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1、社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识河北北方学院 毕业论毕业论 文开题报题报 告 题题 目：研究张家口地区奶牛乳房炎病原菌检测中细菌通用引物的作用 姓 名： 谢谢佳 院 系： 动动物科技学院 专专 业业： 动动植物检检疫学 年 级级： 07级动级动 植物检检疫学本科班 学 号： 20071040115 指导导教师师： 张张 丽丽 云 开题时间题时间 ： 2010-12-17 河北北方学院教务处务处 制社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识v论文题目v研究张家口地区奶牛乳房炎病原菌检测中
2、细 菌通用引物的效用v课题来源v指导教师承担v研究方向v旨在通过对细菌通用引物在奶牛乳房炎病原 菌检测中作用的研究来探寻一种简单、快捷 的检测方法。v一、立题依据（研究的目的与意义）社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识随着我国人民生活水平的不断提高，人们对牛奶的消费量迅速增加，从而促进了随着我国人民生活水平的不断提高，人们对牛奶的消费量迅速增加，从而促进了 奶牛业生产的迅速发展。目前，我国人均牛奶占有量为奶牛业生产的迅速发展。目前，我国人均牛奶占有量为6kg,6kg,世界平均世界平均80kg80kg，印度，印度 66kg66kg，日本，日
3、本68kg68kg，欧洲，欧洲285kg285kg，美国，美国260kg260kg，可见差距之大。牛奶作为一种非常理，可见差距之大。牛奶作为一种非常理 想的食品正逐渐被人们所接受，想的食品正逐渐被人们所接受，“一杯奶强壮一个民族一杯奶强壮一个民族”有其深刻的内涵，我国有其深刻的内涵，我国 目前正在推行的学生奶工程具有非常深刻的意义。由此可见，我国的奶牛业生产目前正在推行的学生奶工程具有非常深刻的意义。由此可见，我国的奶牛业生产 前途光明。前途光明。 饲养奶牛的目的就是要最大化地追求奶牛的高产、稳产、优质、安全和高效生产饲养奶牛的目的就是要最大化地追求奶牛的高产、稳产、优质、安全和高效生产. .
4、 通过对奶牛乳房炎的调查了解通过对奶牛乳房炎的调查了解, ,可以认识奶牛的乳房炎对奶牛业的危害可以认识奶牛的乳房炎对奶牛业的危害, ,并可指导并可指导 奶牛的饲养管理技术及环境控制奶牛的饲养管理技术及环境控制, ,使奶牛的生产效益最大地得到发挥使奶牛的生产效益最大地得到发挥. . 奶牛产业是奶牛产业是 我省扶持发展的一项重点产业承德，唐山，沧州等地都有较大的养殖基地。通过我省扶持发展的一项重点产业承德，唐山，沧州等地都有较大的养殖基地。通过 近近1010年的发展，年的发展，我我省已经有较大的奶牛养殖基地和鲜奶生产基地。如何巩固和稳 定奶牛产业，确保农民收入持续增加，成为我省亟待解决的问题。如何
5、为消费者 提供优质的奶产品是奶业工作者要完成的重要任务。奶牛乳房炎，特别是隐性乳 房炎一直是困扰奶牛业经济效益及其迅速发展的主要原因之一。我国的奶牛隐性 乳房炎头数阳性率为464857，乳区阳性率为280590。国 外奶牛乳房炎发病率也很高，例如美国为3070。高乳房炎发病率造成奶牛 产奶量下降，牛奶质量下降，母牛过早淘汰等、给奶牛业造成巨大损失。鉴于乳 房炎高发病率、低治愈率的特点，乳房炎的预防越来越受到人们的关注。世界范 围内，每年的牛奶生产损失可达380万吨；在我国每年用于治疗奶牛乳房炎的费 用近亿元人民币。 社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗
