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1、内分泌科实验室检查,中山大学附属第五医院内分泌科鲁红云,第一节 有关糖尿病的检查,一、口服葡萄糖糖耐量试验（OGTT） 二、胰岛素释放试验 三、C肽释放试验 四、谷氨酸脱羧酶（GAD）抗体 五、胰岛细胞抗体（ICA）检查 六、胰岛素自身抗体（IAA）测定 七、尿微量白蛋白测定,一、口服葡萄糖糖耐量试验（OGTT）,1. 禁食12-14小时，早晨空腹采抗凝静脉血2ml，测血糖，口服75克葡萄糖（溶入200-300ml水中），3-5分钟内全部服完，记录开始服糖时间，在服糖后2小时（2小时的血糖值是诊断糖耐量异常或糖尿病的重要指标）采抗凝静脉血2ml，测血糖，必要时可采服糖后第1、3、4小时的血。2
2、正常参考值：空腹静脉血浆血糖 6.1mmol / L服糖2小时静脉血浆血糖7.8 mmol / L,3注意事项和影响因素：, 试验中禁用茶、咖啡、食物和乙醇，禁烟，可站立、慢走和端坐，不能激烈活动。 对糖代谢有影响的主要药物包括噻嗪类利尿剂、受体阻断剂、口服避孕药、甲状腺激素、烟酸、利福平和水扬酸等，试验前应停用3天以上，正在服用糖皮质激素者不适于作糖耐量试验。 病人无急性疾病和影响试验的慢性疾病，每天至少摄入碳水化合物150g，3天以上。 如已诊断糖尿病，可不作该试验（除非为作胰岛素或C肽释放试验）。 儿童服葡萄糖按每公斤体重1.75g计算，总量不超过75g。 血糖测定采用葡萄糖氧化酶法，血
3、清与血浆血糖无明显差别， 采血后应尽早测血糖，不要超过3时，否则血糖会降低。 根据WHO糖耐量试验要求，葡萄糖应是75g无水葡萄糖或82.5g含一分子水的葡萄糖。 由于受体内吸收等因素的影响糖耐量试验的结果重复性较差。,二、胰岛素释放试验,1试验方法： 采用75克葡萄糖法同糖耐量试验。 采用馒头餐法，空腹采静脉血后，吃2两馒头（100克面粉） 2正常参考值（化学发光免疫测定法）：空腹胰岛素 627 m IU/ L，胰岛素浓度在服糖后（或馒头餐后）0.5-1小时达高峰，可比空腹胰岛素浓度高数倍至10倍， 3小时后降至接近正常水平。,3注意事项和影响因素：, 如已确诊为糖尿病，为了解胰岛功能可考虑
4、用馒头餐试验， 对糖耐量试验有影响的药物和疾病同样会影响胰岛素释放试验。 试验当天早上不能使用降糖药物和胰岛素。 有些药盒不能区分胰岛素原和胰岛素原裂解产物，注射外源 性胰岛素产生的胰岛素抗体可干扰胰岛素测定。 正在使用胰岛素的病人，特别是中长效胰岛素，会影响测定 结果（测定值包括了内源性和外源性胰岛素），应测定C-肽水平。 糖尿病人的胰岛细胞功能受糖尿病类型、体重、病程和血糖高低等因素的影响。,4临床意义和应用：, 用于了解胰岛细胞的功能，协助糖尿病的分型和指导治疗。 典型1型糖尿病胰岛素分泌曲线低平，2型糖尿病胰岛素分泌与病程、体重和血糖高低关系密切，病程短、肥胖和血糖控制好者，胰岛素分泌
5、曲线有一定峰值，但峰值后延。病程长、消瘦和血糖控制差者，胰岛素分泌曲线低平。 用于胰岛细胞瘤的诊断，胰岛细胞瘤病人有空腹低血糖 和不适当增高的胰岛素水平。 胰岛素自身免疫综合征时胰岛素水平较高，体内同时存在胰岛素自身抗体。,三、C肽释放试验,1原理：同胰岛素释放试验。 2试验方法： 75克葡萄糖法见糖耐量试验。 馒头餐试验见胰岛素释放试验。 胰高血糖素刺激试验，胰高血糖素可刺激胰岛细胞分泌胰岛素，其方法如下，清晨空腹静脉注射1mg胰高血糖素，在注射前和注射后6分钟采静脉血测血糖和C肽水平。,3正常参考值（化学发光免疫测定法）：,空腹 C肽 2981324 pmol / L， 正常人采用75克葡
