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1、尿液分析技术和相关仪器,概述： 尿液分析是临床诊断泌尿系统的重要措施之一，通过对尿液的理化检查和尿沉渣有形成分的分析，对肾脏和尿路疾患的诊断、鉴别诊断以及预后判断都有重要的临床意义。,第一节 尿液分析仪,尿液自动分析仪的发展史 尿液分析仪的分类 尿液分析仪测试原理 尿液分析仪结构 安装、调校、维护 干化学检查与显微镜检查 干化学尿液分析技术操作的局限性 影响干化学检测结果的因素,一、自动尿液分析仪的发展史,干化学尿液分析仪是测定尿中某些化学成份的自动化仪器，是医学实验室尿液自动化检查的重要工具。 50年代即有人采用单一干化学试带法测定尿中蛋白质和糖。 尿液分析仪的出现给临床实验室尿液分析带来了
2、一个飞跃。,返回本节目录,一、自动尿液分析仪的发展史,60年代，世界上许多公司也开始研制生产尿液干化学试剂带，如德国宝灵曼公司于1964年推出COMBUR-TEST试剂带。 70年代，随着自动化程度不断的提高，半自动尿液分析仪的问世，替代了肉眼观察的结果，减少了人为误差，提高了检测的敏感度和特异性。,返回本节目录,一、自动尿液分析仪的发展史,到了80年代中期，由于计算机技术的高度发展和广泛使用，尿液分析仪的自动化才能得到迅猛发展，由半自动发展到全自动。 我国尿干化学试带的研制开始于60年代，1985年广西桂林医疗电子仪器厂从日本引进了当时先进的MA-4210型尿液自动分析仪和专用试剂带的生产技
3、术和设备，以后几年，经过我国专家的努力，于1990年达到了全部国产化。,返回本节目录,二、尿液分析仪的分类,按工作方式分类 按测试项目将尿液分析仪分类 按自动化程度将尿液分析仪分类,返回本节目录,二、尿液分析仪的分类,(一)按工作方式可分为 湿式尿液分析仪 干式尿液分析仪：干式尿液分析仪主要用于自动评定干试纸法的测定结果，因其结构简单、使用方便，目前临床普遍应用。,返回本节目录,返回知识点,二、尿液分析仪的分类,（二）按测试项目可分为 8项尿液分析仪 9项尿液分析仪 10项尿液分析仪 11项尿液分析仪,返回本节目录,返回知识点,二、尿液分析仪的分类,1. 8项尿液分析仪代表仪器：日本或国产的M
4、A4210型检测项目：尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿隐血、尿亚硝酸盐。,返回本节目录,返回知识点,二、尿液分析仪的分类,2. 9项尿液分析仪代表仪器：德国产的RL9型检测项目：尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白细胞。,返回本节目录,返回知识点,二、尿液分析仪的分类,3.10项尿液分析仪代表仪器：德国的MIDITRON型或美国的CLINITEK200型检测项目：蛋白、糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞、尿比密,返回本节目录,返回知识点,二、尿液分析仪的分类,4.11项尿分析仪代表仪器：美国的CLINITEK500型检测项目：
5、蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白细胞、比密、维生素C；,返回本节目录,返回知识点,二、尿液分析仪的分类,（三）按自动化程度可分为 半自动尿液分析仪：代表仪器是德国的MIDITRON型、美国的CLINITEK200型 全自动尿液分析仪 ：代表仪器是德国的SUPERTRON型、美国的CLINTEK AT-LAS型,返回本节目录,返回知识点,三、尿液分析仪测试原理,尿液分析仪的测试原理主要有以下三个方面： 尿液分析仪的试剂带原理 尿液分析仪检测原理 尿液分析仪计算原理,返回本节目录,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,试剂带原理 多联试剂带是将多种项目的试剂块集成在一个试
6、剂带，使用多联试剂带，浸入一次尿液可同时测定多个项目。它采用了多层模结构;,返回本节目录,返回知识点,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,多联试剂带结构图,返回本节目录,返回知识点,尼龙膜：防止大分子物质对反应的污染； 绒制层：包括碘酸盐层和试剂层： 碘酸盐层可以破坏维生素C等干扰物质， 试剂层含有试剂成分，主要与尿液中测定物质发生化学反应，产生颜色变化； 吸水层：可使尿液均匀快速的浸入，并能抑制尿液流到相邻的反应区； 塑料底层：作支持体。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,返回本节目录,返回知识点,另外，试剂带中还有另一个垫“补偿区”，作为尿液本底颜色，以对有色尿及仪器变化等产生的误差进行补偿
