标本采集与处理

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1、标本采集与处理,浙江绿城医院 钟步云,标本采集概述,为保证临床检验质量，必须对实验室检查全过程实行质量控制。包括检验分析前、分析中和分析后三个阶段的质量控制，其中分析前质量控制是前提。国内外均有报道，检验结果差错中70%左右来自分析前，而且这分析前的差错是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。,分析前质量控制包括： 患者的准备， 标本的采集， 标本的储存， 标本的运送， 标本的处理， 己知的和需考虑的生物因素与干扰因素等。,患者的准备，根据所采标本的类型和所分析的物质而定。许多非疾病因素如是否空腹、精神状况、体力活动、使用药物和食物等都可影响检验结果。因此，在标本采集前要根据需要对患者

2、做好相应准备。一般要求患者处于安静状态，晨起时的精神、体力、情绪等因素影响较小。如可能，患者最好停服干扰检验的药物，根据检测项目和标本类别选择相应的容器。,空腹血采集前至少要空腹8小时， 血脂测定须禁食1214小时， 情绪紧张、激动会使血糖升高， 吗啡、可卡咽可使淀粉酶升高， 采血前按摩前列腺可使酸性磷酸酶升高， 醛固酮检测要在起床活动前取卧位血，起床后活动2小时取立位血， 尿液按不同检查项目分别留取晨尿、随机尿、计时尿， 大便隐血检查前要素食，禁食含动物血的食物, 细菌培养标本最好在使用抗生素之前等。,标本的储存： 当标本不能及时送检时，已釆集的标本要按检验要求的贮存条件，如窒温、冷藏、冰浴

3、、温浴或防腐贮存。标本要直立于稳定、干燥、避光、密闭的环境中，避免振摇。检测好的标本也要按规定条件保存一定时间，以备复查。,标本运送： 防止标本外溢、蒸发、污染。 严格控制运送途中温度。 运送途中避免剧烈振动。 标本送到实验室后的核对、交接、签收。,标本的处理： 标本接收、核对唯一标识、检验项目与标本类型一致、确认标本有效（无损坏、污染），检验费验收等。 实验室收到标本后按检验项目要求及时正确地予以分类、处理。,已知的和必须考虑的生物因素与干扰因素： 常见的干扰因素有： 溶血 脂血、黄胆血 血液凝固或部分凝固或细小凝固颗粒 抗凝药物、治疗药物及其代谢产物、输注液。 抗凝剂、残留容器的洗涤液、细

4、菌、霉菌。,(一) 标本溶血常见原因及 对检验结果的影响,溶血标本对检验结果影响很复杂，常见有： 1)血细胞内成分释放出来，影响血清（血浆）测定项目结果，如K、游离Hb、LDH、Cr、ALT、直接胆红素，Na、UA、CK、rGT等。 2)溶血导致红细胞计数，并影响由此换算的红细胞各项指标异常。,3)血红素对仪器光学测定的干扰。 4)血细胞成分对检验方法的影响。如血细胞释放的腺苷酸激酶对CPK检测方法的影响。所以溶血标本不能用。,(二)血标本凝血常见原因及 对检验结果的影响,血标本凝血常见原因有： 1.抽血后忘记或简单晃动几下，全血与抗凝剂混合不匀，导致凝血（肉眼难以观察的小凝块）。 2.抗凝剂

5、相对不足。 3.采血不顺利，导致组织损伤，组织凝血活酶进入血标本而致外源性凝血。,凝血对检验结果的影响有： 1)凝血试验项目因疑血因子己部分消耗而不准确。 2)血细胞计数项目尤其是血小板计数结果受影响，。 3)血液凝块可阻塞血细胞分析仪管口或管内腔。,（三）采血量、抗凝剂的问题,1.所抽血量应足够试验用量，同时略有多余，以备复测。 2.抽取的血液量应与抗凝剂的比例适中。血液比例多，抗凝剂不足，易出现微小血凝决，影响很多试验结果；血液比例少，抗凝剂过量，影响凝血因子测定结果，如APTT延长；过多抗凝剂会改变血细胞形态，如EDTA浓度达到2.5mg/ml，中性粒细胞肿胀，分叶核消失，血小板肿胀、崩

6、解，导致血细胞计数出错等。,3.不同抗凝剂的用途不同、配制浓度不同，抗凝剂与血液的比例也不同。所以，真空采血时必须按真空采血管所标示的抗凝剂种类和采血量的位置采血。,(四)凝血试验（因子）标本采集,临床上同时采集多管血标本时，凝血试验标本以第一管为好。因为第二、三管血标本的凝血试验检测结果可能与第一管有明显差异。其原因可能与后面采集的血标本某些凝血因子被激活有关。,凝血试验血标本以室温保存为好，及时送检，及时检测。0.11mol/L枸橼酸盐抗凝剂与血液的比例为1：9，要求准确。 由于真空采血管采血后上部空余部分称为“死腔”，血液与死腔管壁接触摩擦可使血小板激活释放PF4。PF4会中和血液中的肝

