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1、实验二细菌的单染色及革兰氏染色（一）简单染色法l目的要求学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的 简单染色法；巩固显微镜（油镜）的使用方法和无菌操作技术 。l基本原理借助物理因素（如：细胞及细胞物质对染料的毛 细现象、渗透、吸附作用等）和化学因素（如： 正负离子之间的相互吸引等）的作用而进行的。l实验器材菌种藤黄八叠球菌染色剂草酸铵结晶紫染液番红染液仪器或其他用具显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。操 作 步 骤涂 片干 燥固 定 染 色 镜 检 水 洗 干 燥l实验结果根据观察结果，绘出细菌形态图。l思考题（P76五、2. （）（2）（3）在进行细菌涂片时应注意哪些环节？细菌制片时为
2、什么要进行加热固定？在加热固 定时应注意什么？为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？（二）革兰氏染色法l目的要求学习并初步掌握革兰氏染色法；了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中 的重要性。l实验器材菌种 枯草芽孢杆菌12-18h营养琼脂斜面培养物 大肠杆菌约24h营养琼脂斜面培养物染色剂 草酸铵结晶紫染液 卢戈氏碘液 95%乙醇 番红染色液仪器或其他用具 显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、无菌水等。操 作 步 骤采用三区涂片法制片大肠杆菌枯草芽孢杆菌大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合涂片操 作 步 骤大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合涂 片油镜下形态（革兰氏染色）大肠杆菌萌发芽孢的枯 草芽孢杆菌l实验结果列表说明你所观察到的细菌形状、颜色和革 兰氏染色反应。菌 种 形 态 颜 色 结果（、）l思考题你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确 性？其中最关键的环节是什么？在革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太 老，用老龄细菌染色会出现什么问题？你认为革兰氏染色中，哪一个步骤可以省去而 不影响最终结果？在什么情况下可以采用？
