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1、2018/9/22,1,第十章 消毒灭菌,2018/9/22,2,看书找答案,1、什么是正常菌群？ 2、什么是灭菌、消毒、防腐、无菌及无菌操作？想想消毒、灭菌和防腐有什么区别？,2018/9/22,3,第一节 微生物的分布,一、微生物在自然界的分布 （一）土壤中的微生物 （二）水中的微生物 （三）空气中的微生物,2018/9/22,4,二、微生物在人体的分布,（一）正常菌群的定义分布在人类的体表及其与外界相通的腔道中，在机体免疫机能正常时是无害的微生物群体。,2018/9/22,5,（二）人体微生物的分布,2018/9/22,6,（三）正常菌群的作用 1、生物拮抗作用屏障 2、免疫作用 免疫刺
2、激 3、营养与代谢作用合成维生素 4、抑制肿瘤的作用,2018/9/22,7,占位性生物屏障作用,2018/9/22,8,细菌方面,机体方面,正常菌群/ 非致病菌,条件致病菌,？,寄生部位改变 菌群失调,免疫功能下降,（四）、条件致病菌和菌群失调,2018/9/22,9,第二节 消毒与灭菌,消毒灭菌概念 物理方法 化学方法 生物学方法,2018/9/22,10,消毒:杀死物体或介质中的病原微生物 的方法（芽胞及非病原微生物不一定能杀死）。,灭菌: 杀死物体或介质中所有微生物的方法（包括所有细菌繁殖体及芽胞）。判断标准？,消毒灭菌有关概念,防腐（抑菌）:防止或抑制微生物生长繁殖的方法。（微生物不
3、一定死亡）,2018/9/22,11,无菌操作:防止细菌进入机体 或对象的技术，称无菌操作。,无菌: 在一定范围内没有活的微生物存在。,2018/9/22,12,无菌操作,2018/9/22,13,一、物理方法,常用方法 （一）热力法（干热、湿热） （二）辐射（紫外线、电离幅射、微波） （三）滤过除菌（除菌滤器、适用物品） （四）超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细胞、提取抗原） （五）干燥 （六）低温,2018/9/22,14,（一）热力灭菌法,原理： 使微生物蛋白质变性凝固，酶失活； 核糖体解体 破坏细胞膜的结构； 微生物体内的DNA断裂。,2018/9/22,15,焚烧-最彻底的灭菌方
4、法,烧灼-直接用火焰灭菌方法如接种环、试管口、三角瓶口,干烤-加热160-170 2h药粉、玻璃器皿、陶瓷,1、干热灭菌法,红外线-热效应，与干烤类似,灭菌效果：可杀死营养体和芽胞,2018/9/22,16,灼烧灭菌法,红外线接种环灭菌器,2018/9/22,17,干烤灭菌法,电热烘箱,真空干燥灭菌箱,实验室常用设备,2018/9/22,18,湿热灭菌与干热灭菌的比较,同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好,原因,1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固,2、湿热的穿透力比干热强,3、湿热的蒸汽有潜热,2018/9/22,19,2、湿热灭菌法,高压蒸汽灭菌法,最有效的湿热灭菌法 121 15-20mim（
5、杀芽胞),煮沸消毒法,水煮100 5mim(杀繁殖体)-5h(杀芽胞),流通蒸汽消毒法,巴氏消毒法,间歇灭菌法,水蒸汽100 15-30mim(杀繁殖体),反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）,较低的温度 61 30mim/71 30s（杀致病菌）,2018/9/22,20,方法：水中煮沸 15min 灭菌效果：可杀死所有营养细胞和一部分芽胞 适用对象：玻璃注射器和外科器械的消毒。,（1）煮沸法,2018/9/22,21,方法：100 蒸汽持续1530min 效果：杀繁殖体 适用范围：外科手术器械、注射器、胶管或食具等,（2）流通蒸汽消毒法,2018/9/22,22,奶瓶消毒器,2018/9
6、/22,23,方法：常压蒸汽反复几次进行灭菌。,适用对象：不宜高压灭菌的培养基，不耐热的药物和营养物、发酵车间的管道等。,灭菌效果：可杀死芽胞。,（3）间歇灭菌法,2018/9/22,24,适用对象：牛奶、奶酪、果汁、酒类、糖浆等食品消毒。,方法：61.762.8处理30min或71.6度处理15秒或82处理4秒,效果：消毒,（4）巴氏消毒法 （低温消毒法）,2018/9/22,25,2018/9/22,26,UHT技术 （超高温灭菌瞬时灭菌） 135152,2018/9/22,27,2018/9/22,28,灭菌效果：杀芽孢 适用范围：耐高温的物体，如普通培养基、生理盐水、玻璃器皿、敷料、手
