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1、,二、试验原理,维生素C含量的定量测定一一2,6二氯酚靛酚滴定法实验目的掌握用2,.6-二氛酚靛酚滴定法测定维生素C含量的原理和方法。实验原理*维生素C(抗坏血酸)属水溶性维生素,是人类营养中最重要的维生素之一,缺乏时得坏血病。它睿泛存在于植物中,尤以蔬菜和水果中含量中富*维生素C有强的还原性,在中性和微酸性环境中它能将呈蓝色的染料2,6一二氯酚靛酚还原成无色的还原型2,6一二氰酚靛酚,同时自身被氧化成脱氢抗坏血酸。3(7*氧化型的2,6一二氮酚靛酚在酸性溶液中呈红色,在中性或酸性溶液中呈蓝色。*所以,当用2,6一二氮酚靛酚滴定含有抗坏1酸的酸性溶液时,在抗坏血酸全部被氧化后,再滴下的2,6一
2、二氰酚靛酚将立即使溶液呈淡纫倡;劝而显丿到达洪定线炉。如无其他杂质于扰,样品提取液所还原的标准染管量与样品口所含的还原型抗坏血酸量成正t。实验材料、仪器和试剂$实验村料:白菜叶*仪器:*()50mL三角瓶4个*(2)容量瓶50mL1个*(3)大离心管1企4(4)20fatL鬣筒4个夙(5)移液管10mL2支*(6)离心机(7)研锆*(8)滴定管(碱式)1支学之余试剂:(11%草酸(22%草酸$(3标准维生素C溶液(0005mg/mL)准确称取维生素C20mg,用15%4草酸定容至200mL。吸又此液10mL,以1%草酸稀释定容至200mL。临用时配,冰箱中贮存。皋0.0005Ing,/mL2,
3、6一工氯酝酞溶液;称取森的2:6一-一霹酚嬴酚铂60mg,bb放入200mL容量瓶中,LNaOH4-5滴,强灯摇动10度。mL,滴加0.01mg/m分钟,冷却后加水至奉色瓶中。贮讲箱中备用,加热燃馏水100一150摇匀后用滤纸过滩于棕有教朝一周,佬用前标定PM3(7学之余试剂:(11%草酸(22%草酸$(3标准维生素C溶液(0005mg/mL)准确称取维生素C20mg,用15%4草酸定容至200mL。吸又此液10mL,以1%草酸稀释定容至200mL。临用时配,冰箱中贮存。皋0.0005Ing,/mL2,6一工氯酝酞溶液;称取森的2:6一-一霹酚嬴酚铂60mg,bb放入200mL容量瓶中,LNa
4、OH4-5滴,强灯摇动10度。mL,滴加0.01mg/m分钟,冷却后加水至奉色瓶中。贮讲箱中备用,加热燃馏水100一150摇匀后用滤纸过滩于棕有教朝一周,佬用前标定PM3(7*标准液滴定:准确服取标准维生素C溶液(0.005mg/ml)10mL,放入50mL三角瓶中,同时吸取10mL15f草酸于另一个50mL三角瓶中作空白对照,用己标定的2,6一二氯酚靛酚滴定至粉红色出现,15秒不消失为止,记录所用毫升救。计算每mL2,6一二氰酚靛酚所能氟作抗坏血聘的mg数.4样液滴定:准确吸取样液两份,每份10.0mL分别放人二个50mL锥形瓶中,用标定过的2,6一二氯酚靛酚滴定,空自滴定方法同前。M3(7
5、“计算:义每100g样品中抗坏血CV-VoK酸mg数=一一一W*V二滴定样液所用去染料mL数;sVo=滴定垂自所用去梁租mL改!#K=1mL2,6一二氨酚靛酚所能氧化抗坏血酸的mg数;2W=10mL样液相当于含样品的克数。ETdTH注意事项*1.滴定过程宣迅速进行,一般不应超过2分钟。滴定所用围,见染料应在1-4毫升之间,若滴定结果超出此范必须增减样品量或将提取液适当稀释。2,2%草酸可抽制抗坏血酸氧化酶,1%草酸则不能,偏磷陡忠有佐样功效乙苹佩品中吾有大量Fe2+可用8%醋酸温液提取。Fe2+能还原2,6一二氰酚靛酚。外3.如浆状物泡沫很多,可加数滴辛醇或丁醇仁4.样品提取液应避免日光直射。M3IT
