实验三口服葡萄糖耐量试验

上传人:jiups****uk12 文档编号:54942505 上传时间:2018-09-22 格式:PPT 页数:48 大小:1.09MB
返回 下载 相关 举报
实验三口服葡萄糖耐量试验_第1页
第1页 / 共48页
实验三口服葡萄糖耐量试验_第2页
第2页 / 共48页
实验三口服葡萄糖耐量试验_第3页
第3页 / 共48页
实验三口服葡萄糖耐量试验_第4页
第4页 / 共48页
实验三口服葡萄糖耐量试验_第5页
第5页 / 共48页
点击查看更多>>
资源描述

《实验三口服葡萄糖耐量试验》由会员分享,可在线阅读,更多相关《实验三口服葡萄糖耐量试验(48页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。

1、1,1、氧化供能:分解代谢提供人体75%能量; 2、人体组成成分之一:糖占人体干重的2%; 合成糖原储存在肝脏与肌肉中;形成糖蛋白和蛋白多糖(激素、酶、受体等)、糖脂(神经组织和细胞膜重要组分); 3、转变:其它糖及糖衍生物(核糖、脱氧核糖、氨基多糖);非糖物质(脂肪、氨基酸和核酸)。,糖的生理功能(能量资源和结构材料),糖代谢紊乱 一系列代谢变化,2,3,(一) 血糖的来源、去路和调节,血糖的来源、去路和调节,3.896.11,4,二、血糖浓度的调节,1、肝脏调节作用:双向调控功能:从器官水平通过神经-激素的作用,使肝细胞内各种糖代谢的酶活性改变。升糖调节1:具有活性很高的葡萄糖-6-磷酸酶

2、,可促进肝糖原水解, 补充和升高血糖。 升糖调节2:肝脏具有活性高且易诱导的糖异生酶类,禁食或饥饿时能将非糖物质转化为糖(占55-90%)。降糖调节:促进组织摄取葡萄糖,促进肝糖原和脂肪合成、和抑制肝糖原分解、抑制糖异生。,5,、激素调节作用,降低血糖浓度的激素, 胰岛素 胰岛素样生长因子,升高血糖浓度的激素 胰高血糖素 肾上腺素 生长激素 皮质醇 甲状腺激素,6,、神经调节作用,部位1、下丘脑 2、自主神经(交感和副交感神经),方式:1、直接作用于肝脏;2、调节激素的分泌而影响血糖。,内脏神经,迷走神经,7,高血糖症与糖尿病低血糖症酮症半乳糖血症,糖代谢紊乱,8,(一)高血糖症与糖尿病,、高

3、血糖症:空腹血浆血糖(FPG)6.11 mmol/L(130mg/dl),生理性:包括饮食性(高糖饮食)或情感性(情绪紧张,肾上腺分泌增加),病理性:见于糖尿病;内分泌腺(甲状腺、肾上腺皮质或髓质、胰岛细胞 功能亢进);颅内压升高刺激血糖中枢;呕吐、腹泻、高热等引起的脱水。,尿糖:若血糖浓度高于肾糖阈值9.0mmol/L,出现尿糖。,9,、糖尿病(diabetes mellitus,DM)定义:是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病,系胰岛素相对或绝对不足,或利用缺陷引起。,10,糖尿病(diabetes mellitus,DM),临床特征:血糖持续升高,甚至出现糖尿。长期患有糖尿病常有脂类、蛋白质

4、代谢紊乱以及眼、肾的微血管病变及神经病变等并发症。严重者还可出现水、电解质紊乱及酸碱平衡紊乱,表现为高脂血症,酮症酸中毒等,重者可致死亡。,11,12,发病机制:1、胰腺细胞的自身免疫性损伤2、机体对胰岛素的作用产生抵抗,DM的实验室检测项目:,血糖测定、尿糖测定、OGTT、血清糖化血红蛋白和糖化血清蛋白测定、胰岛素与胰岛素抗体测定、肽测定、胰岛素释放试验以及相关代谢产物测定。,13,糖尿病的诊断标准:,14,(二)低血糖症1、概念: 低血糖症 是指血糖浓度低于3.89mmol/L(葡萄糖氧化酶法)时临床出现一系列因血糖浓度过低引起的症候群。,发病原因:来源 去路,激素效应:升血糖激素缺乏,降

