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1、培养液中酵母菌种群数量的变化,探究实验,单细胞真核生物 生长周期短，增殖速度快 还可以用酵母菌作为实验材料研究 探究酵母菌的呼吸方式,酵母菌,一、提出问题：,培养液中酵母菌种群是怎样随时间变化的？,二、作出假设：,酵母菌在培养基中进行培养时，由于食物，空间资源等是有限的，种群增长呈现“S”型曲线；后期因环境急剧恶化，种群逐渐消亡。,三、讨论探究思路,血细胞计数板(血球计数板),方法名称： 使用范围：,显微计数(抽样检测),调查细胞数量时； 肉眼看不见的细菌、酵母菌等微生物,问题一：怎样进行酵母菌的计数？,1、血球计数板的结构,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器，由一块比普通
2、载玻片厚的特制玻片制成的，玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。,方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。,大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm1mm0.1mm，其容积为0.1mm3；,大方格,中方格,小方格,16 （中格）25 （小格）,25（中格）16（小格）,3、血球计数板的分区与分格,不管计数室是哪一种构造，其每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,2、计数,1625型：一般取四角的四个中方格（100个小方格）计数,2516型：一般计数四个角和中央的五
3、个中方格（80个小方格）的细胞数。,例1 通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm1mm0.1mm方格，由400个小方格组成。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,2108,例2 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为01 mm3。,现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个mL。,5n1
4、05,3、计算,b表示培养液稀释倍数；用所数小方格中细胞总数/所数小方格数是为求得每个小方格中的细胞总数。,4、血球计数板的使用方法步骤, 计数：稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。, 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数。, 加样品：将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的
5、矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去。,从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。,问题二：从试管中吸出培养液进行计数之前，应该将试管轻轻震荡几次，为什么？,一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，加入成倍的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有45个酵母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。,问题三：如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应当采取怎样的措施？,对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。,问题四：对于压在小方格界限上的酵母菌，应当怎样计数？,
