《液相色谱常见问题及其对策－三》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液相色谱常见问题及其对策－三（50页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱常见问题及其对策液相色谱常见问题类型l A. 压力异常（偏高、波动）l B. 漏液 l C. 保留时间漂移l D. 基线问题（漂移、噪声） l E. 峰形异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875现象：无压力，流动相不流动 可能原因1、保险丝断或电源问题2、泵头内有空气或流动相不足3、漏液4、单向阀损坏5、柱塞杆折断6、压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压 力)液相色谱常见问题及其对策 压力异常SHIMADZUSolutions for Science Sinc
2、e 1875现象：压力持续偏高或不断上升1、流速设定过高2、保护柱或柱子筛板堵塞3、流动相使用不当或有缓冲盐析出4、色谱柱选择不当5、进样阀损坏6、线路过滤器堵塞液相色谱常见问题及其对策 压力异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875现象：压力持续偏低1、流速设定过低2、色谱柱选择不当3、柱温过高4、系统漏液液相色谱常见问题及其对策 压力异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875现象：压力持续偏低1、流速设定过低2、色谱柱选择不当3、柱温过高4、系统漏液液相色谱常见问题及其对策 压力异常SHIMADZUSolu
3、tions for Science Since 1875现象：压力波动 可能原因1、使用了梯度洗脱2、脱气不充分3、系统漏液4、泵头中有气泡5、柱塞密封圈损坏6、单向阀损坏液相色谱常见问题及其对策 压力异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875接头处漏液1、接头处松动2、接头磨损3、接头被污染4、部件不匹配液相色谱常见问题及其对策 漏液SHIMADZUSolutions for Science Since 1875泵漏液1、单向阀松动2、泵密封损坏3、放空阀损坏4、接头松动（不要拧的太紧）液相色谱常见问题及其对策 漏液SHIMADZUSolutions
4、 for Science Since 1875泵漏液1、单向阀松动2、泵密封损坏3、放空阀损坏4、接头松动（不要拧的太紧）液相色谱常见问题及其对策 漏液SHIMADZUSolutions for Science Since 1875进样阀漏液可能原因1、进样针尺寸不合适2、定量环堵塞3、废液管堵塞4、废液管产生虹吸5、进样口密封松动6、转子密封损坏液相色谱常见问题及其对策 漏液SHIMADZUSolutions for Science Since 1875检测器漏液可能原因1、流通池垫片损坏2、流通池透镜破碎 3、手紧接头处漏液4、废液管堵塞5、流通池堵塞液相色谱常见问题及其对策 漏液SHIM
5、ADZUSolutions for Science Since 1875保留时间漂移可能原因1、柱温变化2、流动相组分变化3、色谱柱没有平衡4、流速变化5、泵中有气泡6、流动相选择不当7、键合相流失8、缓冲容量不够液相色谱常见问题及其对策 保留时间漂移SHIMADZUSolutions for Science Since 1875基线漂移可能原因1、温度波动2、流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶 剂)3、流通池被污染或有气泡4、流通池窗口破裂5、流动相配比不当或流速变化6、柱子平衡（约3060min）液相色谱常见问题及其对策 基线问题SHIMADZUSolutions for Science
6、 Since 1875基线漂移可能原因7、流动相污染，变质或由低品质 溶剂配成8、样品中有强保留的物质以馒头 样峰被洗出9、检测器没有设定在最大吸收波 长处液相色谱常见问题及其对策 基线问题SHIMADZUSolutions for Science Since 1875基线噪声（规则的）可能原因1、流动相、泵、检测器中有气泡2、有地方漏液3、流动相混和不均匀4、温度影响（检测器和柱温差别太大 ）5、其他电子设备的影响液相色谱常见问题及其对策 基线问题SHIMADZUSolutions for Science Since 1875基线噪声（不规则的）可能原因1、流动相污染、变质或由低质溶剂配 成
7、2、有地方漏液3、流动相各溶剂不相溶或混和不均匀4、流通池污染5、检测池能量不足6、系统内有气泡液相色谱常见问题及其对策 基线问题SHIMADZUSolutions for Science Since 1875前沿峰、拖尾峰可能原因1、柱塞板堵塞2、色谱柱塌陷3、柱外效应4、干扰峰5、缓冲不足或不合适6、化学或次级保留（硅羟基效应）液相色谱常见问题及其对策 峰形异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875前沿峰、拖尾峰可能原因7、重金属污染8、样品溶剂选择不当9、样品过载10、柱温过低液相色谱常见问题及其对策 峰形异常SHIMADZUSolutions
8、for Science Since 1875分叉峰可能原因1、保护柱或分析柱污染2、样品溶剂不溶于流动相液相色谱常见问题及其对策 峰形异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875峰展宽 进样体积过大 流动相粘度过高 检测池体积过大 保留时间过长 柱外体积过大 样品过载液相色谱常见问题及其对策 峰形异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875峰变形可能原因1、样品过载2、样品溶剂选择不当液相色谱常见问题及其对策 峰形异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875鬼峰1、进样阀残余
