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1、目录目录摘要摘要 1英文摘要英文摘要 1前言前言 11 1 实验材料及方法实验材料及方法 21.1 实验材料 21.1.1 实验菌种 21.1.2 培养基 21.2 实验方法 21.2.1 纳塔尔链霉菌的培养 21.2.2 真菌发酵液的制备 21.2.3 纳他霉素产量的测定 21.2.4 真菌发酵液添加时间对纳他霉素产量的影响 21.2.5 真菌发酵时间对纳他霉素产量的影响 21.2.6 真菌发酵液添加量对纳他霉素产量的影响 32 2 结果与分析结果与分析 32.1 纳他霉素标准曲线的制作 32.2 发酵液加入时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 32.2.1 产黄青霉发酵液加入时间对 N5
2、菌株纳他霉素产量的影响 32.2.2 黑曲霉发酵液加入时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 42.2.3 酿酒酵母发酵液加入时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 52.3 真菌培养时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 52.3.1 产黄青霉培养时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 52.3.2 黑曲霉培养时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 62.3.3 酿酒酵母培养时间对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 62.4 真菌发酵液添加量对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 72.4.1 产黄青霉发酵液添加量对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 72.4.2 黑曲霉发酵液添加量对 N5 菌株纳他霉素产量的影响
3、 82.4.3 酿酒酵母发酵液添加量对 N5 菌株纳他霉素产量的影响 83 3 讨论与结论讨论与结论 9参考文献参考文献 9致谢致谢 10真菌发酵液对纳塔尔链霉菌纳他霉素产量的影响真菌发酵液对纳塔尔链霉菌纳他霉素产量的影响摘要：纳他霉素是由纳塔尔链霉菌（streptomyces natalensis） 、褐黄孢链霉菌（streptomyces gilvosporeus） 、恰塔努加链霉菌（streptomyces chattanoogensis）等菌株发酵而产生的一种广谱抗真菌剂。因其低毒和极小改变食物本身味道可作为生物防腐剂。本实验通过在纳塔尔链霉菌 N5 菌株中添加真菌发酵液的方法提高菌株
4、纳他霉素的产量。实验结果表明产黄青霉、黑曲霉、酿酒酵母三种菌的发酵液均对纳塔尔链霉菌 N5菌株的纳他霉素产量有明显的促进作用。产黄青霉和黑曲霉培养 1d 时，其发酵液对 N5 菌株纳他霉素的合成促进效果最佳，而酿酒酵母在 3d 时促进效果最好，此时菌株纳他霉素产量较未加真菌发酵液处理样品高出约 1 倍。关键词：纳塔尔链霉菌 N5 菌株 纳他霉素 产黄青霉 黑曲霉 酿酒酵母 The effect of fungus fermented liquid on the output of Streptomyces natalensis natamycinAuthor: instructor: (200
5、9 College of life science of Anhui agricultural University-level biotechnology class 1, 09121012,)Abstract: Natamycin is a broad-spectrum antifungal agent generated by the fermentation of the streptomyces natalensis,streptomyces gilvosporeus,streptomyces chattanoogensis and other strains.It can be u
6、sed as biological preservatives because it has low toxicity and change food taste lightly.This experiment adopts the methods of adding Fungal fermentation broth to streptomyces natalensis N5 strains to improve natamycin production of the strains.The results reveal that Fermentation broth of Penicill
7、ium chrysogenum, Aspergillus niger, Saccharomyces cerevisiae can all improve Production of natamycin well.It has the best effect on the improvement of the synthesis of natamycin when Penicillium chrysogenum and Aspergillus niger are cultured for one day.However,Saccharomyces cerevisiae has the best
8、effect of improvement when culture for three days,and when the production of natamycin is one time higher than samples without treatment of fungal fermentation broth.Key words: natamycin productivity Penicillium chrysogenum Aspergillus niger Saccharomyces cerevisiae前言前言1955 年 struyk 等人首次从南非 natal 州土
9、壤中分离得到纳塔尔链霉菌（streptomyces natalensis） ，并发现该菌种可以产生一种内酯类抗生素，strnyk 将其命名为匹马菌素（pimaricin）1，后世界卫生组织将其统一命名为纳他霉素。该抗生素是一种二十六元多烯大环内酯类抗生素，主要由纳塔尔链霉菌（streptomyces natalensis） 、褐黄孢链霉菌（streptomyces gilvosporeus） 、恰塔努加链霉菌（streptomyces chattanoogensis）等菌发酵产生2。纳他霉素是一种高效、广谱的抗真菌剂，能有效抑制霉菌及酵母的生长，并能有效抑制丝状真菌中黄曲霉素的形成，可广泛应用
10、于食品保鲜及治疗真菌引起的疾病3。由于其分子上的疏水部分可以范德华力与细胞质膜上的甾醇分子结合，形成抗生素甾醇复合物，破坏细胞质膜渗透性，引起菌体细胞内电解质渗出，因而可导致菌体死亡，起到抑菌作用4。纳他霉素在室温下溶解度仅为 30-100mg/L，微溶于甲醇，易溶于稀酸、冰醋酸和二甲基甲酰胺，不溶于非极性溶剂5。一般认为，由于纳他霉素难溶于水和油脂，所以很难被消化和吸收，因此人体摄入的纳他霉素大部分会随粪便排出6。因为纳他霉素具有毒性低和不会对食品天然风味有较大改变的性质，美国食品及药物管理局(FDA)和我国卫生部已经先后于 1982 年与 1997 正式批准纳他霉素作为食品添加剂。迄今为止
11、纳他霉素已经在食品工业中得到广泛应用7。由于各种因素的制约，国内纳他霉素的主要来源至今仍然是从国外进口。限制我国自主生产纳他霉素的主要问题是菌株产量偏低，导致纳他霉素的生产成本过高。这已成为急需解决的问题。提高纳他霉素产量可以通过添加诱导子的方法。已有报道称一些微生物的发酵代谢物可产生某种诱导子调节其它微生物的次级代谢，促进其次级代谢产物的生成8,9,10。本实验将产黄青霉、黑曲霉、酿酒酵母的发酵液分别添加入纳塔尔链霉菌（streptomyces natalensis）发酵液中，研究不同真菌发酵液对该菌株纳他霉素产量的影响，以期提高菌株纳他霉素产量。1 实验材料与方法实验材料与方法1.1 实验材料实验材料1.1.1 菌
