《人工孵化是根据胚胎发育所需要的条件,将受精卵放放适宜的》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人工孵化是根据胚胎发育所需要的条件,将受精卵放放适宜的（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、一、产卵池及催产剂1.产卵池：产卵池的形状、面积和构造各地不一。主要有圆形、椭圆形等几种。要求收卵和操作方便，并无死角。水深1.52 米。产卵池的面积视生产规模和亲鱼能进行正常产卵活动的要求而定，一般以60120 平方米较为适当。每68 平方米约可放亲鱼一组。产卵池一般使用水泥和砖砌成。2 催产剂的种类： 有效的催产剂是成熟的同种鱼或鲤、鲫鱼的脑垂体以及人的绒毛膜促性腺激素(HCG)和促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A) 等。(1)脑垂体的摘取和保存：摘取脑垂体的鱼类最好是性成熟的个体。摘取的时期最好是在临近生殖季节时，如以鲤鱼而论，可在冬季捕捞时大量摘取；冬季鲤鱼死后一、二天内鱼体尚保持
2、相当鲜度的，其垂体仍合用。在长江流域每年11 月份次年3 月鲤鱼产卵季节前都可以。脑垂体位于间脑下面的蝶骨里。摘取时，应将头盖骨切开。这时还不能清楚地看到脑，必须用镊子夹住棉花将脑腔中的脂肪拨除，并吸去因割破血管而溢出的血液，才能看到整个鱼脑。然后用镊子将连在脑后的脊髓挑起，轻轻将脑翻开， 脑垂体（白色心脏形的小颗粒）往往即与脑分离，留在骨窝中；为了使脑垂体不致破损，必须用小镊子将脑垂体旁边的结缔组轻轻剔开，然后将脑垂体取出。脑垂体可以新鲜应用，或用丙酮（或纯酒精）浸泡（所用丙酮的量，必须比脑垂体本身体积大2030 倍两次，第一次浸泡46 小时；第二次浸泡610 小时，然后保存备用。保存方法有
3、两种：一种是把浸泡的脑垂体取出，待干燥（阴干）后放在小瓶中用蜡密封；另一种是在第二次浸泡时，连同浸液密封在小瓶中，保存备用。尽可能放在干燥器中。干法保存的有效时间可达数年之久，用后如有多余的脑垂体，则仍须将瓶封好，放入干燥器中保存。(2)绒毛膜促性腺激素（以下简称激素）提取方法： （I）粗制品：A.原料的选择及处理：（a）提取激素的原料是新鲜孕妇尿。由于孕妇尿本身所含的激素量差异很大，孕妇尿中激素含量于怀孕 40110 天内最多。因此，收集怀孕五个月以内的孕妇尿较为适宜。（b）前一日将清洁尿桶放在孕妇家中，或医院人工流产手术室内，供存放孕妇尿较专用。如果室温在 18oC 以上时，尿桶中应放2
4、毫升防腐剂。（c）次日上午到孕妇家中和医院手术室收集尿桶，并检查孕妇尿是否澄清和尿的pH 是否在 7 以下，如果不符合规定，即将该尿弃去。（d）将符合要求之孕妇尿，经过二层纱布过滤，滤入陶瓷缸中。B.吸附：（a）在搅拌下，用5%或 10%的工业盐酸调至pH5（用比色法测定） 。（b）量出尿的总体积，按1,000 毫升孕妇尿加80100 毫升苯甲酸酒精饱和液比例，在不断搅拌下慢慢加入苯甲酸酒精饱和液于孕妇尿中，这时即有乳白色絮状沉淀物产生，不断地顺流和逆流搅拌半小时至一小时，使苯甲酸吸附充分。（c）静止 23 小时。（d）用橡皮管将陶瓷缸中上部清液吸出弃去。（e）下层的白色沉淀，用白布袋滤出，并
5、将白布袋吊起来以滤去废液，然后放在木压床上压干。C.脱附： （a）将压干的白色加工品分成小块，然后放于陶器缸中，以每 1,000 毫升孕妇尿加80 100 毫升 95%酒精之比例加入酒精，不断搅拌脱附，直到苯甲酸全部溶解呈咖啡色液体为止，即有絮状沉淀产生。（b）静止810 小时，用橡皮管吸去上层清液，沉淀物用布氏漏斗减压过滤。在快干时可用95%酒精、丙酮洗涤一、二次，再抽干。（c）抽干后放入以五氧化二磷或无水氧化钙和固体氢氧化钠作干燥剂的干燥器中干燥。干燥后即成呈淡黄色的粗制品，粗制品可研成粉末称重。若不及时精制，可置于棕色广口瓶中密闭备用。（II）精制品：A.抽提、离心去杂质： （a）称取粗
