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1、二、回归热螺旋体 回归热螺旋体是以节肢动物为媒介引起人类回归热的病原体。在疏螺旋体中能引起该病的螺旋体有两种：一种是以体虱为传播媒介引起流行性回归热的回归热疏螺旋体 ，另一种是以软蜱为传播媒介引起地方性回归热的赫姆斯疏螺旋体,血液涂片 200,第三节 钩端螺旋体属钩端螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物 钩端螺旋体种类很多 ，可分为两个种： 问号钩端螺旋体 能引起人类和动物钩端螺旋体病该病呈世界性分布双曲钩端螺旋体(非致病性 (即腐生性) ,一、生物学性状（一） 形态与染色 螺旋盘绕细密、规则、一端或两端弯曲呈钩状，在暗视野显微镜下观察形似细小闪亮的珍珠串，运动活泼
2、。常使菌体呈C、S或8字形。G，但着色较难。常用Fontana镀银染色法，钩端螺旋体呈棕褐色 ,（二）. 培养和生化反应 钩端螺旋体是较易人工培养的致病性螺旋体。需氧，营养要求不高。常用Korthof培养基 (含10%兔血清、蛋白胨、磷酸缓冲液、pH7.4)培养经2530培养1-2w后，在液体培养基中呈半透明云雾状生长，在半固体培养基中形成扁平、透明、圆形菌落。用复方明胶液体培养基培养5-7d可达生长高峰,第二期 全身皮肤粘膜出现梅毒疹、淋巴结肿大，亦可侵犯骨、眼及中枢神经系统。在梅毒疹和淋巴结中含有大量梅毒螺旋体。由于抗体产生，即使不治疗症状亦可在3w3个月后消退。从硬性下疳至梅毒疹消失后一
3、年之内称为早期梅毒，传染性强，但损伤性较小。,（三）.抵抗力 对热和酸抵抗力弱，601min即死亡，4冰箱中可存活1-2w。 但在中性的湿土或水中能存活数月，这在钩端螺旋体的传播上有重要意义,（四）.分类 致病性钩端螺旋体目前可按抗原构造和按DNA同源性两种方法进行分类 1.按抗原构造分类 根据致病性钩端螺旋体属特异抗原、群特异抗原、型特异抗原性不同分类 目前全世界已发现问号钩端螺旋体有25个血清群、273个血清型。我国常见的问号钩端螺旋体菌株有19个血清群、74个血清型 2.按DNA同源性分类 通过DNA杂交技术将主要的致病性分为6组,二、致病性与免疫性（一）.传染方式 其中以鼠类和猪为主要
4、传染源和储存宿主。动物感染后多不发病，但钩端螺旋体在肾脏长期繁殖，并随尿不断排出，污染环境。人类接触这些被污染的环境，螺旋体就可通过破损的皮肤或粘膜侵入机体而感染。孕妇感染后，亦可通过胎盘感染胎儿导致流产。偶有经哺乳传给婴儿者或经吸血昆虫传播而发病者 ,（ (二）钩端螺旋体致病物质溶血素 类似磷脂酶作用，能破坏红细 胞膜而溶血 内毒素样物质 类似革兰阴性菌的内毒素只 是活性较低细胞毒因子 将之注入小白鼠体内，可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡,（三）所致疾病钩端螺旋体自皮肤粘膜眼结膜等侵入，在局部迅速繁殖，并经淋巴进入血液或直接进入血流，引起钩端螺旋体血症患者出现高热、乏力、头痛、腓肠肌痛、眼结膜
5、充血、淋巴结肿大等症状。患者有全身毛血细管内皮细胞损伤并伴有微循环障碍，以及肝、肾功能损害，严重病例可出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等,由于所感染钩端螺旋体型别、毒力、数量及个体免疫状态不同，其病程的发展和临床症状的轻重有很大差异，表现为各种临床类型 。临床上常见的为：黄疸出血型 主要表现为败血症、出血、黄疸与肝肾损害等症状，又称外尔病 ；流感伤寒型 早期有败血症，症状如流感或伤寒，但较轻，内脏损害较少，部分病人在退热后，可发生钩端螺旋体性虹膜睫状体炎、脉络膜炎或全血管内膜炎;也可有脑底多发性栓塞性动脉炎。其发病机制可能是超敏反应所致,（四）免疫性 病后或隐性感染后可获得对
