《实验生理科学（中山大学）实验一坐骨神经腓肠肌标本制备方辉五年制 副本课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验生理科学（中山大学）实验一坐骨神经腓肠肌标本制备方辉五年制 副本课件（34页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验生理科学 生理实验部分,中山医学院高血压研究所方辉 医学科技楼东618室,实验安排：第二周：熟悉仪器 坐骨神经-腓肠肌标本制备 第三周：神经干动作电位的引导 阈强度 传导速度 第四周：蛙心收缩的影响因素蛙心起搏点的确定 不应期 期前收缩与代偿间歇 第五周：呼吸运动的调节 第六周：影响动脉血压的因素 第七周：尿生成的影响因素,实验一,实验规程熟悉仪器坐骨神经-腓肠肌标本制备,实验课的要求,1. 课前预习 2. 课堂纪律：穿白大褂 3. 分组：分组，组长轮流 4.爱护仪器器械：借还，清点、清洗、擦干、不损害 5.爱护实验动物：处死 6.保持卫生整洁 7. 实验报告,生理学实验课的目的,验证和巩
2、固生理学的基本理论 了解获得生理学知识的科学方法 掌握生理学实验的基本操作技术 培养严肃的态度、严格的要求、严密的方法 培养对事物观察、分析、综合的能力，独立思考解决问题的能力以及创新的精神和创新的能力,实验报告的一般格式,姓名、班级、组别 实验题目、日期、温度 实验目的、实验原理、实验对象 实验药品和器材、实验步骤 实验结果 讨论 结论,实验结果实验结果是实验过程中观察到的现象和原始记录的资料、数据及经过。主要陈述实验和观察到的事实。内容要求： （1）客观、可靠、准确 （2）虽打印粘贴实验结果，但需有适当描述，即陈述性结果 （3）必要时用计算、统计图表，实物照片也要有陈述 （4）不必分析评论
3、、评价,讨论 讨论是实验报告的核心部分，可以帮助学生提高独立思考和分析问题的能力。 针对实验结果进行讨论，实验过程相关的问题一般不讨论 不应盲目抄袭书本，应根据自己的实验结果提出创造性的见解和认识，但必须是严肃认真、有科学依据的。,内容要求：根据研究目的和实验设计要求，对所得结果进行分析，找出回答研究目的提出问题的答案，为结论提供推导的过程。（1） 对实验结果进行分析、判断，估计结果的正确 性，评价其意义，从感性认识提高到理性认识。 （2） 与前人已发现的论断联系起来，比较其异同， 解释其因果关系或提出自己观点和建议。 （3） 指出结果的理论意义及大小，应用价值如何。 （4） 实验过程有何经验
4、教训，尚待解决的问题及今 后进一步研究方向。 （5） 避免主观臆测，不要“自圆其说”。,结论是从实验结果和讨论过程中归纳出概括性的判断。说明论文阐述的主要发现所能说明的理论认识，是全文的概括和总结。内容要求： (1)同研究目的保持一致与前面提出的问题前后呼应。 (2)把讨论分析得出的认识，以简明扼要论点形式表达出来，不应罗列具体结果，也不能随意推断和引申。 (3)要客观科学准确简练地使用文字，避免笼统、过宽过窄的断言。 (4)如果实验结果未能说明问题，就不应勉强下结论。,一、熟悉仪器设备及器械,1. BL-420系统：2. 常用手术器械：手术刀、粗剪刀、手术剪、眼科剪、止血钳、有齿镊、无齿镊等
5、（自学看书）,BL-420F生物机能实验系统,调整参数：打开BL420生物机能测试系统，用鼠标单击“实验项目”菜单项，选择“肌肉神经实验项目”后，会弹出一个“设置刺激强度与反应的关系实验参数”对话框。该实验可根据所设置的参数，自动完成包括自动启动刺激、自动显示实验反应波形等。实验完毕后保存实验数据。,3. Choose the program (BL420 biological system),基 本 操 作 (一)开机 (二) 进入界面 (三) 实验项目与输入方式 (四)参数调节 (五)数据显示 (六)暂停观察 (七)刺激器的使用刺激器的参数调节面板位于主界面最右边分时复用区的底部。当需要使
6、用刺激器时，单击“刺激参数调节区”按钮，即可打开对话框设置刺激器的参数，当 需要给标本刺激时“启动刺激”按钮，可启动或停止刺激。 (八)添加实验标记在实验过程中，需要在改变实验条件时添加一个实验标记，可添加特殊实验标记。 (九)数据处理 (十)记录存盘(十一)实验结束(十二)反演(重显),实验结果打印,将实验结果保存，然后再打开，用鼠标拖选波形及标记，进入word粘贴，把实验项目的图形调整在一页word里面，每组打印一张，贴到实验报告中。,学校网页： http:/ 校外网页： http:/ (venom),目的 熟悉并掌握蟾蜍或蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。熟悉并掌握生理学实验常用器械的使用
