分子生物补充复习题

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1、分子生物化学补充复习题:1、核酸可以分为哪二类,各自的主要分布场所?核酸分脱氧核糖核酸和核糖核酸两类,DNA 主要分布在细胞核的染色质中(占95%),线粒体和叶绿体中也有(占5%)。 RNA90%主要在细胞质中,10%存在与细胞核中。rRNA 主要存在于核糖体。2、核酸分子杂交和探针?分子杂交 (molecular hybridization )指具有一定同原序列的两条核酸单链(DNA 或 RNA)在一定条件下通过碱基互补配对原则经退火处理形成异质双链的过程。探针:已知序列的单链核酸片段3、什么叫变性和复性?变性( denaturation )是指当核酸溶液受到某些物理或化学因素的影响,使核酸

2、的双螺旋结构破坏,氢键断裂,变成单链,从而引起核酸理化性质的改变以及生物功能的减小或丧失。复性 (renaturation): 导致变性的因素解除后,因变性而分开的两条单链即可再聚合成原来的双螺旋,其原有性质可得到部分恢复。此即为DNA 复性。4、Southern Blotting? 5、Northern Blotting?6、 Western Blotting?Southern Blotting 杂交是指DNA 与 DNA 的杂交。 Northern Blotting杂交是检测RNA的杂交。Western blotting 又称为蛋白质印记或免疫印记。7、熔解温度 (melting temp

3、erature, Tm)?指 DNA 双螺旋结构解开一半时的温度,决定于C-G碱基对的比例和DNA 变性条件。8、A、T、 G、C、U 的结构式?9、限制性内切酶?10、简述嘌呤核苷酸的分解代谢途径?腺嘌呤核苷酸及鸟嘌呤核苷酸有相应的5” -磷酸化酶催化,加水脱磷酸生成腺苷。腺苷经腺苷脱氨酶核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤,次黄嘌呤经黄嘌呤氧化酶作用变为黄嘌呤,鸟苷经核苷磷酸化酶作用生成鸟嘌呤,鸟嘌呤经鸟嘌呤脱氨酶作用生成黄嘌呤(嘌呤分解代谢共同中间产物),黄嘌呤经黄嘌呤氧化酶作用变为尿酸。11、简述嘧啶核苷酸的分解代谢途径?首先通过核苷酸酶及核苷磷酸化酶的作用,分别除去磷酸和核糖,产生的 嘧啶碱

4、 再进一步分解。嘧啶的分解代谢主要在肝脏 中进行。分解代谢过程中有脱氨基、氧化、还原及脱羧基等反应。胞嘧啶脱氨基转变为尿嘧啶。尿嘧啶和胸腺嘧啶先在二氢嘧啶脱氢酶的催化下,由NADPHH供氢,分别还原为二氢尿嘧啶和二氢胸腺嘧啶。二氢嘧啶酶催化嘧啶环水解,分别生成 丙氨酸 (alanine)和-氨基异丁酸 (aminosiobutyrate) 。丙氨酸和 氨基异丁酸可继续分解代谢。-氨基异丁酸亦可随尿排出体外。尿嘧啶最终生成NH3、CO2及-丙氨酸。胸腺嘧啶降解成-氨基异丁酸。12、简述嘌呤核甘酸与嘧啶核苷酸合成的异同点?嘌呤核苷酸与嘧啶核苷酸从头合成过程中,嘌呤核苷酸合成的原料是天冬氨酸、谷氨酰

5、胺、甘氨酸、 CO2、一碳单位和PRPP 。在 5-磷酸核糖分子基础上逐步加合先形成嘌呤环,再逐步形成 IMP,再转变成AMP 、GMP。主要在肝脏,其次是小肠黏膜和胸腺细胞合成。终产物 IMP AMP GMP 抑制 PRPP合成酶和PRPP酰胺转移酶 . 嘧啶核苷酸的合成原料是天冬氨酸、谷氨酰胺、CO2、PRPP 、一碳单位、 (仅胸苷酸合成),在形成氨基甲酰磷酸的基础上先形成嘧啶环,再与磷酸核糖结合形成嘧啶核苷酸,其产物UMP 反馈抑制氨基甲酰磷酸合成酶II。PRPP合成酶即影响嘌呤核苷酸合成也影响嘧啶核苷酸合成。13、简述嘌呤及嘧啶的补救合成途径及其意义?大多数细胞更新其核酸(尤其是 R

