猪肾细胞培养，盲传2代以上分离病毒，用中和试验或免疫电镜作鉴定。 RT-PCR。,血清学检查 免疫荧光试验：取急性期病猪的空肠制成冰冻切片，荧光抗体染色后在荧光显微镜下观察，如胞浆内发现亮绿色荧光即可确诊。 下痢初期荧光抗原最多，至感染后7天则减少，因此采样时间必须适当，若同时配合组织学检查，其可靠性更大。,酶联免疫吸附试验（ELISA）、微量中和试验、间接血凝试验：也是本病常用的血清学诊断方法。双份血清的中和试验，康复血清效价4倍于病初血清为阳性。,鉴别诊断本病应与猪流行性腹泻、轮状病毒腹泻、猪大肠杆菌病和猪痢疾等相区别。,7. 防
10、制,治疗： 尚无特效治疗方法，患病期间大量补充等渗葡萄糖氯化钠溶液，供给大量清洁饮水和易消化的饲料，可使较大的病猪加速恢复，减少死亡。 口服四环素、磺胺、呋喃西林、黄连素、高锰酸钾等可防止继发感染，减轻症状。,预防： 保健措施：通过血清学调查对猪场进行监测，猪的交易必须控制在TGE血清学阴性的猪场。 对后备种猪的买卖必须进行TGE的检查。对饲养的仔猪需进行抽样检查，每群可抽样510头。 所有来自其它地区新购进的猪必须对TGE进行隔离检查。如在育种群和繁殖群出现腹泻时要禁止种畜的出售。,免疫措施： 免疫机理主要是细胞免疫和黏膜免疫，肌肉接种无效，口、鼻内接种可行。 经胃肠外接种灭活疫苗和弱毒苗，
11、仅能在乳汁中产生少量IgA分泌型抗体。 通过母源抗体的被动传递来保护仔猪免受TGEV的侵袭。,给妊娠母猪产前2040天口服强毒能够产生良好乳汁免疫。 将发病猪的粪便直接接种母猪或其它猪，让其集中发病，集中处理，缩短发病时间，提高母猪初乳中的抗体水平，被动保护仔猪。 有散布强毒，使本病常在的危险，一定要在猪场没有其它传染病发生的情况下，严格控制下，谨慎进行。,感染TGE病毒的猪对其它疾病的抵抗力或免疫机能明显改变。 在出现TGE症状之前以及已出现TGE症状时，给猪注射猪瘟弱毒疫苗，常不能产生对猪瘟的有效免疫力。,8. 猪流行性腹泻 （Porcine epidemic diarrhea，PED）,
12、猪流行性腹泻是一种急性接触性肠道传染病，特征为呕吐、腹泻和脱水，各种年龄猪均易感。 本病的流行特点、临诊症状和病理变化都与猪传染性胃肠炎十分相似，但哺乳仔猪死亡率较低，在猪群中的传播速度相对缓慢。 20世纪80年代初以来，中国陆续有发病的报道，并分离到病毒。,8.1 概述,8.2 病原,冠状病毒科冠状病毒属的成员，呈球形，有囊膜，单股正链线性RNA。 可在PK和ST细胞中增殖，并产生明显的CPE，不能凝集人、兔、猪、鼠、犬、马、羊、牛的红细胞。 对外界抵抗力弱，对乙醚、氯仿敏感，一般消毒药物都可将其杀灭。,8.3 流行病学,本病毒可在猪群中持续存在，各种年龄的猪都易感。哺乳仔猪、架子猪和育肥猪
13、的发病率可达100%，母猪的发病率则为1590%。 传播途径是消化道。病毒多经发病猪的粪便排出，以运输车辆、饲养员的鞋子或其它带毒动物作传播媒介。 多发生于寒冷季节，呈地方性流行。,8.4 临床症状,主要表现为水样腹泻，或者伴随呕吐。 1周内新生仔猪常于腹泻后24天内因脱水而死亡，病死率可达50%。 断奶猪和肥育猪以及母猪常呈现沉郁和厌食临诊症状，持续腹泻47天，逐渐恢复正常。 成年猪仅表现沉郁、厌食、呕吐等症状，若没有继发其它疾病和护理得当，很少发生死亡。,8.5 病理变化,小肠膨胀，充满淡黄色液体，肠壁变薄，个别小肠黏膜有出血点。 小肠绒毛变短，重症者绒毛萎缩，甚至消失。 肠系膜淋巴结水肿
14、。 胃充满胆汁样的黄色液体。,病猪严重脱水，小肠膨胀，肠壁变薄。,断奶仔猪严重肠炎和肠道内黄色内容物。,萎缩绒毛。 正常绒毛。,小肠绒毛萎缩（HE染色）。,8.6 诊断,发生于寒冷季节。 直接取病猪的粪便检查PEDV粒子或接种胎猪肠组织原代细胞或Vero细胞培养分离病毒。 在仔猪可用荧光抗体与病猪小肠冰冻切片染色作出本病的确诊。 RT-PCR。,PED X40,PED X 100,PED X 400,荧光抗体检测猪流行性腹泻病毒（绿色）。,1 2 3 M,525bp,400bp,600bp,Fig. RT-PCR products of PED viral RNA M: Marker 1: s
15、ample 2: negative 3: Positive（PED）,RT-PCR检测猪流行性腹泻病毒。,免疫组织化学染色方法标记小肠细胞内的 猪流行性腹泻病毒（棕色）。,猪流行性腹泻在仔猪、架子猪和育肥猪的发病率都很高，哺乳仔猪发病死亡率最高，而猪传染性胃肠炎在架子猪、育肥猪发病率较低。 猪流行性腹泻多为水样腹泻，或在腹泻过程中有呕吐，多发生于食后；而猪传染性胃肠炎是先呕吐，后腹泻。 猪流行性腹泻病死率较猪传染性胃肠炎低，在猪群中传播亦较慢。,鉴别诊断,8.7 防制,目前尚无特效治疗药物，对症治疗可以减轻脱水、酸中毒和防止并发感染。 可对怀孕母猪在分娩前2周以病猪的粪便或小肠内容物进行人工感染，具体方法与猪传染性胃肠炎所用的类似。 免疫TGE-PED二联灭活苗或弱毒苗。,9. 轮状病毒感染 （Rotavirus infection）,由轮状病毒引起的儿童（6个月2岁）及幼龄畜禽（如8周龄以内猪）的急性胃肠道传染病。 临床上以腹泻和脱水为特征。 成年人和成年动物一般呈隐性感染。,
