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1、,cobas h 232 检测原理及操作培训,上海亦扬医疗器械有限公司 罗氏血气分析仪,Company Logo,Contents,POC,POCT 特点,商业实验室,医生诊所,社区诊所,家庭,检验科,监护室,急诊,手术室,中心实验室,医院,医生 / 社区 诊所,家庭,快速诊断,有效诊断,便捷诊断,“在中心实验室以外进行的检验“,时间:即时 地点:在患者床边 人物:医护人员,患者本人及家属等,4,实验医学向“两极”发展的趋势 中心实验室-高大上,高分析速度 高自动化程度 高智能化水平 高精密度分析结果 大型化 上档次,实验医学向“两极”发展的趋势 POCT小快简,仪器小型便捷 非专业人员简单操
2、作 即时报告 结果稳定具有可比性 成本低 采血量少,危重疾病需要快速的测试结果,以便减少治疗的延误,医生期待时间,检验人员估计时间,实际样本检测时间,6,ESC指南建议:POCT可缩短TAT,60min内中心实验室无法获得检测结果的,建议使用POCT。,NACB指南指出:样本周转时间需要快速,建议cardiac TAT 60 min,最好是30min或更少。,TAT (Turn Around Time) 的现状,7,POCT带来了哪些优点?,POCT的检测技术,POCT的基本原理是:把传统方法中的相关试剂浸润于试纸和各种微孔膜的吸水材料中,成为整合的干燥试剂块,然后将其固定于硬质基质上。成为各
3、种形式的诊断试剂条;或把传统分析仪器微型化,操作方法简单化,使之成为便携式和手掌式的设备,或将上述两种整合为统一的系统。 POCT的主要技术包括: 简单显色(干化学法)技术 多层涂膜(干化学法)技术 免疫金标记技术 免疫荧光技术 生物传感器技术 生物芯片技术 红外和远红外分光光度技术 其他技术,Company Logo,Contents,常用的免疫胶体金检测技术,(1)免疫胶体金光镜染色法 细胞悬液涂片或组织切片,可用胶体金标记的抗体进行染色,也可在胶体金标记的基础上,以银显影液增强标记,使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面,可明显增强胶体金标记的敏感性。免疫胶体金电镜染色法可用胶体金标记
4、的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合,然后进行负染。可用于病毒形态的观察和病毒检测。 (2)斑点免疫金渗滤法 应用微孔滤膜(如膜)作载体,先将抗原或抗体点于膜上,封闭后加待检样本,洗涤后用胶体金标记的抗体检测相应的抗原或抗体。 (3)胶体金免疫层析法 将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察或者仪器光源检测得到显色结果,
5、从而得到待测物的检测值。,胶体金免疫层析法 相关概念,抗原抗体反应: 每个抗体结合特定抗原,双抗体夹心法,胶体金标记物,cobas h 232检测原理 以NT-proBNP为例,加样,免疫胶体金抗体,识别NT-proBNP的抗体,含有NT-proBNP的血样,包被好抗体反应膜层,cobas h 232检测原理 以NT-proBNP为例,反应,免疫胶体金抗体,识别NT-proBNP的抗体,双抗体夹心复合物,玻璃纤维膜层,双抗体夹心复合物随血浆过滤到下一层,cobas h 232检测原理 以NT-proBNP为例,检测,醋酸纤维膜层,双抗体夹心的抗原抗体复合物 与信号线结合 信号线显色,免疫胶体金
6、抗体 结合质控线 质控线显色,没有结合的抗体 与信号线结合 信号线不显色,cobas h 232检测原理 影响抗原抗体反应的因素,外部因素 温度:18C 至32C室温下 湿度:10%至85%的相对湿度 环境:是否处于水平、无震的平面,内部因素 测试条性能:芯片、条码和保存条件保存2-8/室温下1周/撕开15min 机内反应温度:一般37 机内检测光源 反应时间,cobas h 232检测原理 操作步骤,Company Logo,Contents,心机标志物市场分布,自动化检测设备采用的技术,免疫检测原理未变,依旧利用抗原与抗体的特异性结合;改变的只是标记物的种类以及相应的检测方法和手段。,电化
7、学发光,1960S,197080S,2000S,放射免疫,酶联免疫 荧光免疫 化学发光,cobas e 411电化学发光全自动免疫分析仪,架式,盘式,电化学发光技术,电化学发光检测原理,酶联免疫荧光标记技术,梅里埃 Vidas,化学发光分析技术,双抗体夹心法,Beckman Access 2,时间分辨荧光法,AQT90 FLEX快速免疫分析仪采用时间分辨荧光法检测捕捉抗体、铕螯合物标记的荧光示踪剂抗体及有关抗原间形成的三明治复合体AQT90 FLEX快速免疫分析仪光电倍增管可计算铕螯合物射出的光量子(光粒子)的数量。血液中抗原的浓度与标记示踪抗体产生的荧光水平成正比。,雷杜 AQT90,免疫荧
8、光法,加样孔 滤膜 反应池 第二次包被 废液池 (第一次 抗原抗体包被) (荧光信号产生 ),Biosite Triage 诊断仪测试板条原理平面图,免疫荧光法,Response 瑞普,胶体金法/双向侧流免疫法,深圳瑞莱,免疫胶体金法,美德声 德帕斯,深圳 微点,南京 普朗,广州 万孚,免疫荧光法,Thank you for your attention,Roche Diagnostics (Shanghai) Limited Shanghai 200031 China,This presentation is our intellectual property. Without our written consent, it shall neither be copied in any manner, nor used for manufacturing, nor communicated to third parties.,COBAS and LIFE NEEDS ANSWERS are trademarks of Roche,