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1、兽医微生物学讲议十,第九章 革兰氏阴性需氧杆菌,G需氧杆菌属于细菌门的第七部分。 包括8个科16个关系未定的属，在兽医上具有重要意义的主要是： 假单胞菌科：绿脓杆菌； 伯氏菌属：鼻疽杆菌、类鼻疽杆菌； 布氏杆菌属：布氏杆菌； 波氏杆菌属：支气管败血波氏杆菌、禽波氏菌等。,第一节 假单胞菌属,假单胞菌属(Pseudomonas)是一群有动力、需氧的革兰氏阴性菌，广泛分布于土壤、水及空气中。,绿脓杆菌,铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)，俗称为绿脓杆菌，广泛存在于自然界中，以及人畜体表和各腔道中，为条件致病菌。 为常见的多种家畜和人的创伤感染、泌尿系统感染和牛乳房炎病原，
2、还可致败血症。,一、生物学性状,大小：0.6-2.0um，G，有菌毛，有鞭毛（13根）、粘液型菌株有多糖荚膜。,一、生物学性状,需氧、营养要求不高，普通营养生长良好。菌落：圆形、边缘不整齐、扁平隆起、光滑湿润、常互相融合形成菌苔。 能产生蓝绿色的绿脓素和绿色荧光的荧光素，均为水溶性色素。能分解葡萄糖，产生H2S，靛基质阴性，液化明胶，氧化酶阳性。,二、微生物学诊断,病料涂片镜检意义不大，应进行细菌分离及生化鉴定。三、免疫及微生物学防治 兽医上人工免疫预防无实际意义。 在人医中，对烧伤患者采用多价绿脓杆菌免疫血清治疗可降低败血症的发病率和死亡率。,第二节 布氏杆菌属,布氏杆菌属(Brucella
3、)为一革兰氏阴性短小杆菌。 该菌为牛羊猪等动物的病原菌，可引起母畜流产，公畜附丸睾炎。 人类与病畜或带菌动物接触，或食用染菌肉类，乳制品，可发生感染，称布氏杆菌病(Brucellosis)。 临床表现为间歇发热，称波浪热。,一、生物学性状,（一）形态与染色 初次分离呈小球杆状，大小为0.20.50.51u m。多次传代后，牛、猪布氏杆菌可变成杆状，大小为0.50.70.61.5um，多单在，少呈链状。 本菌不形成芽胞，无鞭毛，不能运动。 革兰氏阴性。,（一）形态与染色,本菌有抗酸染色性，对布氏杆菌有鉴别意义。,（一）形态与染色,左为E.coli；右为布鲁氏杆菌,（一）形态与染色,布氏杆菌电镜照
4、片（伪着色）,（二）培养特性,专性需氧菌。 初次分离时要在510CO2环境下始能生长。最适生长温度为37，最适pH值为6.6-7.4。 人工培养数代后，即适应普通大气。 普通培养基生长不好，生长迟缓。加及血清或肝浸液等可促进生长。 初代培养常需510天，甚至2030天，方可见生长；经传代后的菌种，约2472小时即可生长良好。,（二）培养特性,在肝汤琼脂或胰蛋白胨琼脂上生长，呈圆形、光滑、稍隆起，均质而中央常有细微颗粒；初无色透明，后渐浑浊而带灰白甚至灰黄色；大小差异大，直径约0.1mm至23mm。 在液体培养基上，培养48小时呈轻度浑浊，一周后混浊明显，有沉淀。,（三）生化反应,本菌属分解糖的
5、能力不同: 不产生吲哚； 不液化明胶； 尿素分解阴性； MR试验阴性； VP试验阴性； 石蕊牛乳阴性； 过氧化氢酶阳性。,（四）抵抗力,本菌抵抗力较强: 在土壤、皮毛、肉和乳制品及水中可生存数周至数月。 但在湿热6010min死亡； 直射阳光下10-20min死亡； 对消毒剂抵抗力不强: 3的来苏儿中数分钟内死亡。,（五）抗原构造与分型,布氏杆菌属含有两种抗原物质。 一种是M抗原（羊布氏菌菌体抗原） 另一种是A抗原（牛布氏菌菌体的抗原） 两种抗原在三种菌中含量不同: 羊布氏菌M:A是20:1 牛布氏杆菌M:A1:20 猪布氏杆菌M:A1:2。,二、致病性与免疫性,（一）致病物质： 内毒素主主要
6、致病物质。 马尔他布氏杆菌毒力最强，其次为猪布氏杆菌、流产布氏杆菌毒力较弱。 透明质酸酶、荚膜等也具有较强的侵袭力。,（二）所致疾病,本属细菌可感染的动物种类极多，目前已知有六十多种；其中有各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。 布氏杆菌所致病，母畜主要症状为流产，公畜主要发生附睾炎,（三）免疫性,一般认为布氏杆菌感染后形成的免疫是有菌免疫，即初次感染后病菌存在体内，对再次感染有较强的免疫力。 近年来学者认为，随着病程的延续，机体免疫力增强，病菌可被不断消灭，而最终变成无菌免疫。 布氏菌感染后，以细胞免疫为主，产生的IgG、IgM起调理作用。,疫苗,1、羊型5号（M5）
7、弱毒活菌苗：由哈兽药研究所生产，采用马尔他布氏杆菌H28强毒经鸡体长期传代减毒筛选出弱毒制成的疫苗。 使用方法是皮下注射或气雾免疫，对羊免疫期为1年半、对牛和鹿免疫期为1年。,2、猪型2号（S2）弱毒活菌苗,由农业部兽药监察所研制，采用猪布氏杆菌的变种制备而成的疫苗。 使用方法：口服（饮水），对猪亦可皮下注射，羊可肌肉注射。免疫期：绵羊半年到1年，山羊和猪均为一年。,三、微生物学检查,（一）细菌学检查： 首先采集标本：流产胎儿胃内容物、羊水及胎盘的坏死部分或母畜阴道分泌物、乳汁、尿液等。 其次：直接涂片，抗酸染色镜检；,（一）细菌学检查,再：分离培养：以优质培养基，加入抗生素，两套培养基分别置普通环境和510CO2环境中培养，培养时间应在30天以上。 如有可疑菌落，作玻板凝集试验，以确定。,（一）细菌学检查,分离培养物可进行动物试验：细菌悬液以腹腔可皮下注射接种豚鼠。 一方面可采取血液获得抗血清，测凝集价，如在1：50以上为阳性； 另一方面，剖检，检查脾脏、肝脏实质器官，观察是否有结节存在。,（二）血清学诊断,凝集反应、补体结合反应和抗球蛋白试验。,（三）皮内试验,可用于绵羊、山羊及猪的诊断。 布氏水解素（布氏菌素brucellin）0.2ml，注射羊尾皱襞部，猪耳根部皮内。2448小时后观察注射部位，如出现红肿为阳性反应。,微生物学诊断程序,本章结束,