7、。 试剂带按一定的顺序排列，各个厂家不一样，尿液中的各种成分被各测定块吸收，引起化学反应及酶反应，使试剂块颜色根据尿液中各成分的比例而变化。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,返回本节目录,返回知识点,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,各项目测定原理表,返回本节目录,返回知识点,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,1、PH测定 :采用pH指示剂原理，常用甲基红和溴麝香草酚蓝组成的复合型指示剂，呈色范围从pH4.5pH9颜色由橘黄色、绿色变为蓝色，由此反映尿液的pH值。 2、尿蛋白质测定：利用pH指示剂蛋白质误差的原理。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,3、尿葡萄糖测定：当前有两种完全不同的检测
8、尿糖的方法，一种是基于葡萄糖氧化酶法原理，能特异地检出尿中的葡萄糖；另一种是基于铜还原法的原理，能检测葡萄糖和其他还原性物质。 4、尿酮体测定：采用亚硝基铁氰化钠反应测量酮体。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,5、尿隐血测定：利用游离血红蛋白、溶解红细胞或肌红蛋白中的血红素具有过氧化物酶样作用，能催化过氧化氢释放出新生态氧，使色原氧化而显色，其颜色深浅与血红蛋白含量有关。 6、尿胆红素测定：采用重氮反应法原理。 7、尿胆原测定：采用Ehrlich醛反应原理或重氮反应原理。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,8、尿亚硝酸盐测定：尿亚硝酸盐试验的化学基础是利用某些细菌能将尿中硝酸盐还原成亚硝酸盐
9、的特性。 9、尿白细胞测定：利用中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚生成吲哚酚和有机酸，吲哚酚可进一步氧化成靛蓝的原理；或吲哚酚和重氮盐反应成重氮色素而显色，颜色深浅与粒细胞量的多少有关。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,10、尿比密测定：基于某种预处理的多聚电解质在一定离子浓度溶液中pKa变化来测量比密。 11、尿维生素C测定：采用磷钼酸缓冲液或甲基绿与尿中维生素C进行反应，形成钼蓝，颜色由蓝色变成紫色，颜色深浅与尿中维生素C含量有关。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,试剂带的应用 不同型号的尿液分析仪一般使用自己配套的专用试剂带。试剂块要比测试项目多一个空白块，有些仪器还多一个位置参考块。各试
10、剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差，提高测量准确度而设置的。固定块是为了消除在测试过程中为免每次测定试剂块的位置不同产生测试误差设置的，每次测定前，检测头都会移到参考位置进行自检，必要时，自动调整发光二极管的亮度和灵敏度，以提高检测的信噪比。,干化学分析试带使用说明 操作人员必须仔细阅读试带性能和仪器的操作方法； 操作中应充分混匀新鲜尿液标本； 将试带全部迅速浸入尿液标本； 试带从标本中取出时，除去多余的尿液； 可疑结果必须进行确诊实验； 干化学实验结果应与理学、显微镜结果相关联。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,返
11、回本节目录,返回知识点,试带保存方法 ： 试带贮存在干燥、不透明、有盖的容器中，不能取出容器中的干燥剂； 放置于阴凉干燥的地方，不要放冰箱； 不能暴露于挥发性的烟雾中； 不能使用过期的试带，通常打开后6个月内用完，不能使用已褪色的化学试带。,（一）、尿液分析仪的试剂带的原理,返回本节目录,返回知识点,三、尿液分析仪检测原理,把试剂带浸入尿液中后，除了空白块外，其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关，颜色越深，相应某种成分浓度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率也越小；反之，反射率越大。因为颜色的深浅与光的反射率成比例关系，而颜色