6、NA)过程中,要分解核酸产生核苷和游离碱基。细胞利用游离碱基或核苷重新合成相应核苷酸的过程称为补救合成。与从头合成不同,补救合成过程较简单, 消耗能量亦较少。由二种特异性不同的酶参与嘌呤核苷酸的补救合成。腺嘌呤磷酸核糖转移酶催化PRPP与腺嘌呤合成AMP. 人体由嘌呤核苷的补救合成只能通过腺苷激酶催化,使腺嘌呤核苷生成腺嘌呤核苷酸。嘌呤核苷酸补救合成是一种次要途径。其生理意义一方面在于可以节省能量及减少氨基酸的消耗。另一方面对某些缺乏主要合成途径的组织,如人的白细胞和血小板、脑、骨髓、脾等,具有重要的生理意义。14、简述嘧啶核苷酸的从头合成调节上微生物与哺乳动物的差异?在细菌中,天冬氨酸氨基甲

7、酰转移酶(ATCase) 是嘧啶核苷酸从头合成的主要调节酶。在大肠杆菌中,ATCase受 ATP的变构激活, 而 CTP为其变构抑制剂。 而在许多细菌中、 UTP是 ATCase的主要变构抑制剂。在动物细胞中,ATCase不是调节酶。嘧啶核苷酸合成主要由CPS- 调控。 UDP 和 UTP抑制其活性,而ATP和 PRPP为其激活剂。第二水平的调节是OMP脱羧酶, UMP 和 CMP为其竞争抑制剂。此外, OMP 的生成受PRPP的影响。15、什么叫外显子和内含子? 内含子: DNA及 hnRNA 分子中的能转录而不能编码氨基酸的序列。外显子: DNA及 hnRNA 分子中的能转录又能编码氨基酸

8、的序列。16、什么叫管家基因和奢侈基因?奢侈基因 (Luxury gene):即组织特异性基因(tissue-specific genes),在高等生物中,奢侈基因选择性表达,所以它只在特定的细胞内表达。(例如血红蛋白基因只在血细胞内表达,所以血红蛋白基因便是奢侈基因。) 管家基因 (house-keeping genes):在所有细胞中都能表达的基因,与细胞分化无关,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。如微管蛋白基因、 糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。17、什么叫基因家族?定义:真核细胞中,许多相关的基因常按功能成套组合,被称为基因家族。特点: 是具有显著相似性的一组基因,编码相似的蛋

9、白质产物。同一家族中的成员有时紧密的排列在一起, 成为一个基因簇;更多的时候,它们却分散在同一染色体的不同部位,甚至位于不同染色体上,具有各自不同的表达调控模式。18、什么叫进化钟?某一蛋白在不同物种间的取代数与所研究物种间的分歧时间接近正线性关系,进而将分子水平的这种恒速变异称为“分子钟”。分子进化钟。19、遗传信息传递的中心法则? 是指遗传信息从DNA 传递给 RNA,再从 RNA 传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA 传递给 DNA,即完成 DNA 的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA 自我复制(如烟草花叶病毒等)和在某些病毒中

10、能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)是对中心法则的补充。20、DNA 的二级结构?DNA 双螺旋结构21、DNA 双螺旋结构的稳定性因素? 碱基堆积力是使DNA 结构稳定的主要因素氢键 AT之间有两条氢键,CG之间由三条氢键,GC对含量越多, DNA 分子越稳定相反电荷的稳定作用磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子形成离子键,有效屏蔽静电斥力。22、DNA 复制的基本原则? DNA 的半保留复制,半不连续复制方式,需要RNA作为引物和复制通常双向进行。23、原核生物DNA复制的基本方式? 型复制、滚环复制、D 环复制24、什么是端粒酶?细胞中有种酶负责端粒的延长,其名为端粒酶。含

11、有一个RNA 分子和具有催化活性的蛋白质,是一种反转录酶。25、诱发突变主要包括哪些因素? 诱发突变( induced mutation) :诱变剂诱发的突变(一)物理诱变1、电离: x 射线a 射线b 射线质子中子2、非电离:紫外线加热(二) 化学诱变1.碱基类似物如:5-溴尿嘧啶( 5-bromouracil,5-BU );氨基嘌呤(2-aminopurine 2-AP );迭氮胸苷( AZT, azidothymidine)2.碱基的修饰剂:亚硝酸( introus acid, NA );羟胺;烷化剂,它们的作用是使碱基烷基 化3.DNA 插入剂:原黄素( proflavin );吖啶橙

