中药镇痛药效研究ppt培训课件

《中药镇痛药效研究ppt培训课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《中药镇痛药效研究ppt培训课件（97页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、中 药 镇 痛 药 效 研 究,痛,是一种因实际的或潜在的组织损伤而产生的痛苦感觉，常伴有不愉快的情绪或心血管和呼吸方面的变化,1、物理刺激：压力、烧灼、低温、切割、强光等 2、化学刺激：强酸、强碱、刺激性物质 3、生物因素：寄生虫、细菌感染、炎症等 4、病理状态：瘀血、缺血、缺氧、水肿、肿瘤、内脏牵拉等,诱导痛觉产生的外部因素,痛的时候发生了什么,疼痛的调控,疼痛感受器,传入神经,谷氨酸,神经肽类,中枢,疼痛,有哪些痛,疼痛的分类,躯体痛,神经痛,内脏痛,锐痛,钝痛,哪些药可以解决痛,中枢性镇痛药 抗炎镇痛药 局部麻醉药 全身麻醉药,镇静催眠药 抗抑郁药 抗癫痫药 中药 ,如何解决痛,中枢性

2、镇痛药 抗炎镇痛药 局部麻醉药 全身麻醉药,镇静催眠药 抗抑郁药 抗癫痫药 中药 ,镇痛部位：脊髓胶质区，丘脑内侧第三脑室、第四脑室导水管周围灰质阿片受体与镇痛有关。 镇痛作用机理：吗啡（阿片类药物）通过与不同脑区的阿片受体结合，激动阿片受体，摸拟内源性阿片样物质作用而发挥镇痛效应。,中枢性镇痛药镇痛机制,抗炎镇痛药镇痛机制,局麻药作用机制,局麻药,以非解离型进入膜内,阻断Na+通道,解离型作用在神经细胞膜的内表面,与Na+通道的一种或多种特异性结合位点结合,阻断神经冲动的发生和传导,产生局麻作用,全麻药,与GABAA受体上特殊位点结合,提高GABAA受体对GABA 的敏感性,增加CL-通道开

3、放,细胞膜超极化,引起全身麻醉,中枢抑制,全麻药作用机制,镇静催眠药作用机制,苯二氮卓类,痛与抑郁, 通常并存的疾病,慢性痛 抑郁的症状 Blumer and Heilbronn 1981, Pain a variant of depression 抑郁 慢性痛的转归 Wrz 1977, The algogenic psychosyndrome 痛与抑郁 共同的病理心理学机制,在病程和治疗中的相互作用 Keefe et al. 1986, Hautzinger 1999 抑郁对痛的治疗预后有负面影响 Fordyce 1976, Blanchard et al. 1982 预防疾病的进展:建议同

4、时治疗痛与抑郁,抗癫痫药作用机制,膜稳定作用,增强GABA介导的中枢抑制作用,元胡作用机制,可能与阻断脑内多巴胺受体及促进内源性阿片肽的释放有关。,如何研究痛与镇痛,镇痛药实验研究方法,（一）镇痛药药效实验研究方法,实验动物,可选择小鼠、大鼠、家兔等,疼痛模型,1、细胞模型,原代感觉神经元细胞培养体外疼痛模型,永生化神经元细胞疼痛模型,（1）原代感觉神经元细胞培养体外疼痛模型,原 理：感觉神经元受到伤害性刺激后,会释放出神经肽类物质（P物质、降钙素基因相关肽）,方 法：原代培养感觉神经元，9-12天后，在培养基中加入不同浓度的前列环素E2，孵育一段时间（10min）后，可以检测神经肽类物质的含

5、量。,应 用：研究疼痛的细胞和分子水平信号传导机制，同时可用于高通量药物筛选。,（2）永生化神经元细胞疼痛模型,原理：将包含癌基因的逆转录病毒转入人胚胎背根神经节的感觉神经前体细胞。,特点：与原生代比，生长稳定，增殖迅速，能分裂传代，不易发生自动转化，并能长期保存，因而体外培养较为容易，方法简便。,应用：疼痛机制研究及药物筛选。,2、器官模型,离体豚鼠回肠肌解痉实验,外周阿片受体测定,离体豚鼠回肠实验,离体输精管实验,（1）离体豚鼠回肠肌解痉实验,原理：通过观察受试物对乙酰胆碱、氯化钡、组胺所致离体豚鼠回肠痉挛的影响，观察受试物的解痉作用。,应用： 研究受试物对离体组织器官的解痉镇痛效应。,（

6、2）外周阿片受体测定,1）离体豚鼠回肠实验,原理：阿片类镇痛药作用于回肠上阿片受体，阻断回肠胆碱能神经末梢释放Ach，从而抑制电刺激标本引起的收缩。通过测定受试物对回肠收缩力的作用，观察受试物的激动和拮抗性质并测出作用强度。 应用：研究受试物和阿片受体作用机制。,2）离体输精管实验,原理：阿片类镇痛药作用于输精管上阿片受体，阻断肾上腺素能神经末梢释放NE，从而抑制电刺激标本引起的收缩。通过测定受试物对输精管收缩力的作用，观察受试物的激动和拮抗性质并测出作用强度。 应用：研究受试物和阿片受体作用机制。,3、理化刺激性疼痛动物模型,化学刺激法 热刺激法 冷刺激法 机械致痛法 电刺激法,（1）化学刺