6、萄糖法或馒头餐试验，C肽浓度在服糖后 （或馒头餐后）0.5-1小时达高峰，可比空腹C肽浓度高3-5倍， 3小时后降至接近正常水平。 胰高血糖素刺激后C肽峰值在6分钟左右。,4注意事项和影响因素：, 见胰岛素释放试验。 胰高血糖素刺激试验禁用于对其成分过敏者和疑有肾上腺腺瘤者，空腹血糖7mmol/L时试验结果不好分析，胰高血糖素刺激试验与75克葡萄糖法或馒头餐试验比较重复性好、时间短和不受慢性高血糖的影响。,5临床应用与分析：, 了解胰岛细胞的分泌功能, 协助糖尿病的分型, 特别是正在使用胰岛素的病人。 帮助指导用药和胰岛素的使用，有报告认为胰高血糖素刺激后C肽水平600 pmol /L时应考虑
7、用胰岛素治疗。,四、谷氨酸脱羧酶（GAD）抗体,1原理：GAD抗体是1型糖尿病自身免疫反应的重要抗体，检测GAD抗体有助于1型糖尿病的诊断、预测和预防。2采血方法：不抗凝静脉血2ml。3正常参考值（酶联免疫吸附分析法）：GAD抗体 1.00 阴性1.05 阳性1.001.05可疑4注意事项和影响因素：不同的检测方法和药盒其特异性和敏感性可能存在较大差别，结合胰岛细胞抗体（ICA）和胰岛素自身抗体（IAA）其意义更大些。,5临床意义和分析, 糖尿病的分型诊断，一般GAD抗体在1型糖尿病患者中其检出率高于ICA和IAA，且可维持较长时间，有报告在空腹血糖最初增高时（达糖尿病诊断标准），GAD抗体阳
8、性率可达8590%。 在1型糖尿病的一级亲属中筛查GAD抗体，结合ICA和IAA检查以及HLA中易感基因检查，可预测1型糖尿病的发生和发展。,五、胰岛细胞抗体（ICA）检查,1原理：ICA是作用在胰岛细胞胞浆成份上的非特异性抗体，是1型糖尿病自身免疫反应的重要抗体之一。2采血方法：不抗凝静脉血2ml。3正常参考值（酶联免疫吸附分析法）：正常人和2型糖尿病为阴性。4注意事项和影响因素：同GAD抗体。5临床意义和应用： 阳性见于1型糖尿病，新发生的1型糖尿病ICA阳 性率可达50-80%，但随病程的延长阳性率迅速下降。 在1型糖尿病的一级亲属中筛查，结合谷氨酸脱羧酶（GAD）抗体和胰岛素自身抗体（
9、IAA）以及HLA易感基因检查，可帮助预测1型糖尿病的发生和发展。,六、胰岛素自身抗体（IAA）测定,1原理：IAA是体内针对自身胰岛素产生的抗体，是1型糖尿病自身免疫反应的重要抗体之一。2采血方法：不抗凝静脉血2ml。3正常参考值（酶联免疫吸附分析法）：正常人和2型糖尿病为阴性。4注意事项和影响因素：目前IAA的测定方法不能区别IAA与胰岛素治疗诱导产生的胰岛素抗体。其余同GAD抗体。,第二节 甲状腺和甲状旁腺疾病检查,一、TT3 和 TT4 的测定1原理：全部 T4和 20%的 T3由甲状腺滤泡上皮直接合成和分泌，80% 的T3由T4在外周组织脱碘而来，血液中大部分甲状腺激素与TBG呈可逆
10、性结合，T3和T4与蛋白结合的量分别为99.7%和99.97%，测定TT3和TT4分别代表结合与游离T3和T4的总量。 2采血方法：不抗凝静脉血12ml。 3正常参考值（化学发光免疫分析法）:TT3 0.601.81g/ LTT4 45.0109 g / L,4注意事项和影响因素：, 受TBG的影响，雌激素（如妊娠、避孕药）可使TBG升高，雄激素、水杨酸、皮质醇、严重肝肾疾病和低蛋白血症时TBG下降。 血中存在的抗T3、抗T4 抗体可以干扰化验结果，使之出现假性增高或降低（根据试验方法）。 采血时病人刚服用含T3的甲状腺激素，可使T3的水平升高。 服用抑制T4转化为T3的药物如丙基硫氧嘧啶、普
11、萘洛尔、地塞米松、胺碘酮可影响T3值，使T3减少。,5临床应用和分析：, 甲亢时多数情况TT3和TT4平行增高，甲减时平行下降，但在甲亢初期和复发早期TT3较TT4上升明显（在甲亢时T3以更大的比例直接从甲状腺分泌），故更敏感，甲减时TT4较TT3更敏感。 在T3型甲亢时TT3和FT3增高，TT4和FT4正常，见于甲亢初期、复发早期和缺碘等情况。在T4型甲亢时TT4和FT4升高，TT3 和FT3正常，和FT3正常，多见于甲亢伴有严重疾病或碘甲亢。 低T3综合征是由非甲状腺疾病引起的TT3 和FT3降低，如疾病进一步加重，TT4和FT4也可降低。,二、FT3和FT4测定,1原理：FT3和FT4不
