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1、电子显微镜技术 及其在病理诊断上的应用,1,一、电子显微镜技术：也称电子显微技术或电子显微术,2,3,发明背景：电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束行径，在上述理论的指导下发明使用。 电子显微镜的类型：透射电子显微镜：观察样品内部超微结构。扫描电子显微镜：展示样品表面形貌。,4,5,6,扫描电镜和透射电镜比较,7,样品的制备,透射电镜样品制备的常用方法：包括超薄切片、冷冻复型、负染色等。 扫描电镜样品制备：除保存样品表面形貌结构外，只要求样品干燥并能导电，不需包埋和切片。,8,二、电子显微镜技术 在病理诊断上的应用,9,神经内分泌颗粒：神经内分泌肿瘤 黑色素小体：无色素性黑色素瘤 Lange
2、rhans细胞颗粒：组织细胞增生症 Weibel-Palade小体：血管内皮瘤及肉瘤 肌微丝：肌源性肿瘤 细胞质内晶体：腺泡状软组织肉瘤 板层小体：肺泡细胞癌 成簇糖原颗粒：Ewings瘤,(一)特异性超微结构,10,Neurosecreting granules,11,Size and shape of melanosome of stage，,12,Langerhans cell :rod-shaped and tennis-racket-shaped,13,Alveolar soft part sarcoma:crystalloids,14,（二）细胞膜及其特化物 细胞外形 纤毛 微绒毛
3、 细胞连接 基板和外板,15,Malignant pleural mesothelioma: microvilli,16,Junction complex,17,Desmosomes,18,Desmosomes,19,粘液颗粒：粘液性上皮（单位膜包低、中电子密度的颗粒or网状物质，偶见电子密度的核心“牛眼状，bulls eye type”） 酶元颗粒：腺泡细胞来源（唾液腺癌、胰腺外分泌腺癌、胃癌）单位膜包电子密度高 APUD颗粒（神经内分泌颗粒）： Apudoma与溶酶体区别 溶酶体：大小、形状差异大神经内分泌颗粒：较规则,（三）细胞合成产物,20,Mucous cystadenoma of
4、ovary: bulls-eye granules,21,Mucous cystadenoma of ovary:granules with reticular pattern,22,Acinic cell carcinoma:zymogen granules,23,例1：男,39岁,发现右侧颈部无痛肿物1年余,花生米大,取肿物做活检。光镜:增大的淋巴结,结构紊乱,但仍残留滤泡与淋巴窦,窦腔及淋巴索充以大量胞质丰富的嗜伊红细胞,直径约20m。核圆,卵圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞及嗜酸性粒细胞。电镜:大细胞排列疏松、无连接、胞质宽广,见有似网球拍或柄的双膜结构(Birbeck 颗粒) ,证明光
5、镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞 。病理诊断：淋巴结朗格汉斯细胞组织细胞增生症。,24,朗格汉斯细胞组织细胞增生症双模构成的似网球拍状的Birbeck 颗粒。 EM 10 000,25,例2：男,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检,病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿大,再次淋巴结(颌下) 活检病理诊断为恶性淋巴瘤(免疫母细胞型) 。电镜:瘤细胞大、多边形或不规则形,核质比大,核膜弯曲,不规则或奇特的内陷,核常染色质丰富,网栏状大核仁。少许胞质突,胞质内核糖体丰富,其他细胞器稀少。质膜间见发育不良的桥粒样连接。病理诊断:颌下淋巴结转移癌。随后临床发现鼻咽癌原发灶。,26,转移癌瘤细胞大，
6、胞核大，核膜不平滑，显著增大的核质比，质膜间有桥粒样连接，胞质含少许欠发达的细胞器，网栏状大核仁。EM 10 000,27,例3：男,30 岁,肝穿活检。光镜诊断:慢迁肝。虽未见典型碎屑样坏死,但不除外活动性变化。电镜见肝细胞大,疏松,细胞周围间隙加大,有微绒毛化,滑面内质网增生,内含管状体,肝窦内充塞胶原纤维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶,周围有淋巴细胞浸润。电镜诊断:慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻微活动。,28,慢性迁延性乙型病毒性肝炎 滑面内质网增生,腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。EM 8 000,29,国内外对电镜诊断的价值,在肿瘤应用方面报道较多,占65%。 涉及病原学的诊断,特别是怀疑病毒、支原体、衣原体等微生物感染的标本应充分使用电镜。 电镜标本要求尽可能活体取材,立即投入预冷的固定液中固定,以利完好地保存细胞的超微结构。 半薄切片选区定位要求准确。,30,THANK YOU,31,
