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1、临床检验标本采集,1.检查患者 2.申请化验 3.患者准备 4.标本采集 5.标本运送,临床检验分析前质量控制,临床检验标本采集,血液标本的采集 尿液标本的采集 粪便标本的采集 脑脊液标本的采集 浆膜腔积液标本的采集 细菌学检验标本采集,血液样本的采集,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠 可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、 姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物 干扰因素： 溶血、脂血、胆红素 抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液 抗凝剂、细菌、真菌,标准餐后：TG50%；AST20%；胆红素、P、GLU15%
2、；ALT10%；尿酸、总蛋白、白蛋白、尿素、钙、钠、胆固醇5%饮食结构的不同, 对上述指标影响不同：高脂肪饮食会使甘油三酯大幅度升高；高蛋白饮食会使氨、尿酸和尿素值升高较多。饮酒后：TG、乳酸、UA、乙酸、醛固酮、肾上腺素：Glu、LDL-C饮咖啡(因)后： ：Glu、脂肪酸、血管紧张素、儿茶酚胺,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠 可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、 姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物 干扰因素： 溶血、脂血、胆红素 抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液 抗凝剂、细菌、真菌,剧烈运动后：k
3、、Ca、Na、 P、 Glu、UREA、UA、BiL、ALP、 AST、ALT、CK、乳酸等,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠 可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、 姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物 干扰因素： 溶血、脂血、胆红素 抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液 抗凝剂、细菌、真菌,应用青霉素对常见试验结果的影响 ：AST、CK、Cr、蛋白电泳、K(静脉注射青霉素钾盐)、血浆蛋白、尿蛋白、BUN、UA、尿17-KS ：血浆白蛋白、胆红素(新生儿)、HCT、Hb、RBC、PLT、K(静脉注射青霉素钠盐
4、)、WBC 应用VitC对常见试验的干扰 ：皮质激素、Crea、UA、17-OH、17-KS、AST、胆红素 ：CHO、Glu、LDH、TG、大便隐血试验阴性、PT缩短,1.影响临床检验结果准确性的因素,生物因素： 固定的生物因素：性别、年龄、种族、遗传、妊娠 可变的生物因素：营养、饮食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、 姿势、气候、采血时间、作息规律、治疗药物 干扰因素： 溶血、脂血、胆红素 抗凝剂、治疗药物及其代谢产物、输注液 抗凝剂、细菌、真菌,2.如何控制分析前的影响因素,（1）采血前的准备采血前禁食12小时，采血前应不喝茶、咖啡和酒，不吸烟避免剧烈运动一贯的体位在不服药期间采血在每一
5、天的同一时间采血,理想的采血时间是在早晨7至8点，最后一次食物和液体的摄入应在前一天下午6至7时；在早晨服药前采血；采集血样时患者应采取仰卧位。,（2）血液样本的采集使用真空采血管采血管的选择采血带的使用采血带使用时间在1分钟之内，大部分检验指标不受影响回血后应立即松开止血带避免反复握拳采血的顺序,让真空管充血致管内真空耗尽，血流自动停止,CLSI 国际标准真空采血管 充盈的标准,血流自动停止后，把真空管从持针器拔掉,先把真空管从持针器拔掉，然后拔采血针,马上把含添加剂的真空管摇匀5至10次,持針器,（2）血液样本的采集使用真空采血管采血管的选择止血带的使用止血带使用时间在1分钟之内，大部分检