7、素，使APTT检测结果缩短。因此，在选择APTT监测肝素用药时或监测血小板功能时，应选用死腔少的真空采血管。,(五)脂血标本、黄疸标本对 临床检验结果的影响,脂血标本由于血清混浊对比色分析的干扰外，脂蛋白可以结合亲脂成分，降低与抗体的结合，从而干扰免疫检测结果。 黄疸标本由于总胆红素增高，常会干扰如血糖、肌酐等许多生化检测项目。,标本采集的基本原则,1. 按检验项目申请单要求认真填写，这是临床检验工作的第一步。 2. 采集标本前，要核对检验申请单病人基本信息是否属实？核对标本容器、标识与申请单上信息是否相符？核对无误后再采集或收集标本。 3. 按标本采集方法采集，要收集足够的标本于规定的容器中

8、并及时送检。 4. 在标本采集、送检过程中有不明地方及时与检验科联系。,实验室拒收标本的规定,1. 标本属性（含病人资料）不清、标记错误或无标记、标本标识与申请单标识不符。 2. 抗凝剂错误或比例错误。 3. 标本收集管使用错误。 4. 血常规、凝血试验、血沉等抗凝血标本有凝块或凝固。 5. 细菌培养标本未用无菌容器、被污染、标本已干、储存或运送不当（该冷藏而未冷藏、不应冷藏而冷藏，厌氧菌培养而未厌氧保存运送）等。 6. 病理标本标识不清或与申请单不符、光标本无申请单或有申请单无标本、标本无固定液或已自溶、腐败、干涸。 7. 病理标本不完整、送检单不规范（缺病史、手术所见或填写不全、字迹不清难

9、认者），标本种类、数量或体积形态描述与送检单不符。等等,一. 常规标本采集方法,（一）血液标本采集： 1. 一般血液生化检验标本以早晨采集空腹（采血前禁食12小时）静脉血为佳。 1.1 血常规、凝血试验等抗凝血标本，应优先采集，分 别采入含有特定抗凝剂管中，并立即颠倒8次混匀。 1.2 生化检验项目如肝功能、血脂、蛋白质、尿酸、无机离子、酶类测定，采入专用洁净试管(冷天可放 置37水浴)，待凝固后立即分离血清。 1.3 血糖、糖耐量试验采用血糖专用抗凝管采血，采血后颠倒8次混匀，1小时内分离血清（血浆）并及时冷藏送检。 1.4 血清免疫检验项目采入专用血清标本试管。 1.5 特殊检验项目按特殊

10、要求的方法、时间、标本管、采集处理（如高血压三项、皮质醇）。,2. 真空采血管使用指南：,2.1 黄色头盖：内含分离胶，分离血清快。生化全套，肝、肾功能，血脂，电解质，急诊生化，心肌酶，过敏原，乙肝三系及多种免疫血清学检查标本。 2.2 红色头盖：不含分离胶，分离血清慢。用途同上述。通常用于血清免疫检测标本。 2.3 紫红色头盖：含EDTA K2/K3抗凝剂，用于血常规、血交叉、流式细胞分析、糖化血红蛋白、ACTH等检测标本。,2.4 蓝色头盖：含枸橼酸盐抗凝剂，用于PT、APTT、FIB、TT，出凝血全套，溶血试验，纤溶试验等检测标本。 2.5 黑色头盖：含枸橼酸盐抗凝剂，用于血沉试验。 2

11、.6 灰色头盖：含草酸盐、氟化钠抗凝剂，用于血糖测定标本。 2.7 绿色头盖：含肝素抗凝剂，常用于血液微量元素分析、血粘度标本。 2.8 高血压三项有专用抗凝管。,3. 注意准确选用标本管、抗凝管，注意抽血量与 抗凝剂的比例，抗凝血则立即颠倒8次混匀。,3.1 血常规检查：用EDTA-K2抗凝剂1.5mg，可抗凝全血1ml，抽血量以真空采血管刻度为准。轻轻颠倒8次混匀。 3.2 血沉检查：用0.11mol/L枸椽酸钠抗凝剂0.4ml，加全血1.6ml轻轻颠倒8次混匀。 3.3 凝血试验：用0.11mol/L枸椽酸钠抗凝剂1份加全血9份，采血量以真空采血管刻度为准。轻轻颠倒8次混匀。,3.4 血

