《《药物分析》02第二章 药物的鉴别试验 (2)》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《药物分析》02第二章 药物的鉴别试验 (2)（36页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、药物的鉴别试验,Identification test of drug,第二章,药物的鉴别试验药物的杂质检查药物定量分析与分析方法验证,药品检验工作的基本规律,Basic regularity of drug inspection,Identification test of drug,鉴别试验的内涵鉴别试验的项目鉴别试验的方法鉴别试验的条件,药物的鉴别试验,根据药物的分子结构，采用化学、物理化学或生物学方法来判断其真伪。 鉴别试验用方法仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而非对未知物的鉴别。 鉴别试验方法应专属，每个品种一般23条。,鉴别试验的内涵,Test meanin
2、g,性状项和物理常数确认,鉴别项下规定的试验,原料药鉴别,制剂鉴别,鉴别试验的项目 Test items,性 状 （Description）,定义：反映药物特有的物理性质，如外观、溶解度和物理常数等。,外 观,溶解度,物理常数,外观：指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。如二巯基丁二钠的描述为“本品为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭”。 溶解度：一定程度上反映了药品的纯度。药品在不同溶剂中的溶解性能用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述。 物理常数：用于药品鉴别，反映其纯杂程度。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、
3、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。,性 状 （Description）,熔 点,性 状-,固体熔化成液体的温度,熔融同时分解的温度,自初熔至全熔的一段温度,物理常数,比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。用 表示。 吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。中国药典收载是 。这两种物理常数可用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。,性 状-,物理常数,依 据：某一类药物组成中的阴离子和阳离子的特殊反应或典型的有机官能团反应。 中国药典附录收载一般鉴别试验：丙二酰脲类、托烷生物
4、碱类、芳香第一胺类有机氟化物类、无机金属盐类、有机酸盐无机酸盐,General identification test,一般鉴别试验,1.有机氟化物类-取样品7mg，照氧瓶燃烧法进行破坏，用水20ml与0.01mol/l氢氧化钠6.5ml为吸收液，使燃烧完全后，充分振摇，取吸收液2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀释到4ml，加硝酸亚铈0.5ml，即显蓝紫色，同时做空白试验。 2.原理,一般鉴别试验,2.有机酸 2.1 水杨酸-A 取供试样品的稀溶液，加三氯化铁试液一滴，即显紫色；原理：水杨酸类与三氯化铁形成配位化合物，中性时是红色，酸性时是紫色。
5、B 取供试样品的中性溶液，加入稀盐酸，析出白色的水杨酸，分离，沉淀在醋酸铵中溶解。,一般鉴别试验,有机酸盐FeCl3 反应,碱式苯甲酸铁盐（赭色沉淀）,酒石酸盐-取供试样品的中性溶液，放于洁净试管中，加氨制硝酸银数滴，置水浴中加热，银即游离形成银镜。,芳香第一胺类-取供试样品50mg,加稀盐酸1ml，必要时缓缓加热使其溶解，放冷，加0.1mol/l亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚数滴，由样品不同形成由橙黄到猩红色沉淀。 原理：,一般鉴别试验,4.托烷生物碱-取供试样品10mg，加发烟硝酸5滴，置于水浴上蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇2-3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色； 原理：托烷类生物