6、同型钩端螺旋体的持久免疫力，但对异型钩端螺旋体仅有部分或无抵抗力,故有再感染的可能性。病后1-2w随着特异性抗体的增加，调理作用的发挥，吞噬功能的增强，血流中的钩端螺旋体迅速被清除,但肾脏内的钩端螺旋体不易被清除,因此尿中排菌可达数周数、月甚至数年而成为带菌者,（五）.微生物学检查法钩端螺旋体病的临床表现多种多样，易与其他传染病混淆，因此微生物学检查对钩端螺旋体病的确诊甚为重要 1.病原体检测 发病10d内取血，1w后取尿，有脑膜刺激症状者需取脑脊液(CSF)进行检查 （1）直接镜检 将标本用差速离心集菌后作暗视野检查，或用Fontana镀银法染色镜检。还可用直接IF法或免疫酶染色法检查,（2
7、）分离培养与鉴定 将检查标本接种于Korthof培养基中，25-30培养2-4w (或用复方明胶培养基培养5-7d)。如有生长，培养液变混浊，用暗视野显微镜检查有无钩端螺旋体存在。如有，再用血清学方法鉴定其群和型,（3）动物实验 是分离钩端螺旋体的一种敏感方法。常用的实验动物有豚鼠及黄地鼠。将标本注入其腹腔，一般3-5d后。取心血及腹腔液镜检和培养。死后剖检可见皮下和肺部有大小不等的血斑，在脏器中可查见有大量钩端螺旋体 （4）其他检测法 用同位素或生物素标记DNA探针检查较培养法快速、敏感。此外，限制性内切酶指纹图谱可用于钩端螺旋体菌株鉴定、分型以及抗原变异的研究 ,2. 血清学诊断 应采取病
8、程早、晚双份血清。一般在病初及发病第3-4w各采一次。有脑膜刺激症状者也可采CSF检测,（六）防治原则 钩端螺旋体病的预防措施主要是搞好防鼠、灭鼠工作，加强对带菌家畜的管理，保护水资源以及对易感人群进行多价死疫菌接种。接种的疫苗必须包括当地流行的钩端螺旋体主要血清型。国内试用钩端螺旋体外膜亚单位菌苗，有一定效果。今后可望生产基因工程高效全价疫苗。治疗首选青霉素，亦可用庆大霉素、强力霉素等,第三篇 真 菌 学第21章 真菌概述 真菌 (fungus) 是一大类具有典型细胞核的真核细胞型微生物。细胞核高度分化，有核膜和核仁，胞浆内有完整的细胞壁。细胞器由几丁质或纤维素组成。但是真菌不含叶绿素，不分
9、化根、茎、叶。除少数为单细胞外，大部分真菌为多细胞结构 ,真菌在自然界分布广泛、且种类繁多、数量较大，目前已有一万个属、十二万种之多。其中绝大多数有益于人类，少数可引起人类及动、植物疾病。如可引起人类感染性、中毒性及超敏反应性疾病近年来，真菌病发病率有明显上升趋势，尤其条件致病性真菌引起的感染，已引起医学界的高度重视,第一节 生物学性状 一、形态与结构 真菌有单细胞和多细胞两类。单细胞真菌有称酵母菌，多细胞真菌又称霉菌，如条件发生改变，两种形态发生互变，称为二相性。,(一) 单细胞真菌 单细胞真菌呈圆形或椭圆形，如酵母型和类酵母型真菌。酵母型真菌不产生菌丝，由母细胞以芽生方式繁殖，其菌落与细菌
10、的菌落相似。类酵母型真菌也是芽生方式繁殖，其延长的芽体可伸进培养基内，称假菌丝,多细胞真菌 基本上都是由菌丝和孢子两大部分组成气中(生)菌丝 菌丝 营养菌丝生殖菌丝,1 菌丝 孢子出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状，称为菌丝。菌丝可长出许多分枝，交织成团，称菌丝体菌丝分为有隔菌丝与无隔菌丝。绝大部分的病原性丝状真菌为有隔菌丝。伸入到培养基内者称为营养菌丝； 露出于培养基表面的菌丝称为气中菌丝；部分气中菌丝可产生具有不同形状、大小和颜色的孢子，称为生殖菌丝。显微镜下菌丝的不同形态可作为识别的依据 ,不同种类的真菌有不同形态的菌丝，故菌丝的形态有助于真菌的鉴别,2.孢子,孢子是真菌的生殖结构，是
11、由生殖菌丝产生的。大多数真菌是通过各种有性或无性的孢子繁殖的。无性孢子又分：分生孢、子、叶状孢子和孢子囊孢子。孢子也是真菌鉴定和分类的主要依据 ,二 真菌的培养特性真菌的营养要求不高，常用沙保弱培养基培养。真菌在各种不同培养基中虽皆能生长，但菌落及菌体形态却有很大差别。为了统一标准，鉴定时以沙保弱培养基上生长的真菌形态为准。大多数病原性真菌生长缓慢，培养1-4w才出现典型菌落，培养真菌的温度为22-28，但某些深部感染的真菌其最适生长温度为37。最适酸碱度为pH4.0-6.0,真菌菌丝和孢子囊孢子,在沙保弱培养基上，不同种的真菌可形成以下种类型的菌落：1.酵母型菌落 菌落圆形、柔软、光滑、湿润