6、位常用地理知识奶牛乳房炎是乳房受到物理、化学、微生物刺激所发生的一种炎性变化， 其特点是奶中体细胞，特别是白细胞增多以及乳腺组织发生病理变化。奶牛乳 房炎是世界奶牛业的主要危害因素之一，它不仅影响产奶量，造成经济损失， 而且影响牛奶的品质，危害人类的健康。据我国北京、上海、广州、哈尔滨等 城市调查，乳房炎是奶牛场最严重的疾病之一，发病率达40%以上，个别牛群 发病率更高，造成的经济损失虽无确切数据，但也是惊人的。【1】常规的检测方法是根据不同致病菌的生物学特性,采用不同的培养基和培养 方法,检出可疑的致病菌,再用生化反应、血清学试验、噬菌体裂解试验等方法加 以鉴定。但由于临床用药等原因,细菌培
7、养常常阴性,并且传统的检测方法操作繁 琐,费时费力。我们利用建立在16S rRNA基础上的通用引物,并结合PCR快速、灵 敏的特点,可在3 h4 h内扩增出奶样中致病菌的相应基因,为扩增产物的进一步 鉴定及奶牛乳房炎的诊断、治疗奠定基础。为了建立PCR直接检测奶牛乳房炎致 病菌的方法,探索通用引物在奶牛乳房炎致病菌检测中的应用价值。利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩增标准菌 株及患有奶牛乳房炎的奶样。查阅到有关实验研究表明【2】,通用引物扩增5-6种 标准菌株,可得到清晰的电泳条带;通用引物PCR可检出标准菌株DNA;对患有奶牛 乳房炎的奶样进行扩
8、增,也可得到清晰的电泳条带。建立在16S rRNA【3】基础上 的通用引物在奶牛乳房炎的检测，可为进一步判断细菌的种类奠定基础。 旨在通过对细菌通用引物在奶牛乳房炎病原菌检测中作用的研究来探寻一 种简单、快捷的检测方法【4】。社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识二、研究内容(内容、结构框架或研究提纲以及要突破的难点)： （1）根据学过的关于乳房炎的知识以及文献 资料确定各种试验菌种； （2）制备标准菌DNA以及样品DNA （3）利用建立在16S rRNA【5】基础上的通用 引物, 并结合PCR快速、灵敏的特点,可在3 h4 h内扩增出奶样
9、中致病菌的相应基因,为 扩增产物的进一步鉴定及奶牛乳房炎的诊断 奠定基础三、研究方法与技术路线三、研究方法与技术路线社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识查阅文献拟定各种菌株制备标准菌 DNA及样品DNA通用引物扩增的广谱性试验细菌菌液灵敏度试验染色体稀释灵敏度试验特异性检验（对以上各种细菌进行扩增 ，观察这对引物扩增的特异性）PCR检测方法与步骤引物的设计和合成 PCR扩增检测PCR扩增产物社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识v四、研究过度安排v2010年11月完成文献的查阅v201
10、1年1月4月完成实验内容v2011年5月完成论文v五、预期研究结果v利用通用引物扩增各种病原菌得到了清晰 的条带,同时扩增奶牛乳房炎的奶样,也得到 了条带社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识 六、参考文献： 1 米耀荣.郭生泉奶牛乳房炎的危害及其防治措施J. 畜牧与饲料科学2009，7(3):175-181 2 韦莉萍.朱冰.胡琼 金黄色葡萄球菌随机引物扩增 DNA(RAPD-DNA)多态性分型研究 J.中华医学检验 杂志2000，4(02)：145-152 3 杨红.李颖.关国华.李秀玉 Sequencing of ITS region in rRNA gene of a heterokaryon and its segregants of Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum J .农业生物技术学报2002，8(04) ：134-145 4 陈火胜.通用引物PCR技术的应用概况J.中国病毒 学,1994,9(4):279-282. 5 刘吉荣.吴婉芳.秦雨春 原核生物16SrDNA的PCR- ELISA检测方法的研究 J .农业生物技术学报,1998， 10（03）：156-163社会主义核心价值体系质量体系审核的类型榆林开发区一小北师四下精打细算课件营运岗位常用地理知识