7、和基本操作技术。 原理 两栖动物一些基本生命活动和生理机能与温血动物近似 其离体组织、器官保持活性所需的生活条件比较简单，置 于任氏液中，其活性可以在几小时内保持不变 制备坐骨神经腓肠肌标本，可用于研究观察组织的兴奋与兴奋性、传导性以及刺激与肌肉收缩等基本生理现象和过程。,实验步骤：,捣毁蟾蜍脑脊髓 剪除蟾蜍躯干上部、内脏及剥皮 分离两腿，制作坐骨神经腓肠肌标本 1、 分离两腿 2、 游离结扎腓肠肌 3、 游离坐骨神经 4、 游离、剪断股骨 5、 剪断膝关节，完成制作 用锌铜弓检查标本兴奋性,Foramen Magnum,实验方法,实验方法,1.破坏脑和脊髓 1)取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。
8、2)左手握住蟾蜍，用食指按压其头部前端，拇指按压背部，右手持从相当于枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动充分捣毁脑组织。然后将探针抽回至进针处，再向后刺入脊椎管，反复抽插捣毁脊髓。蟾蜍四肢松软，呼吸消失，表明脑和脊髓已完全破坏。 3）否则应按上法反复进行。,2.剪除躯干上部及内脏 在骶髂关节水平以上0.1cm1cm处剪断脊柱，左手握住蟾蜍后肢，用拇指压住骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持普通剪刀，沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及脊柱两侧的坐骨神经。剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。,3.剥皮 握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手握住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢的皮肤
9、。把标本放入盛有任氏液的培养皿中。将手及用过的剪刀、镊等全部手术器械洗净，再进行下面步骤。,4.分离两腿 用镊子夹住脊柱将标本提起，背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿损伤坐骨神经）。然后沿正中线用剪刀将脊柱和耻骨联合中央辟开两侧大腿，并完全分离。将两条腿浸入任氏液的培养皿中。,（1） 游离坐骨神经 将腿标本腹面朝上放置，用玻璃针沿脊柱旁游离坐骨神经，将坐骨神经连同23节脊椎骨用粗剪刀从脊柱上剪下来。再将标本背面朝上放置，把梨状肌及其附近的结缔组织剪去。循坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的裂缝处），找出坐骨神经的大腿段。用玻璃针仔细剥离游离至腘窝，然后剪去从脊柱根部至腘窝的所有坐骨神经分支。,
10、5.制作坐骨神经腓肠肌标本 取一蛙腿置于蛙板上的玻璃板上。,5.制作坐骨神经腓肠肌标本,（2） 完成坐骨神经小腿标本 将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净，然后在股骨中部剪去上段股骨（保留足够的股骨断端，用于固定） ，保留的部分就是坐骨神经小腿标本。 （3） 完成坐骨神经腓肠肌标本 将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎后，于结扎处远端剪断跟腱。游离腓肠肌至膝关节囊将小腿其余部分剪掉，这样就制得一个具有附着在股骨上的腓肠肌并带有支配腓肌的坐骨神经的标本。,2,3,4,5,6,7,1,6. 检查标本兴奋性用经任氏液润湿的锌铜弓轻轻接触一下坐骨神经，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，则表明标本的兴奋性良好，即可将标本放在盛有任氏液的培养皿中，以备实验用。,小心毒液 注意湿润标本 避免用金属接触神经，或夹伤神经；不要过度牵拉神经 注意分离时要用玻璃分针，并且要顺着肌肉的走向游离,一定要把周围的结缔组织剥离干净 每次刺激标本后应使肌肉休息30秒，连续刺激不可超过5秒,注意事项：,
