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1、第2章 细菌的分布与消毒灭菌 p28,重点：1. 消毒、灭菌、无菌操作。 2. 高压灭菌法的使用及适用物品。 3. 紫外线杀菌法的使用及适用物品。 4. 消毒剂的杀菌机制及影响杀菌效果的因素。,自然界 土壤：芽胞菌 创口感染。水：伤寒杆菌、霍乱弧菌 消化道感染。空气：金葡、结核杆菌 呼吸道感染。 非致病菌 培养基污染。正常人体 体表与外界相同的腔道：正常菌群 条件致病菌感染。,第1节 细菌的分布,消毒、灭菌,消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 灭菌（sterilization）：杀死物体上所有微生物的方法。 无菌：不存在
2、活菌（微生物）的意思。 无菌操作（antiseptic technique）：防止微生物进入人体或其 他物品的操作技术。 防腐：体外防止或抑制细菌（微生物）生长繁殖的方法。 清洁：除去尘埃和污物以减少微生物数量的过程。,消毒灭菌的常用术语:,第2节 消毒与灭菌,例：外科手术内服抗生素 无菌操作接种环火焰烧灼 消毒火化 抑菌局部皮肤75%酒精擦拭 灭菌手术器械消毒前的浸泡 清洁,原理：破坏菌体蛋白质与核酸，使其肽链断裂，蛋白质变性凝固，核酸解链崩解，导致细菌死亡。,一、物理消毒灭菌法,1. 热力灭菌,原因 （1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性（2）湿热的穿透力比干热大（3）湿热的蒸汽有潜热效应,
3、湿热效力大于干热：,卷布灭菌试验,干热 湿热 加热温度 1401504h 1201.5h 卷布内温度 83 117,种类： 表 常用热力灭菌法,灭菌,干烤,干烤箱，热空气 160170C2h 电磁波热效应,灭菌灭菌,玻璃器皿等耐高温的物品 医疗器械,煮沸法,高压蒸气灭菌法,高压蒸气灭菌器 103.4Kpa(15磅/吋2/1.05Kg/cm2) 121.3C1520分钟,耐高温、耐湿物品 （基础培养基、生理盐 水、手术辅料等）,红外线,Autoclave（高压蒸汽灭菌器）,巴氏消 毒法,种类,效果,用途,湿热,巴斯德创用，61.162.830分钟，71.7 30秒钟（常用）,消毒（杀死病原菌，不
4、破坏营养成分）,牛奶，酒类,方法,流通蒸气 法,100 蒸气1530 分钟,消毒（杀死细菌 繁殖体，不杀死 芽胞）,不耐高温、高压物品,间歇灭菌 法,反复多次流动蒸气,灭菌,不耐高温、高压物品,Louis Pasteur （1822 1895）,：260266nm（最佳杀菌波长） 杀菌原理：使DNA上相邻的T碱基通过共价键结合成二聚体，干扰DNA复制与转录，导致细菌死亡。特点：穿透力弱，对皮肤、眼有损伤。适用范围：适用于空气和物体表面消毒。,2.辐射杀菌法,紫外线（ ultraviolet ray，UV）,如： -ray，-ray 机理：产生自由基及自由基离子 破坏微生物蛋白质、核酸、酶 死亡
5、。 适用物品：不耐热的物品(药品、一次性医用塑料制品),电离辐射,微波（microwave）,机理：热效应 特点：不能穿透金属。 适用物品：非金属物品、食品。,机理：用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌、 真菌，以达到无菌目的，但不能除去病毒、 支原体。 器具：滤菌器 适用物品：不耐高温物品（血清、毒素、抗生素）以及空气等的除菌。,3.滤过除菌法（filtration）,滤菌过程,滤瓶,抽气,压力表,滤器,空气过滤 过滤材料 过滤率,初级 塑料泡沫海绵 50% 中级 无纺布 5090% 高级 超细玻璃滤纸 99.9599.99%,空气除菌-生物洁净技术,层流空气,超净工作台,机理：通过液体时
6、产生空化作用（压力改变，形成空腔，逐渐增大 裂解细菌 死亡） 用途：主要用于粉碎细胞。,4.超声波灭菌法,5.干燥与低温抑菌法,冷冻真空干燥法：在低温状态下真空抽去水分。,用途：保存菌种,真空抽气机,压力表,吸水剂,菌种,冷冻剂,（1）使菌体蛋白变性和凝固 酚、醇、酸硷、醛类，重金属盐类（高浓度）。 （2 ）干扰细菌的酶系统及代谢（破坏-SH，酶失活） 氧化 剂、重金属盐类（低浓度）。 （3）损伤菌细胞膜 表面活性剂、酚类（低浓度）。,二、化学消毒灭菌法,1.消毒剂杀菌机理：,类别 作用机制 常用种类 酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸 醇类 蛋白变性 乙醇（70%75%） 氧化剂 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸碘酒 重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞 表面活性剂 改变细胞壁、膜通透性 新洁尔灭 染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫 烷化剂 菌体蛋白质及核酸烷基化 甲醛、烷氧乙烷,2.常用消毒剂的种类,3.常用消毒剂的应用,消毒剂,微生物,环境,性质,浓度,作用时间,种类,数量,有机物,温度,酸硷度,4.影响消毒剂作用的因素,1.简述湿热灭菌效果大于干热灭菌的原因。 2.比较（方法、效果、使用物品）常用的三种消毒灭 菌方法（煮沸法、高压法、紫外线法）。 3.简述化学消毒剂的杀菌机制。 4.简述影响消毒剂消毒灭菌效果的因素。,消毒、灭菌、无菌操作,复习题,