12、( acridine orange);溴化 3,8-二氨基 -5-乙基 -6-苯基菲啶鎓etnidium bramide );ICR的复合物等。26、什么叫位点特异性重组? 位点特异性重组是在专一酶的作用下,在DNA 特定为电商发生的断裂和重接,从而产生精确地 DNA 重排方式。其只发生在特殊DNA 区域,有短的同源顺序,供重组蛋白识别。27、什么叫转座子? 转座子又称跳跃因子,是存在于染色体DNA 上可自主复制和位移的基本单位,其实质是基因组上不必借助于同源序列就可引动的DNA 片段,他们可以直接从基因组内的一个位点移到另一个位点。28、遗传多样性的检测方法有哪些?形态学标记,细胞学标记,生

13、化标记,分子标记30、真核生物转录的基本过程?31、什么是RNA聚合酶?RNA聚合酶 (RNA polymerase):在 RNA合成过程中指导NTP同模板 DNA 或模板 RNA碱基配对,并催化磷酸二酯键的形成的一类酶。32、什么是DNA 聚合酶?DNA 聚合酶是以脱氧核苷酸三磷酸为底物,沿模板的35方向, 将对应的脱氧核苷酸连接到新生 DNA 链的 3端,使新生链沿53方向延长的一类酶。33、简述原核基因组与真核基因组有那些异同。DNA 链; 4催化 dNTP加到生长中的DNA 链的 3-OH 末端; 5催化 DNA 合成的方向是5区别:1、真核生物基因组指一个物种的单倍体染色体组(1n)

14、所含有的一整套基因。还包括叶绿体、线粒体的基因组。原核生物一般只有一个环状的DNA 分子,其上所含有的基因为一个基因组。2、原核生物的染色体分子量较小,基因组含有大量单一顺序(unique-sequences), DNA仅有少量的重复顺序和基因。真核生物基因组存在大量的非编码序列。包括:.内含子和外显子、 .基因家族和假基因、重复DNA序列。真核生物的基因组的重复顺序不但大量,而且存在复杂谱系。3、原核生物的细胞中除了主染色体以外,还含有各种质粒和转座因子。质粒常为双链环状 DNA,可独立复制,有的既可以游离于细胞质中,也可以整合到染色体上。转座因子一般都是整合在基因组中。真核生物除了核染色体

15、以外,还存在细胞器DNA,如线粒体和叶绿体的DNA,为双链环状,可自主复制。有的真核细胞中也存在质粒,如酵母和植物。4、原核生物的DNA 位于细胞的中央,称为类核(nucleoid )。 真核生物有细胞核,DNA 序列压缩为染色体存在于细胞核中。5、真核基因组都是由DNA 序列组成,原核基因组还有可能由RNA组成,如RNA病毒。34、原核生物启动子的结构特点?有三个功能部位:一个是起始部位,此处有转录生成的RNA 链中第一个核苷酸互补的碱基对。 另一个是再转录起点上游-10 碱基对处有一段富含A-T碱基对的TATAAT 序列,称 Pribnow框。还有一个是识别部位,其位置在-35 碱基对附近

16、,序列特征为TTGACA ,这是 RNA聚合酶的初始识别部位。35、什么叫核酶?是指一种可以催化特定生化反应的RNA分子,具有酶的特性,能自我催化分解。36、什么是密码子?什么叫起始密码子和终止密码子?在 mRNA 的开放阅读框架区,以每三个相邻的核苷酸为一组,代表一种氨基酸或者起始和终止信号,这种三联体形式的核苷酸序列称为密码子。共有64 个密码子,阅读方向是5-3起始:编码甲硫氨酸的密码子同时也作为多肽链合成的起始信号,多为AUG 终止:不编码任何氨基酸,只作为肽链合成终止信号,有UAA、UAG、UGA等。37、RNA主要有哪几类?各自的功能?RNA 主要有mRNA、rRNA、tRNA 三种: mRNA 是合成蛋白质多肽链的直接模板,其开放阅读框架内每相邻的三个核苷酸组成密码子,他们代表氨基酸或肽链合成的起始终止等信号。 rRNA与多种蛋白质分子构成核蛋白体,是蛋白质的合成场所。tRNA 是氨基酸的运载体, tRNA 即可通过其反密码子与mRNA 序列中的密码子结合,又可借助其氨基酸臂与氨基酸结合,因而能够按m

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