6、碱有莨菪酸结构，可发生Vitali反应，水解后形成莨菪酸，经过发烟硝酸加热处理，转变为三硝基化合物，再与氢氧化钾醇溶液作用，转变为醌型产物而显紫色,一般鉴别试验,5.无机金属盐A。火焰燃烧-钠鲜黄钾紫，钙砖红钡黄绿。B。铵离子在强碱中变成气体，有氨的臭味；遇到被水浸润的红色石蕊试纸，使它变蓝；,一般鉴别试验,6.无机酸根 A。氯化物-取供试样品，加稀硝酸酸化，滴加硝酸银数滴，即生成白色凝乳状沉淀；沉淀加氨试剂溶解，再加稀硝酸酸化，沉淀复生成。但若是生物碱或其他有机碱又如何？ B。硫酸盐-取供试样品，加氯化钡试液即生成白色沉淀；沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解； C.硝酸盐-取供试样品，放于试管中，加
7、入等量硫酸，小心混合，冷却后沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两层液，接界面显棕色。,一般鉴别试验,依 据：药物分子中的特殊基团或官能团特殊反应或典型的有机官能团反应。如四氮唑法: C17位上有-醇酮基的药物,如皮质激素分析。,Specific identification test,专属鉴别试验,四、鉴 别 方 法,化学鉴别法,光谱鉴别法,生物学法,HPLC、GC鉴别法,薄层色谱鉴别法,纸色谱鉴别法,呈色反应鉴别法,紫外光谱鉴别法,红外光谱鉴别法,沉淀生成反应鉴别法,色谱鉴别法,气体生成反应鉴别法,测定生成物的熔点,荧光反应鉴别法,1.呈色反应鉴别法 指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进
8、行反应，生成易于观测的有色产物。 （1）三氯化铁呈色反应：用于酚羟基或水解后产生酚羟基 （2）异羟肟酸铁反应：多用于芳酸及其酯类、酰胺类 （3）茚三酮呈色反应：用于结构中含有脂肪氨基药物 （4）重氮化-偶合显色反应：用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基 （5）氧化还原显色反应及其它颜色反应,2.沉淀生成反应鉴别法,（1）与重金属离子的沉淀反应-如卤化物与银； （2）与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应（3）其它沉淀反应-苯甲酸的三氯化铁反应。,多用于生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐。,常用的荧光发射形式： （1）药物本身可在可见光下发射荧光； （2）药物溶液加硫酸后，在可见光下发射荧光如硫酸奎宁； （
9、3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；,3.荧光反应鉴别法,（4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。,（1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气。 （2）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体。 （3）含碘有机药物，经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。,4.气体生成反应鉴别法,紫外光谱鉴别法,对比吸收光谱特征参数max,A(C),E,比较吸收度比值一致性,对比吸收光谱一致性,红外光谱鉴别法,对比供试品红外吸收光谱与药品标准红外光谱
10、的一致性，尤其是指纹一致性。-制法，注意事项，原料药的IR，制剂的IR，ChP,JP,USP的不同,核磁共振法,测定结构中H和C的情况：化学位移、峰面积、耦合常数等,质谱法,将物质离子化后在高真空状态下，按离子的质荷比大小分离而实现物质成分和结构分析的方法。,三. 色谱法,1.TLC-Rf 2.HPLC-保留时间 3.GC-保留时间 4.PC-Rf,四. 显微镜法,主要用于中药及其饮片的观察结果与标品或文献对照。,五. 生物学法,1.利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定。 2.主要用于抗生素、生化药物以及中药3.有生物效器鉴别和基因鉴别法。,六. 指纹图谱与特征图谱法,1.整个药材的HPLC
11、谱； 2.主要成分的特征峰谱图。,（一）溶液的浓度 （二）溶液的温度 （三）溶液的酸碱度 （四）试验时间 （五）干扰成分的存在,第四节 鉴别试验条件,1、反应灵敏度和空白试验,六、鉴别试验的灵敏度（sensitivity）,最低检出量（minimum detectable quantity） 最低检出浓度（minimum detectable concentration） 空白试验（blank test）：在与供试品鉴别 试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。,（二）提高反应灵敏度的方法,加入与水互不相溶的有机溶剂提取浓集 在鉴别试验中，如生成物具有颜色并颜色很浅时，可利用加入少量与水互不相溶的有机溶剂，浓集有色生成物，使其在有机溶剂中颜色变深，易于观测。 2. 改进观测方法 如将目视观测溶液的颜色，改为可见分光光度法；将观测生成沉淀改为比浊度法等。,武汉工程大学 制药工程部,Thank You !,