5、血糖激素过剩。肝病变:肝功严重损伤致肝糖原减少和糖异生严重障碍。长期饥饿或剧烈运动时代谢率增加,血糖消耗过多。,15,(三)酮症,1、概念:,酮体:乙酰乙酸、-羟丁酸及丙酮三者统称为酮体,20%,78%,2%,酮血症:酮体形成过多引起血中含量增高,称为酮血症。,酮体形成过多的原因,糖尿病:,糖摄取不足:脂肪动员,糖原贮积病:脂肪动员,碱中毒:代偿,16,(四)半乳糖血症,1、概念:,半乳糖血症是机体不能转化利用半乳糖及其中间代谢产物的一种常染色体隐性遗传病,主要特征为血和尿中半乳糖增高。,2.临床表现:酶缺乏导致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉积在肝脏、肾脏、眼晶状体和红细胞中,引起相应的病变。,1

6、7,血糖测定,测定血糖的标本以血浆最为方便,测得结果最可靠。一般情况下全血葡萄糖浓度比血浆低10-15,毛细血管血样与静脉血样二者的测定值在空腹时无区别,但餐后1小时血样,二者可相差2.270.66mmol/L。测血糖的血浆可取空腹、进食一小时或随机取血,一般采用空腹血样本。,18,血糖测定,一、测定 方法,无机化学法,有机化学法,酶法,19,(一)无机化学法:Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性,(二)有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等,Cu2+,OH-,Cu+,Glu,磷钼酸,显色,邻甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏碱 蓝绿色化合物,缩合,脱水,分子重排,特异性差,

7、干扰因素多,(三)酶法,(1)己糖激酶法(HK)(2)葡萄糖氧化酶法(GOD法),20,葡萄糖ATP 葡萄糖-磷酸ADP 葡萄糖-6-磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖内酯+NADPH NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。,原理:,评价:本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化 分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较贵。,、己糖激酶法(法),21,操作简单,特异性较高,是血糖测定的首选方法但溶血(血红蛋白)、四环素、尿酸、Vc、胆红素、 GSH可引起测定结 果负偏差。,2、葡萄糖氧化酶法(GOD),原理:,葡萄糖O2+2H2O GOD 葡萄糖

8、酸内酯2O2 22O2 + 4-氨基安替比林+酚 POD 红色醌类化合物 + 2O +O2,评价,22,二、血糖测定的临床意义,(一) 生理性高血糖见于情绪激动时交感神经兴奋促使肾上腺素等分泌增加,也可见于一次性食入大量糖。,23,(二) 病理性高血糖,1. 糖尿病 *血糖测定是糖尿病最简单的筛查试验 *糖尿病治疗效果评价 *血糖水平监控有利于糖尿病患者调整饮食摄入量和胰岛素注射量,对降低其长期并发症有积极作用。,24,3. 颅内压增高: 4. 脱水引起的高血糖 呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。,2. 内分泌腺功能障碍,甲状腺功能、肾上腺皮质及髓质功能亢进等引起的升高血糖的激素分泌过多出

9、现高血糖。,25,葡萄糖耐量试验概念适应症操作方法葡萄糖耐量曲线临床意义,糖耐量试验,26,一、糖耐量和葡萄糖耐量试验,(一)糖耐量正常人由于体内有一套完善的调节血糖浓度的机制,即使一次摄入大量的葡萄糖,血糖浓度也仅暂时升高,不出现糖尿,且于2h内恢复到正常血糖水平,此即为耐糖现象。若调节功能失调,口服或静脉注射一定量的葡萄糖后,血糖急剧升高,在一定时限内不能恢复到原有水平,此种现象称为糖耐量降低。反之给予大量葡萄糖后,血糖升高不明显,或缓慢地轻度上升,称糖耐量增加。,27,口服葡萄糖耐量试验(OGTT)静脉葡萄糖耐量试(IGTT),(二)葡萄糖耐量试验,葡萄糖耐量试验是指口服或注射一定量葡萄

10、糖后,每间隔一定时间测定血糖水平进行分析。临床常用OGTT, OGTT是一种葡萄糖负荷试验,用以了解机体对葡萄糖的调节能力。静脉葡萄糖耐量试验是测定糖尿病患者胰岛素分泌的反应性和能力的试验,但不适用于临床常规诊断。,28,1、空腹血糖水平在临界值(67mmol/L)而又疑为糖尿病患者; 2、空腹或餐后血糖浓度正常,但有发展为糖尿病可能的人群; 3、以前糖耐量异常的危险人群; 4、妊娠性糖尿病的诊断; 5、临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理解释者; 6、作为流行病学研究的手段。,OGTT试验适应症:,二、口服葡萄糖耐量试验,29,试验前三天,受试者每日食物中糖含量不应低于150g