7、激法,小鼠扭体实验 家兔钾离子皮下透入致痛实验 缓激肽局部作用的拮抗实验 痛介质诱发感觉神经放电模型,小鼠扭体实验,把化学刺激剂（如醋酸）注入小鼠腹腔内，由 于刺激脏层和壁层腹膜，引起深部的、大面积而持 久的疼痛刺激，诱发深部广泛的腹膜炎造成腹壁肌 肉紧张、炎性疼痛，小鼠表现出典型的腹部肌肉收 缩，同时伴有一侧后肢外伸的躯体伸缩特征性的行 为反应，为扭体反应。注射后15分钟内出现扭体反应频率为高。故以15 分钟内出现扭体反应次数或反应鼠数为疼痛定量指 标。,家兔钾离子皮下透入致痛实验,原理：局部组织受损时，组织释放的钾离子 为一种致痛物质，当钾离子浓度达到10- 15mmol/l时即可致痛。

8、由于输入电流强度与钾离子透入及其引起的 疼痛反应呈正比，故给药后电流强度的变化 直接反映受试药物镇痛作用强弱。,缓激肽局部作用的拮抗实验,牙髓受到电、化学、机械等刺激时会产生致 痛物质缓激肽，同时，牙髓组织中也产生内 源性激素样物质脑啡肽。生成的脑啡肽可在 局部拮抗缓激肽的致痛及致炎反应。,痛介质诱发感觉神经放电模型,致痛因子对外周痛神经末梢感受器的刺激可 诱发痛传入电位的产生。在痛神经上可记录 到传入神经放电，该传入神经放电的数量多 少与疼痛程度呈正相关，可作为疼痛的一种 指标来评价局部或外周镇痛药的作用。 因此，从局部动脉注入致痛因子可诱发感觉 神经放电，而在局部动脉中注入镇痛药物可 抑制

9、放电的发生。,（2）热刺激法,小鼠热板实验 小鼠光辐射热甩尾实验 大鼠光辐射热甩尾实验,小鼠热板实验,将小鼠置于一定温度的热板上，热刺激小 鼠足部产生痛反应，即舔足反应。以小鼠出 现舔足的时间作用为痛反应指标，判断药物 是否具有镇痛作用。,小鼠光辐射热甩尾实验,固定小鼠，使小鼠尾光照点与测痛仪聚光灯 灯孔重合，以一定强度光束直接照射在小鼠 尾尖1/3处，鼠尾局部升温，产生热刺激，当 其尾部受到的伤害性刺激超过动物忍耐的痛 阈时，引起小鼠甩尾反应，以小鼠甩尾作为 痛反应指标。记录自光照开始到甩尾反应的 时间作为痛阈值。,大鼠光辐射热甩尾实验,应用光辐射热测痛仪发出的光辐射热的焦点落在大鼠尾尖1/

10、3处，以受热点刺激后引起大鼠甩尾反应作为痛反应指标。指标为甩尾反应时间，反应动物对此伤害刺激的耐受能力。,（3）冷刺激法,冷板诱发的痛觉超敏实验 丙酮诱发的痛觉超敏实验 冷板诱发的甩尾反射实验,冷板诱发的痛觉超敏实验,利用4摄氏度金属冷板作为刺激，诱发病理性 痛模型，动物出现以抬爪为主要表现的痛觉 超敏现象，给药后抬爪次数的变化可直接反 映受试药物镇痛作用的强弱。,丙酮诱发的痛觉超敏实验,利用丙酮挥发过程吸收热量引起的冷刺激， 诱发动物出现以缩足反应为主要表现的疼痛 反应，给药后缩足反应次数或潜伏期的变化 可直接反映受试药物镇痛作用强弱。,冷板诱发的甩尾反射实验,利用冷水浸尾诱发动物出现以甩尾

11、反射为主 要表现的疼痛反应，给药后痛阈的变化可直 接反映受试药物镇痛作用强弱。,（4）机械刺激法,Haffner夹尾实验 大鼠结直肠扩张内脏痛模型 大鼠尾尖部压痛实验 大鼠压足实验 小鼠尾根加压实验 落重模型,Haffner夹尾实验,将动脉夹夹在小鼠尾根部（距身体1cm）致 痛，小鼠迅速对这一伤害性刺激作出反应， 如咬夹子等，用秒表记录刺激与反应间隔时 间，以其为痛阈指标，以正常情况下小鼠刺 激与反应间隔时间作为基础痛阈，评价药效。,大鼠结直肠扩张内脏痛模型,经肛门插入可扩张的气囊，注气后扩张结直 肠引起内脏伤害性刺激，从而建立内脏痛动 物模型，用以评价各种镇痛药物的镇痛效果。,大鼠尾尖部压痛

