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1、第十单元现代生物科技专题学案 52 动物细胞工程考纲要求1. 动物的细胞培养与体细胞克隆( ) 。2. 细胞融合与单克隆抗体( ) 。复习要求1简述动物细胞培养的过程、条件及应用。2比较动物细胞培养与植物组织培养区别。3简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。基础自查一. 动物细胞培养和动物体细胞核移植技术1. 动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养的流程:细胞贴壁和接触抑制:称为细胞贴壁。这种现象称为细胞的接触抑制。(4)动物细胞培养需要满足以下条件:培养液应进行通常还要。此外,应, 防止。营养:合成培养基成分:温度:气体环境:作用 : 动物细胞培养技术的应用:2. 动物体细胞核
2、移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为。(2)选用去核卵( 母) 细胞做受体细胞的原因:。(3)体细胞核移植的大致过程是:治疗性克隆的过程:(4)体细胞核移植技术的应用:(5)体细胞核移植技术存在的问题:二. 动物细胞融合和单克隆抗体1. 动物细胞融合(1)动物细胞融合也称细胞杂交,是指(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有等。(3)动物细胞融合的意义:。2. 单克隆抗体的制备(1)抗体:一个B淋巴细胞分泌。从血清中分离出的抗体。(2)单克隆抗体的制备过程:(3)杂交瘤细胞的特点:。(4)单克隆抗体的优点
3、:。(5)单克隆抗体的作用:课堂深化探究一动物细胞培养1植物组织培养和动物细胞培养的比特别提醒: (1) 植物组织培养需要生长素和细胞分裂素,生长素可诱导愈伤组织生根,细胞分裂素可促进愈伤组织生芽。(2) 动物细胞的传代培养过程中,细胞可能癌变。(3) 两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂。(4) 植物组织培养最终产生新个体,体现了细胞的全能性;动物细胞培养产生大量细胞,不形成新个体,故不能体现细胞的全能性。二动物体细胞核移植与克隆动物1原理结果:2供核细胞3受体细胞原因:4核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同的原因5过程6. 比较克隆与组织
4、培养、试管婴儿克隆组织培养试管婴儿生殖方式遗传物质来源性别决定用 途三动物细胞融合和单克隆抗体1. 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较2血清抗体和单克隆抗体3制备过程:(1)诱导融合的2 种细胞名称及作用诱导动物细胞融合与植物原生质体融合的不同方法。动物细胞诱导融合的特有方法(3)二次筛选的目的及方法(4)2 种培养方法及提取单克隆抗体的场所4应用特别提醒:1在动物细胞培养的过程中有贴壁生长和接触抑制现象。2动物细胞培养过程中两次用到胰蛋白酶,第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分散成单个细胞,第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。3细胞核移植选用去核卵( 母) 细胞的原因:虽然细胞核内具有发展成为
5、一个完整个体所需的全套基因,但动物体细胞分化程度较高,因此很难表达全能性。而卵 ( 母) 细胞比较大,容易操作; 卵(母) 细胞的细胞质多, 营养丰富, 含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。将体细胞核移植入去核卵( 母) 细胞内, 既保证了重组细胞的完整性,又能刺激体细胞核表达其全能性,发育成为一个新的个体。4与克隆动物有关的亲本的遗传关系:动物体细胞核移植产生的新个体的亲本有三个:体细胞核供体、 卵( 母) 细胞细胞质供体、代孕母体。 新个体细胞核基因型与体细胞核供体完全一样,因此新个体性状与体细胞核供体基本相同。卵( 母) 细胞细胞质中也有少量的DNA ,新个体性状与卵 ( 母) 细
6、胞细胞质供体有一些地方相同。代孕母体没有为新个体提供遗传物质,新个体性状与代孕母体基本没有联系。对应训练1. 动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于( ) 。A培养基不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能D动物细胞能够大量培养,而植物细胞不能2. 在克隆羊培育过程中,将雄羊的体细胞核移入雌羊的卵细胞中。产生该克隆羊的方式及该克隆羊发育成熟后所分泌的性激素依次是( ) A无性生殖、雄性激素B无性生殖、雌性激素C有性生殖、雄性激素D有性生殖、雌性激素3. 根据单克隆抗体制备流程示意图判断以下选项中正确的是( ) A单克隆抗体技术的原理包括细胞增殖、细胞膜的
7、流动性、细胞的全能性等B根据培养基的物理性质分类,图中HAT培养基属于选择培养基C在制备单克隆抗体的过程中有两次选择,第一次是选择杂交瘤细胞,第二次是选择能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞D老鼠骨髓瘤细胞染色体数是40,效应 B细胞的染色体数为46,融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86 4. 近年来,我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA ,机体感染病毒后产生的特异性lgG 抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。请根据上述材料,回答下列问题:(1) 狂犬病病毒的毒力可发生变异。从自然
8、感染动物体内分离的病毒株称为野毒株,其致病力强。 将野毒株在家兔脑内连续传50 代后, 变成固定毒株。 固定毒株对人及动物致病力弱,不引起狂犬病。 巴斯德首先利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病。 制成减毒活疫苗需要用 _培养。(2) 特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程的技术是_ 。(3) 下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:图中A 过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是_细胞,该细胞能够产生_。 从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定的物质是_。图中 B过程是细胞融合, 该过程需要用灭活的_、 聚乙二醇或电激等诱导。特异性
9、抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体, 然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有_ _ 等优点。(4) 动物细胞体外培养需要满足的环境条件有_ _ 。单克隆抗体技术还有哪些用途?_ 。实验探究(2009 江苏卷 ) 动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1) 肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞_ 。(2) 气室中充入5% CO2气体的主要作用是_ 。(3) 培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的_,以保证抗生素对肝脏无害。(4
10、) 有机物 X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素( 刺激淋巴细胞分裂) ;显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液( 使染色体着色 ) ,有机物X溶液等。实验过程:在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4 等份,备用。利用甲、乙、丙、丁4 组上图所示装置,按下表步骤操作( “”表示已完成的步骤) 。甲乙丙丁步骤一:加入肝脏培养液步骤二:加入有机物X溶液步骤三:放置肝脏小块上表中还需进行的操作是_ 。培养一段时间后,取 4 组装置中的等量培养液,分
11、别添加到4 份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_, 并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明 _。限时训练题组一动物细胞培养和动物体细胞核移植技术1. 在克隆羊多利的过程中,下列哪项技术没有运用到( )。A细胞培养技术 B细胞核移植技术C胚胎移植技术 D基因工程技术2如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能来源于( ) A.乳腺细胞 B.卵细胞C.胃腺细胞 D.囊胚时期的胚胎细胞3回答下列有关动物细胞培养的问题:(1) 在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的
12、_ 。此时,瓶壁上形成的细胞层数是_ 。 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是_。(2) 随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_的现象 ; 但 极 少 数 细 胞 可 以 连 续 增 殖 , 其 中 有 些 细 胞 会 因 遗 传 物 质 发 生 改 变 而 变 成_细胞, 该种细胞的黏着性_,细胞膜表面蛋白质( 糖蛋白 ) 的量_。(3) 现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是 _ _ 。(4) 检查某种有毒物质是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5) 在细胞培养过程中,通
13、常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中_的活性降低,细胞_的速率降低。(6) 给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作 _进行攻击。题组二动物细胞融合和单克隆抗体的制备4. 下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是( ) 。A制备过程中不需要动物细胞培养技术B杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点C经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产D单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂5生产单克隆抗体时,在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞,因为该试剂( ) A.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活C.选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成6 下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,不正确的是( 多选 )( ) A制备过程中不需要动物细胞培养技术B杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点C经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产D单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断