6、制品研磨。置烧怀中，每一克粗制品加pH4.8 的 1/15 克分子浓度醋酸-醋酸钠缓冲液30毫升搅拌提取3060 分钟，温度以低于15oC 为宜。（b）提取液离心，以每分钟4,0005,000 转的转速，离心2030 分钟，然后取出上层微混清液（含激素），准确量其体积。B.激素和杂蛋白分离：（a）加入提取液体积的10%饱和氯化钠溶液，再以2.5 克当量浓度氢氧化钠溶液调节pH 到 6，若 pH大于 6，则用 2.5 克当量浓度盐酸调至pH 为 6。（b）边搅拌边加95%酒精，使溶液含酒精为50%以沉淀杂蛋白。静止过夜，分二层，上层为微混清液，下层灰白色沉淀物为杂蛋白。（c）次日以约浆过滤得澄清
7、液，滤液加95%酒精使溶液含酒精为85%，静止 1018 小时。（d）用橡皮管吸弃上层清液，离心分离出沉淀物。（e）以少量 95%酒精洗涤沉淀物，放入耐酸过滤斗或布氏漏斗减压过滤，将干时，加少量无水酒精、丙酮脱水，最后得白色或灰色块状物。（f）将精制品置于以五氧化二磷或无水氯化钙和固体氢氧化钠作干燥剂的真空干燥器中干燥，得灰白色或白色块状物，即精制品。（g）取干燥好的精制品置于研钵磨成粉末，秤重量，装入棕色瓶中保存。二、催产季节池养草、青、鲢、鳙的性周期，基本上是相同的，只是由于气候不同在发育时序上有迟早的差别。以长江中下游地区，性成熟的个体，冬季卵巢多处于IIIII 期，到了明春，卵巢即迅速
8、发育转入第III 期； 4月上中旬进入第IV （早）期；在良好的环境下，经过3545 天左右时间，到了5 月上旬，卵巢一般能达到第 IV 期中一末，这时可进行人工催产。华南地区性腺可提早一个月成熟；东北地区一般要在6 月下旬性腺才发育成熟。卵巢的相对重量（成熟系数）在一年之间的变化是：冬季成熟系数很低；4 月份以后成熟系数急剧上升，到5 月中旬至7 月份达高峰；8 月以后开始下降，至冬季达最低点。雄鱼的精巢发育较雌鱼略早，一般在冬季已到达III IV 期；但仍须在翌年4、5 月才发育到第V 期。在不同的地理条件下，由于各地区气候悬殊，催产日期也因地而异，长江中、下游地区，一般5 月上旬至 6
9、月中旬可以催产；华南地区约提早一月；华北地区约迟一个月；东北地区更迟。即在同一地区内也因地理环境的不同而有差别。因此，应根据当地气候，水温等具体情况决定适当的催产期。催产的水温是1830，适宜的水温是2228（也是孵化的最适宜温度）。草、青、鲢、鳙鱼卵巢的成熟，一般是鲢鱼、草鱼成熟较早；青鱼、鳙鱼较迟，催产时大致可按先鲢、草鱼，后鳙、青鱼的顺序进行。三、注射催产剂1.剂量和注射次数：一般使用的鲤、鲫脑垂体（干燥）剂量是每公斤雌鱼注射36 毫克（或11.5公斤鲤鱼的脑垂体2、3 个） ，或绒毛膜促性腺激素8001200 国际单位（或按产品说明使用）,或促黄体生成素释放激素1-3 微克。脑垂体对这
10、几种鱼的效果基本相同。剂量还须视亲鱼成熟情况、催产剂的质量、 鱼体大小等而定。一般在催产的早期和晚期剂量相对较大，反之则否。酌量偏低；个体较小的亲鱼，使用剂量相对较大，反之则否。目前这几种鱼催产有采用一次注射和两次注射是第一次注射（最好使用垂体或垂体和激素混合剂）全剂量的 1/61/10，经一定的时间（约5 小时以上），作第二次注射。每次注射时，注入悬液的量以2 毫升左右为宜。结雄鱼，一般在雌鱼第二次注射的同时作一次注射。雄鱼的剂量为雌鱼剂量的1/32/3。采用人工授精法时，雄鱼一般不催情，但遇到雄鱼精液稀少时也有对雄鱼催情的。一般分两次注射较之一次注射，特别是对成熟不够完善的雌鱼，效果要好些
11、，其原因可能是使亲鱼卵巢从第 IV 期过渡到第V 期时充分地作好产卵的准备，使卵母细胞的成熟趋向一致。采用分次注射，还可以在第一次注射后观察雌角卵巢有无反应而判断它是否充分成熟；如果腹部稍有膨大和变软，表明亲鱼的成熟程度基本上能符合催产要求；如无反应，甚至腹部稍微变硬和缩小，则表示亲鱼的卵巢发育还不够充分完善；应培育一个时候再选用。2.催产的效应时间：亲鱼经催产后，经过一定时间，就会出现发情现象，这段时距称为效应时间。水温、注射次数和激素的不同，其效应时间也不相同，其中以水温和注射次数与效应时间的关系最为密切。水温高，效应时间较短；水温低，则效应时间较长；两次注射的效应时间（距最后一次注射的时