12、实验,通过压痛仪匀速增加压力，当机械加压超出 大鼠痛耐受的阈值时出现缩尾、全身退缩反 应等痛反应，以出现缩尾、全身退缩反应等 痛反应时压痛仪上的压力值为痛阈值。,大鼠压足实验,通过压力测定仪给大鼠后足部施加连续的压 力作为伤害性刺激，当压力达到痛阈水平 时，动物产生后足退缩反应，以此时的压力 为大鼠的痛阈，通过比较痛阈变化的百分率 来评价药物的镇痛作用。,小鼠尾根加压实验,将小鼠的鼠尾放至小鼠尾根加压装置的钢丝 上，通过微调旋钮缓慢下移加压杆，压力自 受压钢丝垂直传至自动计量仪，当机械加压 达到一定程度时，以小鼠出现缩腿或作全身 退缩反应作为疼痛反应指标，从计量仪上读 取的数值（g）为鼠尾承受

13、的压力，此时的压 力为痛阈值。计算痛阈提高百分率。,落重模型,脊髓损伤是常见的神经损伤之一。用Allen氏 重物坠击法造成的脊髓损伤是最接近临床脊 髓损伤后中枢性疼痛的模型。,（5）电刺激法,甩尾实验（大鼠、小鼠） 小鼠足跖电刺激实验 猫牙齿激发痛模型 电网刺激大鼠（小鼠）实验 电刺激兔耳实验 大鼠牙髓电刺激痛模型,甩尾实验（大鼠、小鼠）,应用恒定的电压或电流参数刺激离尾尖1/3处 引起甩尾反应作为痛反应指标，记录引起甩 尾的电流或电压参数作为痛阈值，根据给药 前后刺激痛阈值的变化评价药物的镇痛效应。,小鼠足跖电刺激实验,电流直接刺激实验小鼠足跖引起疼痛反应， 刺激电流强度与疼痛反应程度成正比

14、，给予 镇痛药物后，观察痛阈值的变化判断药物的 镇痛作用强度。,猫牙齿激发痛模型,采用气流、高渗盐水、温度刺激成年猫下尖 牙的牙本质中层和深层，观察尖牙的单一牙 髓神经的诱发放电反应。可以用于这些激发 痛的药物的研究,电网刺激大鼠（小鼠）实验,打开刺激仪刺激开关，将输入电流由低到高 逐渐调大，直至引起动物疼痛反应，以动物 出现跳跃并伴有嘶叫作为痛阈指标，观察镇 痛药物对动物痛阈的影响。,电刺激兔耳实验,在兔耳上置两个电极，其中正极为一铜环， 含有饱各的氯化钾溶液棉球，通入直流电 后，钾离子在电场的作用下渗透入兔耳皮肤 中，可刺激痛神经末梢感受器，家兔发生疼 痛反应，以使家兔产生疼痛反应时的直流

15、电 压为其痛阈，观察药物对痛阈的影响。,大鼠牙髓电刺激痛模型,于大鼠下切牙牙髓置入不锈钢刺激电极，通 过传入放电刺激无髓鞘的伤害性神经纤维， 产生伤害性疼痛，以张颌反射或剧烈咀嚼反 应所需的强度来确定牙髓感觉阈值，研究疼 痛机制和镇痛药物的药价强度。,3、病理性疼痛动物模型,组织损伤性病理痛模型神经损伤性病理痛模型,组织损伤性病理痛动物模型,福尔马林诱发大鼠痛模型 角叉菜胶诱发大鼠炎症痛模型 蜂毒诱发大鼠结肠炎痛模型 辣椒素致痛模型 小鼠应激性慢性痛模型 ,福尔马林诱发大鼠痛模型,将福尔马林用微量注射器注射入大鼠一侧足 底皮下后产生两个疼痛时相：第一相：0-5分 钟内的自发缩足反射期，第二相：

16、20-40分钟 的持续反应期。第一相由福尔马林刺激伤害 性感受器所致，为非炎症性疼痛。第二相为 由炎症介质产生释放所致。舔足时间为观察 指标。,角叉菜胶诱发大鼠炎症痛模型,角叉菜胶过敏刺激作用可诱发炎症。 给大鼠脚掌注射2%角叉菜胶，造成疼痛模型。 于注射角叉菜胶3小时后，用痛阈测定仪测定 大鼠致炎侧痛阈。,蜂毒诱发大鼠结肠炎痛模型,蜂毒是一种致炎物质，结肠黏膜下局部注射 蜂毒可剂量依赖性地诱发持续性自发疼痛， 疼痛分数的变化直接反映受试药镇痛作用的 强弱。,辣椒素致痛模型,辣椒素可激活辣椒素受体引起痛觉。于小鼠 右后脚掌皮下注射辣椒素20ul每只，观察注 射后5分钟内小鼠舔注射脚掌的时间作为评价 疼痛反应的指标。观察药物对该痛反应的抑 制作用。,小鼠应激性慢性痛模型,通过反复低温应激处理诱致痛觉过敏而复制 成小鼠应激性慢性疼痛模型，用以评价药物 作用。,