12、。隐球菌菌落即属此型。有部分单细胞真菌出芽繁殖后，其牙管延长不与母体分离，形成假菌丝，其延长的芽体可伸进培养基内，称为类酵母型菌落。白色念珠菌菌落即属此型2.丝状型菌落 菌落系由多细胞菌丝体所组成，由于菌丝一部分向空中生长，并形成孢子，从而使菌落呈絮状。见于大多数丝状真菌或霉菌的菌落,三 抵抗力 真菌对热的抵抗力不强。孢子不同于细菌芽胞，一般60经1h即被杀灭。对干燥、日光、紫外线及多种化学药物的耐受性较强。对1%-3%石碳酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10%甲醛液则比较敏感。用甲醛液熏蒸被真菌污染的物品，可达到消毒的目的。对常用的抗细菌的抗生素不敏感，而对抗真菌药敏感,第二节 致病性与免疫
13、性 一、致 病 性 (一) 真菌性感染 自然界存在的真菌种类很多，目前发现对人有致病性的真菌和条件致病性真菌已超过百种。其中，同一种疾病可以由不同种类真菌引起；一种真菌也可以引起不同类型的疾病。由真菌引起感染并表现临床症状者称为真菌病。引起真菌病的真菌，有的属于病原性真菌；有的属于条件致病性真菌,1 致病性真菌感染主要是外源性真菌感染。浅部真菌如皮肤癣菌有嗜角质性，并能分泌角蛋白酶水解角蛋白。在局部大量繁殖后，通过机械刺激和代谢产物的作用，引起局部的炎症和病变深部真菌感染后不被杀死，能在吞噬细胞中生长、繁殖，引起慢性肉芽肿或组织溃疡坏死,2 条件致病性真菌感染 主要由一些内源性真菌感染，如假丝
14、酵母菌、曲霉、毛霉。这些真菌致病性不强，多系各种诱因使机体防御机能显著低下时才能发生。例如，肿瘤、糖尿病、免疫缺陷、长期大量使用光谱抗生素、皮质激素放疗或应用导管、手术等过程中易继发感染。例如导管、插管入口为真菌入侵提供门户，真菌粘附其上，并不断增殖，从而侵入血液，并播散至全身,(二) 真菌性超敏反应1 .按性质可分为：*感染性超敏反应 在病原性真菌感染的基础上发生的超敏反应，属型超敏反应 *接触性超敏反应 即吸入或食入真菌孢子或菌丝而引起的超敏反应，分别属于-型超敏反应,2.部位分为：*皮肤超敏反应 主要表现有过敏性皮炎、湿疹、荨麻疹、瘙痒症等 *呼吸道超敏反应 最主要的是支气管哮喘以及过敏
15、性鼻炎。农民肺 是由于吸入含真菌孢子的霉草尘而引起的，以呼吸困难、咳嗽、发热、不适、紫绀等为特征的一种综合病症*消化道超敏反应 与真菌有一定关系，多由于食物中混入真菌所致,(三) 真菌毒素中毒 真菌毒素是由生长在农作物、食物或饲料上的真菌在其代谢过程中产生的。人类则因食入含有真菌的食物而引起急、慢性中毒。真菌毒素中毒极易引起肝、肾、神经系统功能障碍以及造血机能损伤。几年前，发生在河北及河南两者的霉甘蔗中毒即是由节菱孢菌等引起，毒素作用于脑，引起抽搐、昏迷、死亡率达20% ,另外，有些真菌的毒素与致癌有关。已证明黄曲霉所产生的黄曲霉毒素有致癌作用。还有一些曲霉也可以产生类似黄曲霉毒素的致癌物质，
16、如黑曲霉、红曲霉、棒状曲霉、烟曲霉、棕曲霉、文氏曲霉以及杂色曲霉等,二、免 疫 性真菌在自然界分布广泛，但真菌病的发病率较低，说明人体对真菌有较高的非特异性免疫力。在感染过程中，也可产生特异性细胞免疫和体液免疫。但一般说来，免疫力不强,(一)天然免疫 构成机体天然抗真菌免疫因素主要有： 1.机体的屏障作用和正常菌群的拮抗作用 健康的皮肤粘膜对皮肤癣菌具有一定的屏障作用。皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸有杀真菌作用。例如，学龄前儿童皮脂腺发育不够完善，头皮分泌的不饱和脂肪酸较成人少，因而儿童易感染头癣；成人的趾间和足底无皮脂腺，也是易发生足癣的原因之一,白色念珠菌是口腔、阴道、肠道的正常菌群成员。正常情况下与其他肠道菌构成拮抗关系。如大肠埃希菌类能产生细菌素，可抑制其大量繁殖。但长期应用广谱抗生素破坏菌群间的拮抗关系，则可引起继发性白色念珠菌感 内分泌失调也是促使某种真菌感染的一种因素。铁浓度过高有助于细菌和真菌的感染,