12、受TBG的影响，是甲状腺激素中具有代谢活性的部分，能更直接反应甲状腺的功能。2标本采集：不抗凝静脉血2ml。3正常参考值（化学发光免疫分析法）：FT3 1.814.31 ng/ LFT4 7.419.5 ng / L4注意事项和影响因素：个别人体内存在抗T3和抗T4抗体，可以干扰FT3、FT4的化验结果，在分析时要结合病人情况以及TSH结果来判断病人的甲状腺功能情况。5临床应用和分析：FT3和FT4较TT3和TT4敏感，在甲亢初期或复发早期FT3和FT4升高可先于TT3和TT4。,三、TSH测定,1原理：TSH由腺垂体分泌，作用于甲状腺，促进甲状腺激素的合成和分泌，TRH可刺激TSH分泌，而甲
13、状腺激素反馈抑制TSH分泌。 2标本采集：空腹不抗凝静脉血2ml。3正常参考值（化学发光免疫分析法）：TSH 0.206.20 mIU / L,4注意事项和影响因素：, 不同化验方法，灵敏度不同，其意义有所不同，RIA不能区别正常人与甲亢病人IRMA可区别绝大多数甲亢病人和正常人，称为sTSH， ICMA和TRIFMA为uTSH。 多巴胺、皮质醇可显著减少TSH的释放，在使用这些药物时TSH水平可抑制到甲亢水平， 生长抑素和5羟色胺也可使TSH分泌减少。 在某些非甲状腺疾病和急性精神疾病，TSH水平急剧波动使结果难以分析，应待病情稳定后重新评价或连续观察TSH的动态变化。,5临床应用和分析：,
14、 原发性甲亢时，sTSH和uTSH低于正常，较FT4和FT3更敏感，一般可替代TRH兴奋试验。亚临床甲亢时TSH降低， FT3和FT4在正常范围。服用过量甲状腺激素可使TSH降低。 原发性甲减时各种方法测定的TSH均较灵敏的升高，亚临床甲减时，TSH升高，FT3和FT4在正常范围。下丘脑和垂体病变所致甲减时，根据其病变性质和程度， TSH降低或正常偏低。单测TSH不能区别下丘脑性还是垂体性甲减， TRH兴奋试验对鉴别两者有一定帮助。 垂体TSH瘤、异源性肿瘤（分泌TSH）、甲状腺激素抵抗综合征（全身或垂体性抵抗）时，TSH升高或正常，同时有FT4和或FT3增高。 用sTSH或uTSH监测正在治
15、疗中的甲亢或甲减，当甲功恢复到正常时，TSH水平恢复到正常需要更长时间。,五、TGAb和TPOAb测定,注意事项和影响因素：大约10%的健康正常人有低水平的TGAb和TPOAb，影响TGAb和TPOAb的其他因素包括： 用甲状腺激素替代治疗慢性淋巴细胞性甲状腺炎可使抗体滴度轻中度降低。 甲状腺次全切或全切可使抗体滴度下降。 131I治疗使抗体滴度升高，峰值在23个月。 皮质醇和抗甲状腺药物治疗可降低抗体滴度。 患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的儿童和孕妇抗体滴度较低，孕妇产后升高。 干扰素可增加抗体的产生。,临床应用和分析：, 用于慢性淋巴细胞性甲状腺炎的诊断，在慢性淋巴细胞性甲状腺炎时TPOAb水平
16、的升高较TGAb更明显和常见。在诊断时应结合病人的临床表现、甲状腺功能和其他实验室检查。 约50-90%的Graves病患者有低水平的TGAb和TPOAb，具有较高水平TPOAb的Graves病患者，以后发生甲减的可能性较大。,六、完整PTH测定,1原理：PTH由甲状旁腺的主细胞合成和分泌，血清中完整的有生物活性的 PTH (84个氨基酸)占520%，其半衰期不到5分钟，具有部分生物活性的氨基端PTH片段量很少, PTH分子中无生物活性的羧基端和中段占7595%，有较长的半衰期，使用免疫放射法或免疫化学发光法可以直接测定完整PTH，有较好的准确性、敏感性和特异性。 2标本采集：空腹不抗凝静脉血2ml3正常参考值（化学发光免疫分析法）：12.072.0 ng / L (1.37.6 pmol / L),
