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1、实验一、生物化学实验规则及基本知识,一、实验基本知识与操作规则 二、实验目的 三、实验室规则 四、实验记录与实验报告 五、实验成绩评分办法,量器的认识和使用,一、移液管的使用移液管是一种量出式仪器，只用来测量它所放出溶液的体积。它是一根中间有一膨大部分的细长玻璃管。其下端为尖嘴状，上端管颈处刻有一条标线，是所移取的准确体积的标志。常用的移液管有5，10，25，和50mL等规格。通常又把具有刻度的直形玻璃管称为吸量管。常用的吸量管有1，2，5，和10mL等规格。移液管和吸量管所移取的体积通常可准确到0.01mL。,一、实验基本知识与操作规则,量器的认识和使用,移液管的使用方法移取溶液时，用右手的
2、大拇指和小指捏着移液管颈的上方，将其末端插入溶液中，左手拿洗耳球，先把球中空气压出，再将球的尖嘴接在移液管上口，慢慢松开压扁的洗耳球使溶液吸入管内。当液面升高到刻线以上时，移去洗耳球，立即用右手食指堵住上口。将移液管提出液面，使其保持垂直，同时末端靠在容器的内壁上，为此可使容器略倾斜。然后略为放松食指，并轻轻捻动管身，使液面缓慢下降，当溶液的弯月面下沿恰与刻线相切时，立即用食指压紧上口，使溶液不再流出。将移液管取出并插入承接容器中。为保持其垂直并使末端靠在容器内壁，可使承接容器略倾斜。松开食指，让管内溶液自然地全部沿容器壁流下。全部溶液流完后需等15s后再拿出移液管，以便使附着在管壁的部分溶液
3、得以流出。如果移液管未标明“吹”字，则残留在管尖末端内的溶液不可吹出，因为移液管所标定的量出容积中并未包括这部分残留溶液。,量器的认识和使用,移液管的洗涤使用移液管前，应先用铬酸洗液润洗，以除去管内壁的油污。然后用自来水冲洗残留的洗液，再用蒸馏水洗净。洗净后的移液管内壁应不挂水珠。移取溶液前，应先用滤纸将移液管末端内外的水吸干，然后用欲移取的溶液涮洗管壁2至3次，以确保所移取溶液的浓度不变。,二、微量加样器的使用,微量加样器又称微量移液器、微量进样器。其下端为可装卸、可更换的尖管形移液嘴（吸头），上方是控制采样的推进按钮。,有固定式和可调式两种类型，规格有l级、ml级。,随着生物技术的发展，微
4、量移液器已成为生物化学实验中的重要工具。这类移液器有准确、可连续操作和方便等特点。,量器的认识和使用,工作原理,微量加样器利用排代原理由活塞的定程运动形成负压吸入定量的液体，其吸液量由活塞在活塞套内移动的距离来确定，再按下按钮使活塞向下移动，排出活塞腔内的气体而将吸头内的液体排出。,1.选择在移液范围内的加样器，若为可调式则先将容量调节到所需的容量上。 2.将吸头套在加样器的下端，轻轻转动后牢固地套上，确保密封。 3.正式使用前需连续按动数次（不吸液体），以保持腔内外气压一致。 4.用手垂直握住加样器，拇指将按钮压至第一停点（第一档位），并将吸头浸入到液面下13mm，再缓慢地放松按钮使之复位，
5、等待12s后从液体中取出时拖靠掉吸头外部残液于被取出的容器内壁中。注意避免吸头与其他任何东西碰撞。 5.将吸头移到加样容器内壁上，轻轻地将按钮压至第一停点将液体排出，等待12s，再把按钮压至第二停点（第二档位），排尽全部液体后，吸头应沿容器壁向上滑动取出，此时拖靠吸头内部残液于加样容器内壁中。再放松按钮使之复位，卸下吸头，完成一次操作过程。,操作方法,量器的认识和使用,微量移液器的使用注意事项 吸取液体时，只推至第1档，释放液体时，推至第1档后停12秒后推至第2档。 使用完之后，一定要把移液器调回最大量程，以免压缩弹簧导致弹簧不能回复。 移液器必须卸掉枪头后才能放到移液器架上。,常用玻璃仪器的
6、洗涤与干燥,1.初用玻璃仪器的清洗 新购买的玻璃仪器表面常附着有碱性物质，可先用洗涤灵稀释液，肥皂水或去污粉等洗刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1%-2%盐酸溶液中过夜，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗3次，80烤干备用。,常用玻璃仪器的洗涤与干燥,2.使用过的玻璃仪器的清洗 (1)一般玻璃仪器 如试管，烧杯，锥形瓶等，先用自来水洗刷去净污物，再用毛刷沾取洗衣粉，洗涤灵稀释液或去污粉刷洗器皿内外壁，自来水多次冲洗去除洗涤剂，并洗至容器内壁不挂水珠，最后用蒸馏水洗3次，烤干或倒置控干备用。 (2)量器 如吸量管，量瓶等，使用后立即用自来水冲洗，直至不挂水珠，再用蒸馏水冲洗3次，风干备用。若冲洗后的
