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1、瘦肉精的危害及其分析方法,吴体良 03088039,1. 前言,瘦肉精学名盐酸克仑特罗,化学式为o-(叔丁氨基)甲基-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇盐酸盐,又名盐酸双氯醇胺 .本来用于治疗人的哮喘病,有松弛支气管平滑肌的作用,白色粉末,无臭,味弱,后发现其能提高猪的瘦肉率,而被应用于饲料中.,瘦肉精的危害,盐酸克伦特罗是 一种p：-肾上腺素受体激动剂，对心脏有刺激作 用，会产生心悸 心慌，对神经系统也有刺激作用，产 生恶心、呕吐、还有肌肉不由自主的颤抖。有研究表 明，如果长期食用的话，还会导致染色体畸变的可 能，会诱发恶性肿瘤。,主要实验方法,气相色谱-质谱联用法 液相色谱法 气相色谱法,样品的
2、提取,取切碎后生物组织样品约100g，放入组织捣碎机匀浆5min，取10.020.0g匀浆液，加入30ml盐酸，超声提取15min，并不时搅拌。后以4000转/min离心10min，取上清液倒入150ml分液漏斗；对下层沉积组织再重复提取一次。合并上清提取液，滴加氢氧化钠溶液调PH至12。加入15ml氯仿，轻轻振摇萃取，静止放置5min分层，放出下层氯仿，过置有3040g无水硫酸钠的漏斗收集。并再分别以10ml的氯仿重复萃取两次，收集合并萃取液，后以20ml氯仿洗涤无水硫酸钠合并收集液。用旋转蒸发器于55水浴上蒸发至约1ml，氮气吹干。以甲醇定容至1.0ml即为试液，取1.0l进行色谱分析。,
3、仪器与试剂,Agilent6890气相色谱仪，附氮磷检测器（NPD），HP6890化学工作站，旋转蒸发器，离心机，超声清洗器，组织捣碎机。 盐酸0.5mol/L 氢氧化钠400g/L 氯仿、甲醇、无水硫酸钠，均为分析纯。 盐酸克仑特罗标准，购于SIGMA公司，用甲醇配成100g/ml的储备液。,色谱条件,HP-1701石英毛细管柱（25m0.20mm0.20m）；载气为高纯N2，柱压为140KPa，柱温为初温170，0.5min后以25/min上升至240保持7min，进样口270，不分流，吹扫时间0.5min，100ml/min；检测器温度290，尾吹气为8ml/min,样品净化,在气质谱联
4、用和液相色谱的不少分析方法中，均提到了在色谱分析前，须过固相萃取柱或氧化铝柱净化，以排除干扰峰。本实验对盐酸提取液调碱后用氯仿萃取，旋转蒸发浓缩，氮气吹干，最后用甲醇溶解定容，直接进样分析。,萃取溶剂的选择,在碱性条件下，克仑特罗溶于有机溶剂而微溶于水。将提取液用氢氧化钠调碱后，有用乙酸乙酯作为萃取剂，但乙酸乙酯振摇后乳化严重，有机层浮于提取液上，分离较为麻烦。再对氯仿、二氯甲烷两种有机萃取剂进行分析比较，发现二氯甲烷乳化也较为严重，沉淀分层困难。而氯仿相对比重高，容易沉淀，虽也会有轻微乳化现象产生，但只要不用力振摇萃取，沉淀分层较二氯甲烷理想，萃取效果较好。,样品的提取 萃取溶剂的选择 样品净化,仪器与试剂 样品处理 色谱条件,谢谢观看,