9、峰 2、样品中未知物 3、柱未平衡 4、水污染 5、三氟乙酸氧化液相色谱常见问题及其对策 峰形异常SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件维护流程图吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器手动进样器检测器SHIMADZUSolutions for Science Since 1875材料：不锈钢烧结，孔径10um故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成措施：用520的稀硝酸，超声波清洗，再用蒸馏水清洗注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断吸滤头液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 18
10、75LC-10ATvp泵：串联 式往复泵LC-10ADvp泵：并联式 往复泵液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件单向阀结构抛光面透明塑料垫片宝石球吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头流动相单向阀原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件故障1：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球与垫片分开2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清
11、洗单向阀SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用 超声波清洗单向阀SHIMADZUSolutions for Science Since 1875故障：密封圈磨损而导 致密封不良现象：系统压力波动大 或漏夜措施：更换密封圈注意点：更换密封圈拆卸泵头前，柱塞杆复位 （PSET）柱塞密封圈流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875故障：堵塞现象：
12、系统压力波动大或压力偏高措施：5稀硝酸，超声波清 洗判断依据：关闭排液阀， 断开出口管路，设定流 速1mL/min，如压力 3kgf/cm2，则可能堵塞。线路过滤器排液阀压力传感器线路过滤器流动相液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875手动进样阀故障：转子密封损坏现象：漏液原因：a 拧的太紧b 样品太脏c 针头损坏或不使用液相专用 针解决措施：更换转子密封，并在使用时注意保养液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件手动进样阀故障：载样困难原因
13、：a 定量环堵塞b 进样器污染解决措施：清洗或更换定量环、进样 器SHIMADZUSolutions for Science Since 1875柱子故障：系统高压、峰型变差（拖尾峰、前沿峰 、分叉峰），保留时间的改变解决措施：清洗正相柱，正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙 醇反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05M 稀硫酸液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875分 析 柱 的 维 护1、在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下 (0.2-0.3 ml/min)冲洗 30 mins，长时间未用的分析柱也要同样 处理 2、定期使用强
14、溶剂冲洗柱子 3、使用缓冲盐时，要先用水冲洗，再用有机溶剂冲洗 4、净化样品 5、分离条件 6、不使用时，要盖上盖子，避免固定相干枯 7、使用预柱 8、避免流动相组成及极性的剧烈变化 9、避免压力脉冲的剧烈变化液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件峰产生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化（进口处产生不均匀的空隙） 2. 样品劣化（生成氧化物、分解物等）判断标准所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化SHIMADZUSolutions for Science Since 1875延长柱寿命方法：倒冲柱换过滤片
15、修补柱头液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件柱的补修SHIMADZUSolutions for Science Since 1875填料的取出液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875恢复例液相色谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875更换氘灯（紫外检测器） 判断氘灯能量：设定220nm波长，检查参比池能量，如 能量低于800，需更换氘灯。 操作注意点：不要用手直接接触氘灯表面液相色
16、谱容易出问题的部件SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 液相色谱容易出问题的部件故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN 和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。紫外检测器SHIMADZUSolutions for Science Since 1875 其他问题溶剂的过滤滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不 适 用于二甲基甲酰胺。再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂SHIMADZUSolutions for Science Since 1875脱气：除去流动相中溶解