12、的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系，所以只要测得光的反射率即可以求得尿液中各种成分的浓度。,三、尿液分析仪检测原理,尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。一种波长为测定波长，它是被测试剂块的敏感特征波长；另一种为参比波长，是被测试剂块不敏感的波长，用于消除背景光和其他杂散光的影响。各种试剂块都有相应的测定波长。,检 测 原 理 此类仪器一般用微电脑控制，将浸有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试带上已产生的化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波长光（包括通过滤光片的测定光和一束参考光）照射。测定每种试剂带块反射光的光量值与空白块的反
13、射光量值进行比较，通过计算机求出反射率，换算成浓度值，便可由分析仪打印出半定量的数值。,三、尿液分析仪检测原理,返回本节目录,返回知识点,三、尿液分析仪检测原理,各波长的比例由检测项目决定在几十秒钟(根据不同分析仪自己的设定时间而定)的反应时间内，各个项目(空白块不参加反应，只作标准参考用）的试剂带块由于化学反应而呈现颜色变化，并吸收照射的单色光，,返回本节目录,返回知识点,各波长的选择由检测项目决定，球面积分仪上有三个光电管和特定波长滤光片: 参比光为深红色滤片（720nm）。 在测量光电管中: 一个加有绿色滤光片（550nm）对亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原作测量。 另一个红色滤光片（62
14、0nm），对葡萄糖、蛋白质、PH和隐血作测量。,三、尿液分析仪检测原理,返回本节目录,返回知识点,三、尿液分析仪检测原理,仪器的检测过程为： 光源灯发出的光通过积分球照射在试剂带的膜块上。试剂带膜块颜色的深浅对光的吸收和反射是不一样的，颜色越深，吸收的光量值越大，反射光量值越小，则反射率越小。仪器按下列公式自动计算出反射率，然后与标准曲线比较，自动打印出各成分的相应结果。,返回本节目录,返回知识点,三、尿液分析仪计算原理,R(%):反射率 Tm:试剂垫对测定波长的反射强度 Ts:试剂垫对参考波长的反射强度 Cs:标准垫对参考波长的反射强度 Cm:标准垫对测定波长的反射强度,计 算 原 理,返回
15、本节目录,返回知识点,四、尿液分析仪结构和功能,尿液分析仪由：机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。,返回本节目录,四、尿液分析仪结构和功能,（一）机械系统主要功能是将待测的试剂带传送到位。检测后将试剂带排送到废物盒。,返回本节目录,（二） 光学系统,四、尿液分析仪结构和功能,返回本节目录,光学系统通常包括光源、单色处理、光电转换三部分。,（三）电路系统其作用是将光电检测器的信号进行放大和运算处理。,四、尿液分析仪结构和功能,返回本节目录,五、安装、调校、维护,安装条件:远离电磁干扰源、电源、防止阳光照射、防潮、通风好、温度1030，湿度80； 调校:新仪器安装后，或每次大维修之后，必须对仪
16、器技术性能进行测试，评价，这对保证检验质量起到重要的作用。,返回本节目录,日常应用和维护尿液分析仪的日常应用和维护: 每台尿液分析仪应建立操作程序，并严格按操作规程进行操作； 专人负责管理，健全专用的仪器登记本，对每天仪器操作的情况，出现的问题，以及维护，维修的情况予以登记；,五、安装、调校、维护,返回本节目录,每天开机测定前，要对仪器进行全面检查，测定完毕要对仪器进行全面清理保养； 做到每日、每周、每月的维护.,五、安装、调校、维护,返回本节目录,五、安装、调校、维护,一般评价程序1. 首先应该对尿液分析仪进行校正，校正的目的是让仪器进入厂商规定的状态。其操作是用标准的校正条对仪器进行测定 仪器的光路，状态进行校正，以达到最佳状态，有些厂家的校正条是一次性的，不能重复使用，以免影响试验结果，有些厂家的校正条可重复使用，尿液分析仪只有在校正通过时才能进行实验，否则要停机。,返回本节目录,2.应该对尿液分析仪及试纸条的准确度进行评价。准确度指的是测定值与真值的接近程度，由于尿液分析仪是一个半定量的仪器，因此它的准确度的评价只有根据仪器制造商规定的测定范围配制成一定浓度的标准物，在仪器上严格按说明书操作，每份标准物测定3次，观察测定结果与标准物浓度相符合程度。,