7、器皿仍挂水珠，则将其晾干后，泡在铬酸洗液中4-6小时，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水洗3次控干。,一、722型分光光度计的使用,通电预热约20分钟，打开比色皿暗厢盖。 选择波长。 清洗比色皿（拿粗糙面，一次拿一个） 测装试液：约2/34/5。 擦净比色皿外部；粗糙面无明“水”，光面无水迹，无指纹，无纸纤维。 调零测试操作及读数正确。 测完清洗比色皿，放回原处。 仪器恢复原样。,常用仪器的操作要点,二、低速离心机的使用,检查离心机的基本状态（调速旋钮等处于零位，离心室内无异物等）。 将离心样品倒入离心管，液面离管口不少于1cm。 对称平衡（天平称重）放置，盖妥离心室盖。 通电，慢慢加速至所需速度。
8、 离心时间到后切断电源，待转头自动停止转动。取出离心管。 清理实验台面，（洗涤离心管，必要时擦净离心室内外等）。,常用仪器的操作要点,三、电子天平的使用要点,根据称量物多少及精确度选择适宜的天平，并作必要的调校。 称量纸去皮。 将称量物品放在托盘的称量纸上。 读数正确。 恢复天平原状（关闭天平，清洁称重盘，等）。,常用仪器的操作要点,四、恒温水浴锅的使用要点：,通电之前先确认水箱有水且浸没加热管。 懂得温控旋钮的使用及恒温设置方法。 用后切断电源，放空水箱中的水并擦干净。,常用仪器的操作要点,二、实验目的,掌握生物化学的基本知识、基本理论及基本实验技能，训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种生
9、物化学实验仪器； 学会准确详实地记录实验现象和数据的技能，提高实验报告的写作能力； 培养分析和解决问题能力以及严谨细致的科学作风、创新能力等综合素质。,1实验前的准备工作 实验前，要明确实验目的和要求。必须认真预习实验的原理、操作步骤及注意事项，做到实验目的明确：操作步骤及注意事项清楚。 2实验中注重培养科学的思维方法、牢固的质量观念和良好的工作习惯，学生进入实验室必须穿工作服。实验操作时，不能大声喧哗，来回走动，如有问题，举手请示老师解决。实验操作过程应有条不紊，实验器具、试剂应摆放整齐有序。,三、实验室规则,认真对待实验过程中的每一项基本技能训练：样品的制备及取样，试剂的定量移取及加注，溶
10、液的混匀、沉淀、过滤、离心、保温、加热、冷却，各种仪器的正确：操作等，均应在实验中反复多次训练，体会和掌握操作要点，力求做到熟练、准确、规范。 爱护公物，不管是易损的试管、吸管，还是精密分析仪器，均要按操作规程，细心、认真操作。要注意节约，避免不必要的人为浪费。,3实验后的结束工作 实验完毕后，对实验所得结果和数据，进行整理、分析和计算。重视总结实验中的经验、教训。认真完成实验报告，使用过的器皿应清洗干净，放回原处，并安排劳动值日生打扫实验室。注意实验室卫生、整洁。废弃液体应倒入水槽，放水冲走，实验用过的棉花、废纸、沉淀废渣及其他废弃物品等均应放入指定容器，不得随意乱扔或丢进水槽。值日生职责：
11、规整物品，打扫桌面和地面，并将垃圾倒掉；离开实验室前检查水、电、门窗是否关好，经老师同意后方能离开。,四、实验记录与实验报告,实验记录 实验前写好实验预习报告。 实验中应及时准确地记录所观察到的现象和测量的数据。 实验记录要注意有效数字，如吸光度值应为“0.050”，而不能记成“0.05”。每个结果都要尽可能重复观测二次以上，即使观测的数据相同或偏差很大，也都应如实记录，不得涂改。 实验中要详细记录实验条件，如使用的仪器型号、编号、生产厂等；生物材料的来源、试剂的规格、试剂的浓度等。,实验报告 实验报告的格式应为： 实验目的； 实验原理； 仪器、材料和试剂； 实验步骤； 结果讨论（含数据处理）； 注意事项;(7) 思考题 注意：实验结果的讨论要充分，充分运用己学过的知识和生物化学原理，进行深入的探讨，勇于提出自己独到的分析和见解。,五、实验成绩评分办法,实验总评分为100分实验预习情况（10%） 实验操作情况（20%） 实验报告情况（70%）,