12、糖测定：用含氟化钠抗凝剂，取全血2ml，轻轻颠倒8次混匀。 3.5 生化项目测定：用血清，不抗凝，取全血4ml。 3.6 免疫项目测定：用血清，不抗凝，取全血3ml。 3.7 血气分析：动脉血，肝素抗凝，隔绝空气，取血1ml，用双手挫动脉采血器(管)立即混匀后送检。 3.8 内分泌激素检查：根据内分泌实验室要求抽血。 3.9 血药浓度检测：根据临床药理实验室要求抽血。,（二）采集血标本的注意事项：,1. 空腹采血前应禁食12小时（血常规检验除外），空腹采血时间尽可能在上午7时9时抽取。 2. 做到唯一性标识，按照采血规范操作要求，不同的检验项目应有不同的标识。采用真空采血管可以做到。标本容器的

13、标签（标识）要求有科别、床号，患者姓名、性别，标本名称及量，检验目的，采集时间。,3. 采血前4小时勿喝茶、咖啡、吸烟及饮酒。最好了解病人对烟、酒、咖啡及成瘾性药物的接触史，供评价检验报告时参考。 4. 采血尽量安排在服药、其他检查和治疗之前进行。血液细菌培养标本，最好在使用抗生素前抽取。 5. 不能在病人“应激状态”下抽血，尤其是血脂、血糖、内分泌激素检查。（“应激”是指身体在生理状态下对周围环境变化的应答，进而导致实验室检查指标改变的一种适应状态）。应激对生理两个最显著的影响是血糖和皮质醇的增高。 6. 抽血时病人的体位姿势尽量统一，坐位或卧位。,7. 止血带使用应在1min内完成，松紧度

14、以能阻止静脉血流可，当血液进入针筒后即可松开止血带。如要重复使用止血带抽血，应在另一手臂上抽。 8. 抽取血液以缓缓、均匀抽取为宜，应避免快速用力抽拉针心的做法。 9. 药物浓度监测血标本，应根据药物浓度峰值期和稳定期时间抽取。 10. 防止过失性采血：如边输液边抽血；留置静脉导管取血做凝血试验或从导管直接取血（必须先弃去相当于导管体积12倍量的血液后再取血标本）。 11. 血标本抽取后，应贴好标签或条形码，注明抽血时间，及时送检。 12. 如要送较远实验室检测（需1小时以上送到）最好先分离好血浆或血清后送检。,13. 红细胞中许多成分的浓度比血清中高几倍或几十倍，溶血可影响该成分的分析，如血

15、钾、乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶、谷草转氨酶等溶血时会升高，而钠在溶血时会降低，故血液采集要特别注意防止溶血。 13.1 注射器及针头必须洁净干燥无菌，最好使用一次性注射器。 13.2 止血带压脉时间不能过长，否则易引起多种成分的改变及血管内溶血。 13.3 抽取血液后应先将针头取下，缓慢将血液注入特定试管。 13.4 抽血时针筒内产生的气泡不要注入试管中，否则易引起溶血。,13.5 采取血标本后要及时分离血清，血中许多成分采血后可有较大降低，如血糖可因红细胞酵解而明显降低；有些酶放置后易失活，如前列腺酸性磷酸酶，室温1小时活性丧失50%。分离血清及血浆时离心速度不宜过高，离心时间不宜过长。 14.

16、 避免在静脉输液、服药时抽血作为待检标本。 15. 血标本若不能及时送检，应分离血清或血浆放4保存。 16. 测定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA，C反应蛋白，C3、C4项目的标本应及时分离血清放4，及时送检。 17. 糖化血红蛋白用EDTA或肝素抗凝，不同的检测仪器与方法 需选用其相应的抗凝管。 18. 一般情况下，正常人血清约占全血体积的55%，即1ml全血约可以分离出0.5ml血清。,我院实际发生标本采集差错：,1. 血常规、凝血试验标本出现凝固或小凝块。 2. 血液与抗凝剂比例不对，如凝血试验标本血量少（未到标示位）或血量多（高于标示位）。 3. 标本溶血。 4. 在输液手臂抽血标本（出现很高的血钾或血糖值）。 5. 在留置静脉导管(埋针处)取血做凝血试验或从导管直接取血，未按规定必须先弃去相当于导管体积12倍量的血液后再取血标本。 6. 血气分析标本抽取静脉血（应抽动脉血）送检，抽血后未及时与抗凝剂混匀，出现凝块，针头未封闭，出现汽泡。也有抽血后放置1个小时后送检。,