11、,且维持正常活动影响试验的药物应在三天前停用,受试前应空腹1016h.坐位取血后5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水,妊娠妇女用量为100g,儿童按1.75g/kg体重给予,不超过75g。糖后每隔30分钟取血1次,共4次。必要时可延长时间,可长达服糖后小时。于采血同时,每隔1小时留取尿液作尿糖试验。整个过程不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食。,OGTT方法:H标准化,30,参考范围:空腹血糖6.1mmol;服糖后3060分钟血糖升高达峰值,一般10mmol;服糖后小时内恢复至空腹血糖水平。同时测定上述各时间的尿糖均为阴性。,31,临床意义,糖尿病性糖耐量空腹血糖浓度7.0mmol/L,服糖

12、后3060min血糖急剧升高,峰值超过10mmol/L,并出现尿糖;随后血糖浓度恢复缓慢,2 h后仍高于空腹水平。,32,临床意义,糖耐量受损空腹血糖浓度7.0mmol/L,但2h血糖7.8 mmol/L,11.1mmol/L为糖耐量减退(IGT);空腹血糖浓度6.1 mmol/L,但7.0mmol/L,2h血糖7.8mmol/L为空服血糖损害(IFG)。,33,曲线绘制:,一般应有5次测定结果。以测定血糖的时间为横坐标(空腹时为0h),血糖浓度为纵坐标,绘制曲线。,34,(三)口服葡萄糖耐量试验(OGTT),35,36,三、妊娠期糖尿病 *诊断方法: 在孕2428周内,口服50g葡萄糖后,测

13、定1小时血糖浓度,若在7.8mmol/L以上者,则提示妊娠性糖尿病的可能性,应作OGTT:测定空腹血糖浓度,糖负荷量100g,然后每小时检测一次血糖浓度,连续3小时。*诊断标准:空腹5.8mmol/L、1h10.5 mmol/L、2h9.2 mmol/L、3h8.0 mmol/L,2个结果超过以上检测值,方可诊断为妊娠性糖尿病。,37,三、妊娠期糖尿病,指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作,不论是否使用胰岛素或饮食治疗,也无论分娩后这一情况是否持续。在分娩6周后,应复查血糖水平和糖尿病的诊断标准重新确定。,38,四、糖尿病诊断程序,7.8,7.8,7.8,39,实验三,口服葡萄糖耐量试

14、验 (葡萄糖氧化酶法),40,实验目的,1 掌握葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖的原理及测定的一些注意事项。 2 熟悉口服葡萄糖耐量试验曲线的绘制及临床意义。,41,葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖的反应原理,葡萄糖+2 H2O+O2 GOD 葡萄糖酸+ 2H2O2H2O2+4-AAP+苯酚 POD 红色醌化物+H2O生成物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。,42,实验仪器及试剂,试管 、移液管、 分光光度计、 恒温水浴箱 酶试剂:葡萄糖氧化酶(GOD)、过氧化物酶(POD)、 4-氨基安替比林(4-AAP) 酚试剂:苯酚 标准葡萄糖溶液:100 mg/dL (5.55 mmol/L

15、),43,操作步骤,加入物 空白管 标准管 样本管 蒸馏水(ul) 20 标准液 (ul) 20 - 样本 (ul) 20 酶工作液(ml) 3.0 3.0 3.0混匀,37孵育20min,以空白管调零,505nm波长处测定各管吸光度值(A)。,44,计算 血糖浓度(mmol/L)=A样/A标标准液浓度 (5.55mmol/L)单位换算:葡萄糖mmol/L18=葡萄糖mg/dL,45,实验注意事项,1 .分离血清要求使用未溶血样品,否则测定结果偏大。 2.要求在30 min内分离血清,糖酵解在全血中以7%/h进行。 3 .样本在4-8可稳定24h,样本放置时间过长会使结果偏低(血糖会被红细胞酵解)。,46,口服葡萄糖耐量试验原理,#健康人一次摄入一定量葡萄糖后,其血液葡萄糖浓度略有升高,但2h内恢复正常,称为耐糖现象。 #糖代谢紊乱时,摄入一定量葡萄糖后,血糖浓度明显增高,或降至正常水平所需时间延长,称为糖耐量受损。此时器官组织受损。,47,实验操作,*用葡萄糖氧化酶法,重复5次测定血糖浓度。 *以时间为横坐标,血糖浓度为纵坐标,绘制OGTT曲线。,

展开阅读全文
相关资源
相关搜索

当前位置:首页 > 行业资料 > 其它行业文档

电脑版 |金锄头文库版权所有
经营许可证:蜀ICP备13022795号 | 川公网安备 51140202000112号