《实验中医学》62-1形态学方法及其在中医研究中的应用-解剖技术

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1、1,第二节 形态学方法 及其在中医研究中的应用,2,本节的教学目的和要求:1掌握形态学实验研究方法的特点和优势。2掌握依据实验研究的不同目的,选择合适的形态学实验技术和综合多种技术。3了解形态学的主要方法及其在中医研究中的应用。包括解剖学、病理解剖学方法,组织学、病理学方法,电子显微镜方法。,3,什么是形态学? 形态学是生命科学的基础学科。生命的表现形式为形态、结构与功能相结合的统一体,生命的形态结构的多样性决定了其功能的复杂性,因此探讨生命的形态结构是医学乃至所有生物学科的研究基础。 与教材其它几类实验技术相比,形态学技术的显著特点是形象(直观、实在)眼见为实,观察和比较实验对象的形态。从肉

2、眼所见的解剖、器官、组织,到借助光镜、电镜看到细胞、分子。,4,在实验研究中可以观察许多方面,看看中药治疗后在哪些方面起作用。其中形态学是最常用的观察手段。即使在分子生物学迅速发展的今天,也是如此。有许多优点,实在、可靠(受检测技术干扰少、质量容易控制)。比如中药的药效学实验、毒理实验、质量检测等往往采用这些技术。形态学方法有3个层次:解剖、光镜、电镜。,5,解剖:肉眼所见,最为基本。比如,肿瘤体积在用药后,有没有减小?骨折经治疗后,接上了没有。这些最基本。而解剖可以回答这样的问题。 但是,想深入细致地看,比如肿瘤中的细胞特征,肉眼看不见,必须借助光镜和电镜。光镜:通常可以放大100400倍(

3、范围在501600倍)。由于放大,所以要求组织经过处理,最常见的是石蜡包埋、切片、染色。电镜:通常可以放大50010000倍。由于放大倍数太大,石蜡切片还不能满足,所以要求特殊的包埋、切片、染色技术。,6,一、形态学的主要方法形态学主要有哪些方法? 形态学的主要方法可以概括为3个方面: 解剖学、病理解剖学方法(解剖)。 组织学、病理学方法(光镜)。 电子显微镜方法(电镜)。,7,(一)解剖学、病理解剖学方法何谓解剖学?解剖学是一门研究机体形态结构的重要医学基础学科,属于生物学中的形态学范畴。分类如下:,8,大体解剖学是指用刀剖割,用肉眼观察机体各器官的形态结构的科学,根据具体研究方法和观察内容

4、的不同,又将其进一步分为系统解剖学和局部解剖学。,9,系统解剖学主要按照机体各系统来叙述各器官的形态结构。局部解剖学则是按照机体自然分区如头、颈、胸、腹、四肢等叙述各器官结构的层次排列、毗邻关系、血液供应、神经支配、体表标志和体表投影。,10,解剖学及其研究方法的发展经历了漫长的历程。西方最早的较完整的解剖学论著当推盖伦(Galen,公元130201年)的医经。现代人体解剖学创始人维萨利(A Vesalius,15141564)是西欧文艺复兴时期最伟大的解剖学家,他的人体构造,极大地推动了人体解剖学的发展。我国2000多年前的黄帝内经、难经也有丰富的解剖记录。宋宋慈所著的洗冤录是我国乃至世界上

5、最早的一部法医解剖学专著,其中较详细地记载了人体体表各部解剖学名称以及全身各部骨的名称、数目和形态等。,11,何谓病理解剖学?病理解剖学是研究疾病时机体内所发生的形态结构改变,揭示疾病的病因、发病机制和转归,从而认识和掌握疾病的本质、发生和发展规律,为诊治和预防疾病提供科学的理论基础的一门基础学科。临床医学除运用各种检验、治疗等方法对疾病进行诊治外,还必须借助于病理学解剖学的研究方法,如活体组织检查、尸体剖验、动物实验等对疾病进行观察研究,以阐明疾病的本质,提高临床诊治水平。介绍某医院二尖瓣狭窄死亡患者病理解剖案例。,12,病理解剖学的发展也经历漫长的历史。古希腊名医希波克拉底(Hippocr

6、ates,公元前460公元前377年),首创液体病理学。安东尼本尼维尼(Antonio Benivieni,14401503,佛罗伦萨的外科医生)的著作疾病隐因对20例尸体解剖进行了描述,并“试图确定死因和解释临床症状”。因此,本尼维尼被称作病理解剖学之父。到18世纪中叶,意大利医学家莫干尼(Morgagni,16821771),根据尸体解剖所积累的资料,创立了器官病理学,标志着病理形态学的研究开端。,13,解剖学主要有哪些方法?解剖学的主要方法包括: 标本防腐固定方法。 断面解剖方法。 血管灌注技术。 淋巴管灌注方法。 数字化“可视人”方法等。 此外,还有:,14,计算机X线断层扫描图(co