6、验指标不受影响回血后应立即松开止血带避免反复握拳采血的顺序,CLSI真空採血順序,细菌培養 红 蓝 黃 綠 紫 灰 黑,生化免疫指标 凝血指标 生化免疫指標 生化免疫指標 血常規 血糖 血沉指標,采血量血液比例过高 由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微凝血块而阻塞仪器的采样针。血液比例过低 抗凝剂相对过剩 易溶血 样本量不足凝血功能检查血常规检查,凝血功能检查务必要求采血量准确,采用枸橼酸三钠抗凝 抗凝剂:血=1:9 采血量不足，PT、APTT明显延长,采血量血液比例过高 由于抗凝剂相对不足，血浆中出现微凝血块而阻塞仪器的采样针。血液比例过低 抗凝剂相对过剩 易溶血 样本量不足凝血功能检查血常规检
7、查,血常规检查,采用EDTAK2抗凝 EDTA在血中浓度达到2.5mg/ml时，中性粒细胞会肿胀，分叶消失，血小板会肿胀，崩解，影响血常规结果。 采血量1.5-2mL,采血部位避免在输液过程中采血！严禁在静脉输液侧采血!避免从留置血导管采血！ 静脉血生化、血常规、免疫等。 动脉血血气分析时,充分混匀，避免血凝！避免溶血！,造成溶血的因素,用力推血 采血不顺利 混匀过猛 运输 采血量不足 酒精未干 漏气 试管质量,推荐使用真空采血系统！,3.血液样本的运送,标本运送要注意防止标本外溢、蒸发和污染(标本管要盖盖子),应严密包装;有特殊要求的标本要按特殊要求运送(如血气分析标本应严格密封,与外界空气
8、隔绝;测定维生素A、维生素B6 、2胡萝卜素、胆红素等标本,应注意避免暴露于光线下,用黑纸或铝箔保护标本)。 血样应竖直放置 避免晃动血样, 产生溶血,快！,立即送检：血氨、血沉、血气、酸性磷酸酶、乳酸、各种培养 0.5h内：血糖、电解质、血液细胞学、体液细胞学、涂片找细菌、真菌 12h内：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体、尿液 超过2h，分离血清或血浆保存,特殊样本血气分析,1.标本要求 全血,以动脉血或动脉化毛细血管血为主 只有动脉血才能真实反映体内代谢氧化作用和酸碱平衡的状况 动脉血液的气体含量几乎无部位差异，从主动脉到末梢循环都是均一的 对O2检测的有关指标必须采集
9、动脉血，才能真正反映体内氧的运输状态 对PCO2和pH的检测也以采集动脉血为好。血液循环无障碍的病人，静脉血的这两项指标基本也可反映体液酸碱状况,特殊样本血气分析,动脉血： 部位：肱动脉、股动脉、前臂动脉以及其他任何部位的动脉均可 采血：专用的血气分析针采集 动脉化毛细血管血：指局部组织末梢经45温水热敷，使循环加速，血管扩张，局部毛细血管血液中PO2和PCO2值与毛细血管动脉端血液中的数值相近，此过程称为毛细血管动脉化 静脉血：静脉血所测结果不适用于了解体内O2的运输状态，故PO2及有关推算数据仅供参考，对pH及PCO2等酸碱平衡指标是适用的。采静脉血尽可能不使用止血带,特殊样本血气分析,3
10、.标本采集的注意事项 卧床5分钟 治疗过程中采血要特别注意病人所处的状态 肝素抗凝，冻干肝素优于液体肝素 注意防止血标本与空气接触 标本放置时间：按要求，采取的血标本应在30分钟内检测完毕，如30分钟后不能检测，应将标本置于冰水中保存，最多不超过2小时，在30分钟到2小时之间，血PO2值是个怀疑值，仅供参考,尿液标本的采集,晨尿或随机尿清洁、专用容器，避免经血、白带、精液、粪便等污染2h内送检 24h尿中段尿,24h尿留取方法,清晨8时排尿弃去；8时后的尿液全部收集于一个大的容器内（由检验科提供，预先加入防腐剂），至第二日晨8时，将最后一次尿液排入容器中。将全部标本混合均匀后，用量桶量取总量并
11、记于化验单之上，再从混合均匀的尿液中取出适量的尿标本送检。,晨尿或随机尿清洁、专用容器，避免经血、白带、精液、粪便等污染2h内送检 24h尿中段尿,中段尿留取方法,-四块肥皂饱和的纱布、四块干纱布、手套、无菌容器 -戴上手套、两腿分开站在抽水马桶前，用一只手分开阴唇 -用肥皂饱和的纱布从前到后擦洗生殖器区域4次 -用干纱布从前到后擦4次 -排尿入抽水马桶 -将盛尿容器置于尿流中 -将残尿排入抽水马桶晚上尽量憋尿，留取晨尿 2小时内处理，若不能及时运送，保存于4不超过6小时。,粪便标本的采集和送检,洁净、有盖、专用容器 不得混有尿液，不可有消毒剂及污水 不得用卫生纸包裹 留取10g以上（拇指大小