7、术器械、某些注射液、手术衣等。,湿热灭菌法中效果最好的方法,（5）高压蒸气灭菌,2018/9/22,29,高压蒸汽灭菌法,灭菌条件,最常用是： 121，103.1kPa，15-20min,2018/9/22,30,高压蒸汽灭菌锅,2018/9/22,31,常用设备：手提式热压灭菌器,2018/9/22,32,高压蒸汽灭菌法,常用设备：卧式热压灭菌柜,2018/9/22,33,高压蒸气灭菌注意点:,检查压力表是否灵敏，压力与温度是否对应 灭菌初期先排净锅内冷空气; 灭菌时间计算：达到规定压力和温度开始计。 锅内水分要充足; 灭菌物品装量不宜太满; 灭菌结束需缓慢减压； 灭菌结束，趁热取出物品。,
8、2018/9/22,34,（二）辐射 1、日光与紫外光,紫外线,杀菌机理：,波长265nm的杀菌作用最强,干扰DNA的复制与转录,穿透力较弱,表面消毒：不耐热物品,特 点：,适用范围：,空气消毒：手术室、传染病房、车间、微生物实验室,灭菌效果:杀营养体,使用时注意防护！,2018/9/22,35,杀菌机理：,适用范围：,2、电离辐射,包括高速电子、X射线和射线,产生游离基,破坏DNA。,一次性医用塑料制品的消毒,食品的消毒-不破坏其营养成分,2018/9/22,36,（三）滤过除菌法,物理阻留方法：除去液体或空气中的细菌,滤菌器,滤膜孔径0.220.45m, 不能除病毒、支原体,适用范围,血清
9、、毒素、输液、生物制品、抗生素以及空气等的除菌,2018/9/22,37,过滤灭菌,2018/9/22,38,2018/9/22,39,2018/9/22,40,2018/9/22,41,2018/9/22,42,（四）超声与超声波：使微生物细胞裂解破碎。,2018/9/22,43,（五）干燥：脱水和盐类浓度增高。,2018/9/22,44,（六）低温：抑制生长繁殖。410存活数月；273可长期保存菌种。,2018/9/22,45,2018/9/22,46,常用的物理消毒灭菌方法,种类 方法 效果 适用范围 干热灭菌法焚烧法 直接燃烧 灭菌 废弃污染物、或焚烧炉 有传染性的内燃烧 动物尸体等
10、烧灼法 直接用火焰烧 灭菌 接种环、试管口或瓶口干烤法 干烤箱内 灭菌 耐高温物品 1601702-3h 灭菌 玻璃物品、瓷器等,2018/9/22,47,种类 方法 效果 适用范围湿热灭菌法巴氏消毒法 62.1-62.8 30min 消毒 牛奶、酒类、或71.1 1530s 糖浆、果汁煮沸法 l00 5-10min 杀死繁殖体 外科手术器械、注射器、胶管或 食具等流通蒸气消毒法 阿诺氏灭菌器 消毒 同上或普通蒸笼进行间歇灭菌法 反复多次的 灭菌 不耐热物流通蒸气 品或特殊条 件下的灭菌,2018/9/22,48,种类 方法 效果 适用范围 高压蒸气灭菌法 高压蒸汽 灭菌 耐高温高灭菌器内 压
11、手术器15磅 121.3 1520min 械、手术衣、敷料等一般培养基10磅115 1530min 含糖培养基或注射剂,2018/9/22,49,种类 方法 效果 适用范围 紫外线消毒法 紫外线灯照射 消毒 空气或物体3060min 表面消毒品过滤除菌法 细菌滤器 血清、抗毒素、生物制品、维生素、蛋白质,2018/9/22,50,二、 化学方法,利用化学药物破坏微生物的化学组成、物理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。,2018/9/22,51,（一）化学消毒剂 1、化学消毒剂的种类,2018/9/22,52,2018/9/22,53,2018/9/22,54,（二）化学消毒剂作用机制,1、促进菌体蛋白质变性凝固 （酚、醇、醛、酸碱类等） 2、干扰细菌酶系统和代谢（氧化剂、重金属盐类等） 3、损伤细菌细胞膜，增加其通透性（表面活性剂、脂溶剂等） 4、菌体成分氧化、水解或结构改 变（氧化剂、卤素、醛、酚等）,2018/9/22,55,2018/9/22,56,三、生物抗菌法,（一）噬菌体：裂解细菌。 （二）抗生素：抑制细菌细胞壁合成、改变其通透性、抑制菌体蛋白合成和抑制核酸合成。 （三）细菌素,