7、mputed tomography,CT)、正电子发射计算机断层(Positron Emission Computed Tomegraphy,PET)、核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)、超声断层图、放射自显影技术、计算机图像处理等先进技术在解剖学领域的应用,使解剖学得到了新的发展。,正电子发射计算机断层扫描设备 核磁共振设备,15,1解剖学的主要方法(1)标本防腐固定方法:用10的甲醛(福尔马林)先灌注,后浸泡。即将12万毫升10的甲醛灌注入动脉,使之经动脉流遍全身,渗透到全部组织器官,甲醛约经1周可渗透到全身各部,但要达到比较完全的固定、适于解剖操作的

8、程度,则需经46个月。以后经510的甲醛溶液浸泡保存。,16,(2)断面解剖方法:新鲜尸体经防腐固定,再注入血管填充剂,-25冰冻周后,用尸体切割机进行断面切割。切下的断片立即用近于0的清水快速冲洗,放在平坦的玻璃板上整形,使断面上所有结构均保持于原位后,再放入容器内,以10甲醛固定液固定10天左右,最后保存于玻璃缸或有机玻璃盒内。这是研究器官的位置、器官与器官之间或局部与整体之间位置关系的有效方法之一。,头部横断面图像 胸部横断面图像,17,(3)血管灌注技术。(4)淋巴管灌注方法。(5)数字化“可视人”方法:数字化“可视人”是指把人体形态学、物理学和生物学等信息,通过大型计算机处理而实现的

9、数字化虚拟人体,可代替真实人体进行实验研究的技术平台。“可视人”将从各个角度形成人体数字模型,即将人的动态生物学和物理过程用数学方法进行精确描述,并建立相应的、等效意义上的数字化模型。它的研究目标,是通过人体从微观到宏观结构与机能的数字化、可视化,进而完整地描述基因、蛋白质、细胞、组织以及器官的形态与功能,最终达到人体信息的整体精确模拟。,18,2病理解剖学的主要方法病理解剖学的主要方法包括: 尸体剖验。 活体组织检查。,19,(1)尸体剖验:尸体剖验简称尸检是病理学的基本研究方法之一。通过对尸体进行解剖,进行大体观察和组织学观察,全面检查各脏器、组织的病理变化,并结合各种临床资料进行对照分析

10、,从而明确疾病的诊断,查明死亡原因,验证诊断和治疗是否正确,以总结经验,汲取教训,提高临床诊治水平。同时,也为医疗事故及医疗纠纷的正确解决提供了证据。通过尸检,还能及时发现各种传染病、地方病和职业病等,为防治措施提供依据。尸检还可提供大量教学标本,以供医学生和临床医生学习,并可收集疾病发生的确切数据和发现新的疾病。,20,根据国家卫生部解剖尸体规则的规定,尸体解剖分为三种:1)普通解剖:医学院校和其他有关教学、科研单位的人体学科,在教学和科学研究时施行 。2)法医解剖:仅限于司法机关施行。主要目的是查明死亡原因和死亡性质,为侦破案件提供可能的线索和证据 。3)病理解剖:病理解剖仅限于医学院校教

11、学、医学科学研究和医疗机构的病理科或病理教研室施行。主要目的是阐述及研究机体疾病的发生、发展与转归的客观规律。,21,(2)活体组织检查:在患者身上用局部切除、钳取、穿刺、针吸及摘除等手术方法采取病变组织进行病理检查,以确定诊断,称为活体组织检查,简称活检(biopsy)。其病理检测常用冰冻切片方法。,肾活检,22,3解剖学方法研究中医的案例案例一:严振国教授有关穴位结构的研究(1)对耳廓各部解剖名称与人体各部位的投影关系及其神经分布进行了详细解剖研究,指出耳廓的耳舟部和对耳轮上脚分别相当于上肢和下肢,其神经支配均为颈丛的耳大神经和枕小神经,属于躯体神经;耳甲腔和耳甲艇分别相当于胸腔和腹腔,耳

12、轮脚周围相当于消化系统,均由迷走神经和舌咽神经支配,为脑神经。,23,(2)采用穴区局部层次解剖方法,研究范围从对单一穴位解剖结构的观察,到一条经脉上的所有穴位结构的观察,最后总结归纳出穴位结构的共性。 综合大量研究结果发现,穴位34位于大神经干上,90处于神经干周围;46正位于大血管周围,19正位于血管上;在四肢及躯干,微细淋巴管集束的地方多有穴位;55穴位正位于肌肉群上,有些穴位只有筋膜而无肌肉或皮下组织。因此,一般认为穴位大体解剖结构包括神经、血管、淋巴管、肌肉、筋膜等。(3)研究结果对阐明针刺穴位防病治病的机理,提高针灸临床疗效具有重要的指导作用;对于危险穴位,明确穴位各层次结构,还可避免针刺意外事故的发生。,24,25,案例二:尿道综合症的针刺治疗 症状表现,国内治疗、国外治疗,某针灸研究所的治疗方法和临床疗效。案例三:伤科治疗 组织的复位、手法所具有的专业性。难以言传。某医院专家熟悉解剖的益处。案例四:石学敏院士中风的针灸治疗案例五:“脑细胞流”的启发,26,案例六:小鼠甲状腺解剖和取材,

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