12、）粪便 重点留取黏液、脓血等肠脱落组织及可疑部位 外观无异常的粪便可在表面及内部不同部位取材 及时送检 查阿米巴滋养体应保温、快送,脑脊液标本采集,一般分3瓶收集 第一瓶作细菌培养 第二瓶作化学分析和免疫学检查 第三瓶作一般性状及显微镜检查（脑脊液常规） 每瓶收集12ml立即送检！,浆膜腔积液标本采集,浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。 胸水及腹水抽取10 mL，心包液、关节液等抽取25 mL。 一般检查分装于两试管中，一管加抗凝剂，另一管不加抗凝剂。 立即送检或置4冰箱保存。 抗凝剂为100g/L的乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）或肝素钠,其他,十二指肠液 胃液 精液 前
13、列腺液 白带 阴道/宫颈脱落细胞,细菌学检验标本采集及注意事项,总原则,无菌操作，有盖无菌容器，尽量不用棉拭子(咽喉及生殖道除外) 应把握采样时机，选择采样部位 应在使用抗生素前采集标本，如已经用药，需停药三天采集标本；如不能停药者，应在下次用药前采集 尽快送检，如不能及时送检应予冷藏保存(脑脊液、血培养瓶除外) 标本中不可添加防腐剂,血液及骨髓,血培养检测指征:发热（38）或低体温（36）；寒战； 白细胞增多，特别有“核左移”时 粒细胞减少 血小板减少；皮肤黏膜出血；昏迷和多器官衰竭等,血液及骨髓,1.采血时间 抗生素使用前采集；若已用药，应在下次用药前采集 细菌进入血流约1小时出现寒战、高
14、热，尽可能在寒战、高热前，或寒战、高热时立即采集。发热被抑制后，随时间延迟，检出率下降 若热型稳定，最好在发烧前采集 皮肤消毒，防止污染（毛囊内含有细菌，须待消毒剂发挥作用使细菌崩解后抽血，皮肤上有很多SCN） 含碘制剂需要足够消毒时间（碘酊、洗必泰30s，碘伏1.52m） 血培养瓶：瓶盖0.5%碘伏消毒30s1 min 标本采集：无菌操作，静脉采集，尽可能不经留置导管采集，避免污染；轻颠倒混匀防凝固；污染率应小于3%,血培养前10位病原菌,血液及骨髓,2.样本量：血培养 常规血培养包括需氧/厌氧各1瓶（1套） 成人每次20ml 30ml；儿童-ml；婴儿及新生儿尽量采集。每次采血均分至两瓶（
15、成人每瓶10ml；儿童每瓶1-3ml）。血量不足-先需氧瓶，剩余血接种厌氧瓶。 （减少1ml，阳性率降低35%） 建议每次采二套，最好三套（不同时间，不同部位）。骨髓培养：尽量采集(2ml)贴条码和标签：标签不可遮盖条码立即送检保存：备用瓶应置室温，绝不可放冰箱；,血液及骨髓,输液反应 血培养 剩余液体剩余液体很容易污染（经很多途径），有时浓度不高不足以致病。若只培养液体，很难说明是输液的原因。若血培养无，则不能说明是液体的原因。,血液及骨髓,血培养瓶（BD）的选择：灰色瓶盖-成人中和抗生素需氧瓶(10ml) 粉红色瓶盖-儿童中和抗生素需氧瓶(1-3ml) 金黄色瓶盖-中和抗生素厌氧瓶(10m
16、l),血液及骨髓,血培养瓶（BacT/Alert）的选择 黄色瓶盖-儿童中和抗生素需氧瓶(1-3ml)浅绿色瓶盖-成人中和抗生素需氧瓶(10ml)金黄色瓶盖-中和抗生素厌氧瓶(10ml)红色瓶盖分支杆菌培养瓶（10ml）,呼吸道标本,上呼吸道标本 清水漱口 将咽拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，或扁桃体上涂抹明显发红或伪膜存在的部位 避免触及舌，口腔粘膜和唾液 下呼吸道标本 晨痰：用清水反复嗽口后用力自气管深部咳出当日第一口浓痰，于带盖无菌杯中，尽快送检,中段尿培养,见前,其他标本,脓 液 及 伤 口 70%的酒精消毒,无菌生理盐水冲洗 若是开放式脓肿或伤口，用棉拭子擦入脓肿深部边缘采样，因为脓肿表面可能混合有污染的细菌 如是封闭式脓肿，用注射器抽吸脓肿壁边的脓液 浆膜腔积液：无菌抽取胸水腹水510ml；心包液和关节液抽15mL，直接用注射器加盖送检或打入血培养瓶中送检 脑脊液:必须立即送检，注意保温!,