12、距）要显著地比一次注射的为短。此外，一般说，垂体效应时间较快而较稳定，而激素的效应时间则较慢。四、自然产卵、受精经注射促性腺激素后的亲鱼，让它在产卵池中自行产卵、排精， 完成受精作用的称为自然产卵、受精。一般用一雌二雄为一组。成熟的亲鱼在外源激素的影响下，内在的卵细胞所进行发育成熟的系列变化，反映在雌雄的亲鱼在外源激素的影响下，内在的卵细胞所进行发育成熟的系列变化，反映在雌雄亲鱼外表的兴奋地相互追逐的发情现象上，卵细胞愈向前发育一步，亲鱼的发情相应地愈为激烈。起初，雌雄亲鱼在水下追逐活动，水面时常出现旋涡和波纹，之后，逐渐激烈而不时露出水面回旋追逐形成浪花，达到发情高潮时，常可见到雌雄鱼扭在一
13、起摆动身体，颤抖着胸鳍产卵、排精；或雌鱼仰腹，在水面（或在水中层）摆动身体， 剧烈颤抖着胸鳍将卵产出的各种生殖行为。收集受精卵的方法：在发情前1,2 小时开始冲水 （对亲鱼兼有刺激作用） ，产出的受精卵即陆续在流水的冲动下进入集卵箱，随时捞卵计数后放入孵化器内孵化。产卵完毕后捕起亲鱼，再加大水流冲卵、捞卵。五、人工授精亲鱼发情到一定阶段，开始产卵时，立即捕起亲鱼，用人工的方法产卵、采精，使精子与成熟卵子相结合称为人工授精。人工授精有干法和湿法两种，两种方法受精的效果相仿。这里先介绍干法。授精前，先将盛卵容器及雌亲鱼的鱼体擦净，一人斜举鱼体（最好把鱼放在采卵夹内，采卵夹式样如同布夹子，只是有一个
14、大孔，以便卵子流出， ） ，把生殖孔对准容器，用手轻压鱼腹，卵就自然地流入容器中；然后（或同时）用同样方法挤入雄鱼的精液（或用吸管吸取精液，滴在卵上），用羽毛搅匀，使精与全部的卵子接触。静止1,2 分钟后，加入少量清水，稍加搅匀，再静止1,2 分钟，然后用水冲洗数次，将受精卵计数后放入孵化器中进行人工孵化。也可用吸管吸取精液，放入少量清水中稀释，然后倒在卵上。若精量不足，可以剖腹剪取精巢碎片，在生理盐水中释出精子，再与卵接触。湿法由于不需要把亲鱼身上的水抹干，操作比较方便，受精效果也不比干法差，所以近年来生产上已较多地采用湿法了。由于亲鱼个体的差异以及其他的原因，卵子成熟的时间也并不完全一致。
15、常可遇到雌鱼了预定的排卵时间而不能排出卵粒（或仅排出一部分）时，可暂养（放在网箱或采卵夹内）半至一小时后再行采卵，如若仍未排卵，则还可顺延，可能采出卵粒。提高受精和孵化率的关键，除了适当的人工授精操作以外，还在于如前面已提到的要求适当成熟的卵子进行人工授精才有良好的效果。六、人工孵化人工孵化是根据胚胎发育所需要的条件，将受精卵放放适宜的孵化工具内，使胚胎正常发育，以达到孵化的目的。提高孵化率的因素，除上面已谈到的水温、水质、溶氧等以外，关键还在于孵化过程中的管理工作。目前使用的孵化器有孵化箱、孵化瓶、孵化桶、孵化缸、孵化槽、孵化环道等几种。这里只将孵化桶、孵化缸和孵化环道的构造以及管理方法叙述
16、于下：1.孵化桶：(1)构造：分为三部分：桶身、桶罩和附件。桶身：用马口铁皮制成。高1 米，略似圆锥形。桶的上口直径为62 厘米，下口最大直径为46 厘米。底部正中央有一进水管，口径为2.5 厘米，长8 厘米，其下与橡皮管相接。出水管安装在距桶身上口的4厘米处，口径用长度与进水管相同。为出苗方便起见，也可在进水管处接一出苗管。桶罩：用2 厘米宽的竹篾片制成上口直径为46 厘米、下口直径为56 厘米、高25 厘米的罩架，其内用每时 60 目的尼龙网纱制成出水纱罩，下口缝上泡沫塑料或粗布，以达到贴紧桶身的目的。附件：包括支持桶身的木、铁架，橡皮管及控制进水流速的龙头开头或夹子等。(2)操作注意事项：容卵量：容水量约150 公斤的桶身可放受精卵2040 万粒。流速：卵在桶内翻动至孵化桶罩下口为宜，每分钟水的流量为7.613.2 公斤左右。2.孵化缸：是目前小规模人工繁殖鱼苗的渔场最普遍使用的一种孵化工具。依进水方式的不同又可分为两类：一类为缸底进水，如漏斗式孵化缸及环道式孵化缸，前者有制成的专供孵化用的成品，或利用内壁光滑的普通水
